1樓:匿名使用者
因為是檢測的特異蛋白的表達,當然要用特異的抗體。
你現在的問題是先找到抗體再考慮其他。建議先找到這個蛋白的id號,利用這個id號先搜搜有沒有提供抗體的公司,可以到www.biocompare.
com上去試試。那上面各家公司的抗體都能搜到。
看看文獻上,有人做這個蛋白的wb麼?要是有,寫信去要點,這個是碰運氣的方式,但是如果碰到恰好有人做,人家又比較nice的話,你的問題就解決了。不好的地方是,抗體量非常有限,用完了,很難啟齒再要。。。
如果確認沒有抗體,要麼就表達這個蛋白,純化以後,免疫動物,去做抗體。如果單位沒有動物房,這個基本就沒法操作了。表達蛋白,純化的時會都會比較長,然後免疫動物也得幾個月,所以應該是耗時最長的辦法。
如果錢夠,直接找抗體合成公司,根據蛋白序列,設計抗原(可能是肽段)後定製抗體。多抗的時間短些,單抗怎麼也得要半年。好處是沒有表達純化的折磨,比自己做快點,公司一般的做得也還行,完全沒經驗找公司比較好。
如果實在沒有抗體,還有一個辦法,把樣品弄出來去打質譜,不用抗體,但是可以把這個蛋白的序列弄進去,搞點標準品,或類似標準品,就可以定量了。
2樓:晁映寒
去公司買咯 這有啥好選擇的 買能做綿羊的該蛋白的抗體 儘量選進口的 儘量選單抗
以上回答你滿意麼?
請教如何選擇western的抗體
3樓:匿名使用者
抗體複選擇一般注意幾點:
制1、特異性(特異bai性高較好,一般單抗優du於多抗,但有時你想貼出
zhi同一蛋白不同加
dao工形態,多抗能貼出所有帶,根據實驗選擇)2、效價(效價高)3、知名抗體公司,如cst、abcam、thermo等
4樓:科研達人
選擇抗體首先要根據自己的實驗需求來進行適合的選擇,然後要看選著抗體的特異性、效價、濃度比等等,口碑比較好的公司,如abcam、abclonal、santa等。
做western blot 的時候怎樣選擇抗體濃度
5樓:
western blot中蛋白樣品調節濃度有很多方法
先檢測出各個蛋白樣品的濃度,根據體積通過不同單位的loading buffer將樣品稀釋成不同的體積,即可以保證各個蛋白樣品濃度一致
或者在樣品裂解的時候,用裂解液或者pbs去稀釋蛋白樣品,達到調節濃度的目的
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