簡述質粒授予宿主細胞抗性的4種機制

時間 2021-05-07 19:59:22

1樓:刀劍信譽

質粒 質粒是真核細胞細胞核外或原核生物擬核區外能夠進行自主複製的遺傳單 位,包括真核生物的細胞器(主要指線粒體和葉綠體)中和細菌細胞擬核 區以外的環狀脫氧核糖核酸(dna)分子。現在習慣上用來專指細菌(大腸杆 菌)、酵母菌和放線菌等生物中細胞核或擬核中的 dna 以外的 dna 分子。 在基因工程中質粒常被用做基因的載體。

許多細菌除了擬核中的 dna 外, 還有大量很小的環狀 dna 分子,這就是質粒(plasmid)(補充:部分質粒為 rna)。質粒上常有抗生素的抗性基因,例如,四環素抗性基因或卡那黴 素抗性基因等。

有些質粒稱為附加體(episome),這類質粒能夠整合進細菌 的染色體,也能從整合位置上切離下來成為遊離於染色體外的 dna 分子。 目前,已發現有質粒的細菌有幾百種,已知的絕大多數的細菌質粒都 是閉合環狀 dna 分子(簡稱 cccdna)。細菌質粒的相對分子質量一般較小, 約為細菌染色體的 0.

5%~3%。根據相對分子質量的大小,大致上可以把質 粒分成大小兩類:較大一類的相對分子質量是 40×106 以上,較小一類的相 對分子質量是 10×106 以下(少數質粒的相對分子質量介於兩者之間)。

每個 細胞中的質粒數主要決定於質粒本身的複製特性。按照複製性質,可以把 質粒分為兩類:一類是嚴緊型質粒,當細胞染色體複製一次時,質粒也復 制一次,每個細胞內只有 1~2 個質粒;另一類是鬆弛型質粒,當染色體復 制停止後仍然能繼續複製,每一個細胞內一般有 20 個左右質粒。

這些質粒 的複製是在寄主細胞的鬆弛控制之下的,每個細胞中含有 10-200 份拷貝, 如果用一定的藥物處理抑制寄主蛋白質的合成還會使質粒拷貝數增至幾千 份。如較早的質粒 pbr322 即屬於鬆弛型質粒,要經過氯黴素處理才能達 到更高拷貝數。一般分子量較大的質粒屬嚴緊型。

分子量較小的質粒屬鬆 弛型。質粒的複製有時和它們的宿主細胞有關,某些質粒在大腸桿菌內的 複製屬嚴緊型,而在變形桿菌內則屬鬆弛型。 在基因工程中,常用人工構建的質粒作為載體。

人工構建的質粒可以集 多種有用的特徵於一體,如含多種單一酶切位點、抗生素耐藥性等。常用 的人工質粒運載體有 pbr322、psc101。pbr322 含有抗四環素基因(tcr) 和抗氨苄青黴素基因(apr),並含有 5 種內切酶的單一切點。

如果將 dna 片 段插入 ecori 切點,不會影響兩個抗生素基因的表達。但是如果將 dna 片 段插入到 hind iii、bam h i 或 sal i 切點,就會使抗四環素基因失活。這 時,含有 dna 插入片段的 pbr322 將使宿主細菌抗氨苄青黴素,但對四環 素敏感。

沒有 dna 插入片段的 pbr322 會使宿主細菌既抗氨苄青黴素又抗 四 環 素 , 而 沒 有 pbr322 質 粒 的 細 菌 將 對 氨 苄 青 黴 素 和 四 環 素 都 敏 感 。 psc101 與 pbr322 相似,只是沒有抗氨苄青黴素基因和 psti 切點。質粒 運載體的最大插入片段約為 10 kb(kb 表示為千鹼基對)。

名稱 pao815 長度 7709 bp 抗性 amp 特殊效能 酵母表達

什麼是質粒?它有什麼特點?主要有哪幾種?各有何理論和實踐意義

質粒載體的四個基本特徵

2樓:匿名使用者

條件:①要具有限制酶的切割位點②要有標記基因(如抗性基因)以便於重組質粒的篩選③能夠在宿主細胞中穩定存在並複製④是安全的對細胞無害

3樓:匿名使用者

1,有多個限制酶切割位點;具有標記基因;能在宿主細胞中自主複製;不損害宿主細胞

2,不知道什麼是基因克隆..這個是基因工程的步驟....

