1樓:匿名使用者
植物細胞微絲束的光學顯微鏡觀察
【基本原理】
細胞骨架在通常情況下不穩定:如低溫、高壓、餓酸處理等。當用適當濃度的tritonx-100 處理細胞時,能溶解質膜結構中及細胞內許多蛋白質,而細胞骨架系統的蛋白質卻不被破壞顯得更清晰,m-緩衝液洗滌細胞,可以提高細胞骨架的穩定性,戊二醛固定能較好地儲存細胞骨架成分,經考馬斯亮藍r250 染色後,可使細胞骨架蛋白著色,而胞質背景著色弱,有利細胞骨架纖維顯示。
微絲、微管和中間纖維都是直徑很小的結構,最大的單根微管才25nm 左右,只能在電鏡下才能觀察到。目前研究細胞骨架的主要方法是應用高壓電鏡或免疫熒光顯微鏡技術。本實驗用普通光鏡觀察到細胞骨架,是因為骨架纖維成束分佈、結構經染色後,有誇大作用。
由於細胞經tritonx-100 抽提後剩下的主要是細胞骨架成分,使得顯現更清晰。細胞骨架是指細胞質中縱橫交錯的纖維網路結構,按組成成分和形態結構的不同可分為微管、微絲和中間纖維。它們對細胞形態的維持、細胞的生長、運動、**、分化和物質運輸等起重要作用。
光學顯微鏡下細胞骨架的形態學觀察多用1% triton x-100 處理細胞,可使細胞膜溶解,而細胞骨架系統的蛋白質被儲存, 再用考馬斯亮蘭r250 染色,使得胞質中細胞骨架得以清晰顯現。
【實驗用品】
1.材料:新鮮洋蔥鱗莖
2.試劑 1) m 緩衝液(ph 7.2)各成分終濃度為:
50mmol/l 咪唑(mw:68.08); 50mmol/l kcl(mw:74.55);
0.5mmol/l mgcl2·6h2o(mw:203.30); 1mmol/l egta(mw:380.36);
0.1mmol/l edta-na2(mw:372.24); 1mmol/l dtt(mw:154.3)
2) 6mmol/l pbs 磷酸緩衝液 (ph 6.5):kh2po4 : na2hpo4.2h2o = 7:3
3) 0.7% nacl 生理鹽水
4) 1% triton x-100(聚乙二醇辛基苯基醚) 溶於 m-緩衝液
5) 3% 戊二醛100ml: 25% 戊二醛取12ml,pbs 88ml
6) 0.2% 考馬斯亮藍r250 染液 200ml:考馬斯亮藍r250 0.2g;甲醇 46.5ml;冰乙酸 7ml;蒸餾水46.5ml
3.儀器:光學顯微鏡,鑷子,剪刀,試管,表面皿,滴管,載玻片,蓋玻片
【方法步驟】
【實驗結果】
洋蔥鱗莖外層與內層的表皮細胞比較(放大倍數10×20)
附:各種主要試劑的作用
1.triton x-100 (聚乙二醇辛基苯基醚)作用:非離子去垢劑;適當濃度的triton x-100,可使細胞膜溶解,而細胞質中的細胞骨架系統可被儲存。
2.m-緩衝液和磷酸緩衝液作用:維持細胞的滲透壓。
3.edta(乙二胺四乙酸)和egta(乙二醇雙醚四乙酸)作用:前者可螯合大部分金屬離子;後者專一性螯合ca2+,主要是高濃度的ca2+可是微管解聚,因此加入egta 來降低ca2+的濃度。
4.戊二醛作用:良好的固定劑,使細胞結構保持它原有狀態;
5.考馬斯亮蘭作用:非專一性結合蛋白質,使蛋白著色(藍色)。
植物細胞具有微絲
2樓:天啟星辰
這兩個意思都是一樣的,他們完全都是比較細微的一種是,所以才會產生製成,不懂的異同點。
3樓:稱絲
微軟和威視在特性上有哪些異同點?微管和微絲在特性上一個都是都是相同的功能,但是他們的才智和嗯,**不一樣
4樓:冼豔枋
你是在特性上,當然是有不同點,因為他們根本就不是一個而論的一種東西
5樓:山楂樹下
閉館和威視在特性上有哪些異同點?他們的相同是非常多的
6樓:昂掃地百寶
很多特點就把你可以從廣州去對比一下,衡器看看哪些上的那些普通的瞭解具體分析一下。
7樓:天龍老師
這個你可以進行對比一下的,但是如果讓我看的話,我覺得第一個可能更好一點。
細胞生物學裡面,微絲與微管在體外裝配過程中的異同。謝謝
8樓:羽翼的淡殤
不好意思,就我目前學到的來說
微管和微絲都是在體內合成的,並且會不斷合成的同時不斷分解如果是體內的話
微管:α,β微管蛋白構成2聚體
若干2聚體構成原纖維
13根原纖維構成一個微管
微絲:由蛋白纖維組成的實心纖維細絲,直徑5-7nm 長短不一
9樓:
在體內。有組織中心之類的。。其合成是受細胞調控的。體外就沒有嚴格的組織性。
微管、微絲、中間纖維構成細胞骨架,它們的區別是什麼?
10樓:養雅韻翠風
微絲又稱機動蛋白絲,或纖維狀機動蛋白,直徑7奈米的纖維。
微絲網路的空間結構和功能取決於所結合的微絲結合蛋白的種類。
細胞內微絲的組裝和去組裝的動力學過程與
細胞突起的形成,細胞質**,
細胞內物質運輸,肌肉收縮,吞噬作用,細胞遷移等多種細胞運動有關。微管是由微管蛋白亞基組裝而成,每個微管蛋白亞基都是由2個非常相似的球狀蛋白α和β微管蛋白結合而成的一二聚體,這種αβ-微管蛋白二聚體是細胞質內遊離態微管蛋白的主要存在形式,也是微管組裝的基本結構單位。微管蛋白二聚體縱向排列而形成原纖絲,13個原纖絲合攏和構成微管的管壁,沿微管圓周成螺旋狀排列。
分為單管,二聯管,三聯管。
功能:馬達蛋白利用水解atp產生能量攜帶所運輸的物質沿微管運動,即胞內物質運輸中間絲又稱中間纖維,10奈米的索繩狀結構,植物細胞裡是沒有的,組成十分複雜,包括i型酸性和ii型中性和鹼性角蛋白,iii型波形蛋白,結蛋白,膠質纖維絲蛋白,外周蛋白,iv型神經絲蛋白亞基和介連蛋白,還有v型,vi型。中間絲蛋白分子的中部有一段約為310個氨基酸殘基組成的高度保守的阿爾法螺旋桿狀區,是中間絲的重要結構特徵。
核纖層的重要支援結構,染色質的錨定位點,提供必要的機械支撐,連線胞內結構和細胞間連線,維持組織的整體功能。舉個例子就如同大樓的鋼筋,把很多結構連線起來還提供支撐力。
11樓:都夏煙梅海
**溝的形成由微管作用
而胞質**環由微絲(肌動蛋白絲)組成
胞質**是兩者結合作用
微絲與中間纖維有何區別?
微絲和微管的體外裝配特點
12樓:
細胞鬆弛素b能結合到微絲末端而阻止微絲的組裝;鬼筆環肽能與微絲強烈親和。從而抑制微絲解聚。秋水仙素能阻斷微管組裝,而紫衫酚則促進微管組裝並使微管穩定存在。
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