1樓：匿名使用者
實驗原理：
採用folin-酚法測定，folin-酚試劑由甲試劑和乙試劑組成。甲試劑由碳酸鈉，氫氧化鈉，硫酸銅及酒石酸鉀鈉（knac4h4o6•4h2o）組成。多肽中的肽鍵在鹼性條件下，與酒石酸鉀鈉銅鹽溶液起作用，生成紫紅色絡合物。
乙試劑是由磷鉬酸、磷鎢酸、硫酸和溴等組成。此試劑在鹼性條件下，易被多肽中酪氨酸的酚基還原呈藍色反應，其色澤深淺與多肽含量成正比[28]。
實驗所需試劑的配置：
(1) 試劑甲：(a) ：10g na2co3,2g naoh和0.
25g酒石酸鉀鈉（knac4h4o6•4h2o），溶解於500ml去離子水。(b) ：0.
5g 硫酸銅（cuso4•5h2o）溶解於100ml 去離子水中；將50份（a）與1份（b）混合，即為試劑甲。
(2) 試劑乙：將folin-酚試劑與去離子水按1:1混合。
(3) 標準蛋白質溶液：精確稱取結晶牛血清蛋白，溶於去離子水中，濃度為250μg/ml左右。牛血清蛋白溶於水，若混濁，可改用0.9%（質量分數）nacl溶液。
(4) 樣品溶液：通常根據樣品中蛋白含量的不同，樣品在測定前需要進行適當倍數的稀釋。
實驗步驟：
(1) 標準曲線的測定: 取16支大試管，1支作空白，3只留作未知樣品，其餘試管分成兩組，分別加入0，0.1，0.
2，0.4，0.6，0.
8，1.0 ml標準蛋白質溶液（濃度為250μg/ml）。用水補足到1.
0 ml，然後每支試管加入5ml試劑甲，在漩渦混合器上迅速混合，於室溫（20-25℃）放置10 min。再向各個試管加入0.5ml試劑乙，同樣立即混合。
然後在室溫下放置30 min，以未加蛋白質溶液的第一支試管作為空白對照，於700nm處測定各試管中溶液的吸光度值，以蛋白質的量為橫座標，吸光度值為縱座標，繪製出標準曲線。
(2) 樣品的測定：取1ml 樣品溶液（其中蛋白質含量約20-25μg），按上述方法進行操作，取1ml水代替樣品作為空白對照。
2樓：浙大阿米巴
自己搜尋一下「folin-酚法」，就有具體的步驟了。
folin-酚法是測定蛋白含量的。
你只要把用蛋白酶消化一定量的蛋白，然後用folin-酚法測定剩下的蛋白含量，兩者相減就是蛋白酶消化掉的蛋白，就可以用來表示活力了。
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