獲取目的基因;把目的基因匯入載體;把載體匯入受體細胞;目的基因的檢測與表達

3,4 123來不及回答的很好`

我只是補充一下,1,2條是在生物書上的..自我感覺比他的稍準確點..嘿嘿``

4樓:123來不及

1 具有自我複製的能力;有1到多個限制酶切割位點;有標記基因(抗藥性基因);對宿主細胞無害

2 獲取目的基因;構建表達載體;匯入受體細胞;對目的基因的檢測和鑑定

3 一個羊的體細胞的細胞核取出,放入另一隻羊去核的卵細胞中,將這個新組建的細胞放入第三隻羊的子宮內,生出的小羊就是「多莉」。這是利用核移植技術進行的克隆。

4 比如轉基因技術培育的抗蟲棉,可以提高棉花對害蟲的抵抗能力,這是對人類有利的;但如果將克隆技術濫用的話,可能產生很多社會法律方面的糾分。

學文的不需對這一部分做深入瞭解。必修二中對基因工程有一些初步介紹,只把那個搞清楚就行了。

簡述質粒的結構及其功能

5樓:匿名使用者

質粒是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區dna原有的能夠自主複製的較小的dna分子。

質粒是環狀的核外自主複製子,因此 首先它一定要有「複製起始位點,ori」或稱 「ori 基因」「ori序列」等,其他的組成單元 對於質粒來說,可有可無,只要能自我複製便是質粒.但一般天然質粒都還含有某種特殊的基因,如抗性、某物質降解酶什麼的,賦予質粒一定功能.

但對於人工構建的質粒,要有實用價值的話,僅僅複製還不夠,除過 ori 外,還要包括:sd序列、啟動子、多克隆位點(插入外源基因用)、終止序列、選擇性標記基因(如抗性基因)等

特點: 具有自我複製能力,具有標記 基因 ,鹼基互補。

用途:多用於 基因 工程,可用於重組dna,是一種理想的載體。

6樓:匿名使用者

質粒是環狀的核外自主複製子,因此首先它一定要有「複製起始位點,ori」或稱「ori基因」「ori序列」等,其他的組成單元對於質粒來說,可有可無,只要能自我複製便是質粒.但一般天然質粒都還含有某種特殊的基因,如抗性、某物質降解酶什麼的,賦予質粒一定功能.但對於人工構建的質粒,要有實用價值的話,僅僅複製還不夠,除過ori外,還要包括:

sd序列、啟動子、多克隆位點(插入外源基因用)、終止序列、選擇性標記基因(如抗性基因)等.

質粒圖譜怎麼看

7樓:匿名使用者

第一步:首先看ori的位置,瞭解質粒的型別(原核/真核/穿梭質粒)

ori的箭頭指複製方向,其他元件標註的箭頭多指轉錄方向(正向)。

第二步:再看篩選標記,如抗性,決定使用什麼篩選標記:

(1)ampr:水解β-內醯胺環,解除氨苄的毒性。

(2)tetr :可以阻止四環素進入細胞。

(3)camr:生成氯黴素羥乙醯基衍生物,使之失去毒性。

(4)neor(kanr):氨基糖苷磷酸轉移酶,使g418(卡那黴素衍生物)失活。

(5)hygr:使潮黴素β失活。

第三步:看多克隆位點(mcs)。它具有多個限制酶的單一切點,便於外源基因的插入。

如果在這些位點外有外源基因的插入,會導致某種標誌基因的失活,而便於篩選。決定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。

第四步:再看外源dna插入片段大小。質粒一般只能容納小於10kb的外源dn**段。一般來說,外源dn**段越長,越難插入,越不穩定,轉化效率越低。

第五步:是否含有表達系統元件,即啟動子-核糖體結合位點-克隆位點-轉錄終止訊號。這是用來區別克隆載體與表達載體。

克隆載體中加入一些與表達調控有關的元件即成為表達載體。選用那種載體,還是要以實驗目的為準繩。

質粒是什麼?

