1樓:福梓維塗昭
將培養瓶豎立放一段時間(50min左右),然後用吸管輕輕吸取上面1ml的細胞懸液,移入另一個新的已加培基的培養瓶中。
或者ficoll分離,就像分離pbmc一樣,先把細胞混勻,然後小心緩慢地把細胞加入到ficol中,1000g離心20分鐘,收集位於ficoll和培養基之間的透明層,即為你的活細胞,這是在存在大量死亡細胞的時候採用,如果死亡細胞不是特別多的話,換液勤一點。
(僅供參考)
2樓:溫墨徹堅亥
懸浮細胞的轉染方法:(以下內容**生物幫資訊)
dxy721認為:
懸浮細胞和貼壁細胞在轉染過程中差別不大,主要差別在於轉染後的篩選,當然如果你做的是瞬時轉染就不存在篩選的問題了。
其實轉染的過程很簡單,問題是能不能轉的進去的,轉染率能有多少,轉進去是否可以穩定表達目的蛋白等等。
我們也是用脂質體做懸浮細胞的轉染,說明書上都有具體的操作過程,將脂質體和目的基因按比例混合,然後加到細胞懸液裡就ok了,說的簡單,實際上還是有一些細節要注意的,比如脂質體和目的基因混合的比例,轉染的細胞數,細胞的代數,細胞的狀態,有的還要求在轉染的前一天傳代一次,不過不要怕,這些在脂質體說明書上都有明確的說明,按照說明書做就可以了。
jinghuanlv認為:
懸浮細胞和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。
脂質體轉染的原理基於電荷吸引原理,先形成脂質體-dna複合物,散佈在細胞周圍,然後通過細胞的內吞作用,將目的基因匯入細胞內,而脂質體複合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低於貼壁細胞。
我們實驗室轉染懸浮細胞是用的電穿孔法,目前為止,懸浮細胞轉染的最好方法還是電轉,我們實驗室用的電轉儀是bio-rad的,使用條件是電壓250v,電容975uf,效果不錯,不妨一用。
如何去除懸浮細胞中的死細胞
3樓:郭敬明公積金
將培養bai瓶豎立放一段時間(50min左右du),然後用吸管輕zhi輕吸取dao
上面1ml的細胞懸專液,移入另一個新屬
的已加培基的培養瓶中。
或者ficoll分離,就像分離pbmc一樣,先把細胞混勻,然後小心緩慢地把細胞加入到ficol中,1000g離心20分鐘,收集位於ficoll和培養基之間的透明層,即為你的活細胞,這是在存在大量死亡細胞的時候採用,如果死亡細胞不是特別多的話,換液勤一點。
4樓:北京索萊寶科技****
將培養瓶豎立放一段時間(50min左右),然後用吸管輕輕吸取上面1ml的細胞懸液,移入另一個回新的已加培基的答培養瓶中。
或者ficoll分離,就像分離pbmc一樣,先把細胞混勻,然後小心緩慢地把細胞加入到ficol中,1000g離心20分鐘,收集位於ficoll和培養基之間的透明層,即為你的活細胞,這是在存在大量死亡細胞的時候採用,如果死亡細胞不是特別多的話,換液勤一點。
(僅供參考)
5樓:匿名使用者
可以試驗一下以bai下方法:1稀釋法。細du
胞稀釋後還能增殖
zhi,會越來越多,而細胞dao碎片相應地會越內來越少。2.自然容沉降法。
將細胞懸液移到離心管中,等細胞大部分下沉時,可將上液吸棄,再加入培養液懸浮細胞,此方法可反覆使用,同時每次可顯微鏡下觀察是否符合你的要求。
6樓:匿名使用者
使用maglive dead cell removal kit
如何去除懸浮培養細胞中的死細胞
懸浮細胞培養如何去除死細胞
懸浮細胞如何去除死細胞
7樓:北京索萊寶科技****
將培養瓶豎立放一段時間(50min左右),然後用吸管輕輕吸取上面1ml的細胞懸液,移入另一個新的已加培基的培養瓶中。
或者ficoll分離,就像分離pbmc一樣,先把細胞混勻,然後小心緩慢地把細胞加入到ficol中,1000g離心20分鐘,收集位於ficoll和培養基之間的透明層,即為你的活細胞,這是在存在大量死亡細胞的時候採用,如果死亡細胞不是特別多的話,換液勤一點。
(僅供參考)
8樓:奕德雪衣
可以試驗一下以下方法:1稀釋法。細胞稀釋後還能增殖,會越來越多,而細胞碎片相應地會越來越少。
2.自然沉降法。將細胞懸液移到離心管中,等細胞大部分下沉時,可將上液吸棄,再加入培養液懸浮細胞,此方法可反覆使用,同時每次可顯微鏡下觀察是否符合你的要求。
如何將死細胞從正常細胞中除去
9樓:
maglive 死細胞去除試劑盒通過負選擇的磁性分離方法去除細胞培養過程中的死細胞和細胞碎片。maglive 可以去除死細胞、細胞碎片、遊離的寡核苷酸。通過這樣的步驟後可以提高細胞培養的純度,改善資料分析的質量,並對後續下游的實驗結果產生積極的影響,對將來的分子生物學的細胞分析更為有效。
maglive 產品不含外源蛋白,如annexin-v(膜聯蛋白v)。
不含annexin-v
不含外源蛋白,不會汙染
無菌溶液
一步去除死細胞、細胞碎片、遊離寡核苷酸
不需要含鈣(annexin-v需要)的緩衝液對於懸浮細胞尤其適用
和臺盼藍或pi死細胞檢測方法相容
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