1樓：匿名使用者
可能有多種原因： 目標蛋白對細胞有毒性，導致細胞死亡； 轉染試劑以及dna用量資訊需要優化，否則對細胞具有傷害； 細胞貼壁轉染之後沒有正常換液。 建議：
考慮對目標蛋白進行截短構建、嘗試其他細胞系統； 摸索轉染試劑以及dna用量資訊，如果轉染試劑毒性太大，可以考慮嘗試義翹轉染試劑sinofection； 對轉染後的細胞進行換液處理，如果細胞狀態感覺不夠理想，可以考慮新增一些血清來幫助細胞恢復健康。 以上所有分析、建議的前提是，細胞培養、無菌操作等等都沒有問題。祝順利，加油~
2樓：匿名使用者
細胞死亡可能是由於sirna或者轉染試劑毒性導致的，sirna一般合成公司都會進行去內毒素處理，具體要看哪個廠家，轉染試劑最好選擇低毒的。我現在用的rfect小核酸轉染試劑轉hela細胞的敲出效率90%以上，轉染完以後不用換液，細胞死的比較少，可以參考一下。hela細胞是比較好轉的，所以只要選擇好轉染試劑，sirna/質粒，轉染條件，細胞狀態ok，都可以做到不錯的結果。
hela細胞進行脂質體轉染後，為什麼半邊死亡
3樓：匿名使用者
hela細胞進行脂質體轉染後，為什麼半邊死亡。
細胞轉染可以：（1）真核細胞可以摻入外源dna而獲得新的遺傳標誌；（2）應用於轉基因動植物；（3）應用於生物製藥、基因**、rna干擾。
脂質體介導法。
實驗原理。上圖所示是脂質體介導轉染的示意圖，它顯示了外源質粒進入細胞的一般過程。
外源基因進入細胞主要有四種方法：電擊法、磷酸鈣法和脂質體介導法和病毒介導法。電擊法是在細胞上短時間暫時性的穿孔讓外源質粒進入；磷酸鈣法和脂質體法是利用不同的載體物質攜帶質粒通過直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因進入細胞；病毒法是利用包裝了外源基因的病毒感染細胞的方法使得其進入細胞。
但是由於電擊法和磷酸鈣法的實驗條件控制較嚴、難度較大；病毒法的前期準備較複雜、而且可能對於細胞有較大影響；所以現在對於很多普通細胞系，一般的瞬時轉染方法多采用脂質體法。
利用脂質體轉染法最重要的就是防止其毒性，因此脂質體與質粒的比例，細胞密度以及轉染的時間長短和培養基中血清的含量都是影響轉染效率的重要問題，通過實驗摸索的合適轉染條件對於效率的提高有巨大的作用。
上圖是本次實驗採用的脂質體中陽離子組分的結構的示意圖。
本次實驗採用的脂質體是promega公司的transfast脂質體試劑，它是一種陽離子脂質體和中性脂質體的混合物，是對於本次實驗中採用的293t細胞優化的轉染試劑。
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