8樓:靠名真tm難起

質粒(plasmid)是細菌、酵母菌和放線菌等生物中染色體(或擬核)以外的dna分子,存在於細胞質中,具有自主複製能力,使其在子代細胞中也能保持恆定的拷貝數,並表達所攜帶的遺傳資訊,是閉合環狀的雙鏈dna分子。

質粒不是細菌生長繁殖所必需的物質,可自行丟失或人工處理而消除,如高溫、紫外線等。質粒攜帶的遺傳資訊能賦予宿主菌某些生物學形狀,有利於細菌在特定的環境條件下生存。

質粒(plasmid) 廣泛存在於生物界,從細菌、放線菌、絲狀真菌、大型真菌、酵母到植物,甚至人類機體中都含有。從分子組成看,有dna 質粒,也有rna 質粒; 從分子構型看,有線型質粒、也有環狀質粒: 其表型也多種多樣。

細菌質粒是基因工程中最常用的載體。

9樓:匿名使用者

質粒(plasmid)

質粒是真核細胞細胞核外或原核生物擬核區外能夠進行自主複製的遺傳單位,包括真核生物的細胞器(主要指線粒體和葉綠體)中和細菌細胞擬核區以外的環狀脫氧核糖核酸(dna)分子。現在習慣上用來專指細菌(大腸桿菌)、酵母菌和放線菌等生物中細胞核或擬核中的dna以外的dna分子。在基因工程中質粒常被用做基因的載體(vector)。

許多細菌除了擬核中的dna外,還有大量很小的環狀dna分子,這就是質粒(plasmid)(補充:部分質粒為rna)。質粒上常有抗生素的抗性基因,例如,四環素抗性基因或卡那黴素抗性基因等。

有些質粒稱為附加體(episome),這類質粒能夠整合進細菌的染色體,也能從整合位置上切離下來成為遊離於染色體外的dna分子。

目前,已發現有質粒的細菌有幾百種,已知的絕大多數的細菌質粒都是閉合環狀dna分子(簡稱cccdna)。細菌質粒的相對分子質量一般較小,約為細菌染色體的0.5%~3%。

根據相對分子質量的大小,大致上可以把質粒分成大小兩類:較大一類的相對分子質量是40×106以上,較小一類的相對分子質量是10×106以下(少數質粒的相對分子質量介於兩者之間)。每個細胞中的質粒數主要決定於質粒本身的複製特性。

按照複製性質,可以把質粒分為兩類:一類是嚴緊型質粒,當細胞染色體複製一次時,質粒也複製一次,每個細胞內只有1~2個質粒;另一類是鬆弛型質粒,當染色體複製停止後仍然能繼續複製,每一個細胞內一般有20個左右質粒。這些質粒的複製是在寄主細胞的鬆弛控制之下的,每個細胞中含有10-200份拷貝,如果用一定的藥物處理抑制寄主蛋白質的合成還會使質粒拷貝數增至幾千份。

如較早的質粒pbr322即屬於鬆弛型質粒,要經過氯黴素處理才能達到更高拷貝數。一般分子量較大的質粒屬嚴緊型。分子量較小的質粒屬鬆弛型。

質粒的複製有時和它們的宿主細胞有關,某些質粒在大腸桿菌內的複製屬嚴緊型,而在變形桿菌內則屬鬆弛型。

在基因工程中,常用人工構建的質粒作為載體。人工構建的質粒可以集多種有用的特徵於一體,如含多種單一酶切位點、抗生素耐藥性等。常用的人工質粒運載體有pbr322、psc101。

pbr322含有抗四環素基因(tcr)和抗氨苄青黴素基因(apr),並含有5種內切酶的單一切點。如果將dn**段插入ecori切點,不會影響兩個抗生素基因的表達。但是如果將dn**段插入到hind iii、bam h i 或 sal i切點,就會使抗四環素基因失活。

這時,含有dna插入片段的pbr322將使宿主細菌抗氨苄青黴素,但對四環素敏感。沒有dna插入片段的pbr322會使宿主細菌既抗氨苄青黴素又抗四環素,而沒有pbr322質粒的細菌將對氨苄青黴素和四環素都敏感。psc101與pbr322相似,只是沒有抗氨苄青黴素基因和psti切點。

質粒運載體的最大插入片段約為10 kb(kb表示為千鹼基對)。