1樓:鵝子野心
第一步、明確檢測何種蛋白
第二步、明確編碼該蛋白的基因與其它哪些物種同源性最好第三步、尋找檢測這些物種蛋白的試劑盒
第四步、諮詢商家elisa是試劑盒使用的抗體型別:多抗還是單抗? 單抗是針對什麼抗原決定簇的?
第五步、 做出自己的判斷該買哪個試劑盒,或者實在沒有可以找公司進行訂製實驗
2樓:匿名使用者
1.查詢待測樣本的蛋白濃度:可以通過ncbi的文獻,uniprot,pax-dab上給出的蛋白表達量參考值來比較elisa試劑盒中給出的樣本值與報道值是否一致;
2.試劑盒的應用種屬、檢測樣本的種類:除試劑盒特別說明外,一般不同種屬不能通用。
常見待測樣本種類有:血清和血漿(不同抗凝劑),細胞上清,和細胞裂解液,試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用;
3.試劑盒的檢測範圍:也就是標曲範圍,特別要注意待測樣本濃度是否落在標曲範圍內,對於濃度很高的樣本,可以先進行預實驗摸索到比較好的稀釋倍數後再大量測定樣本。
4.試劑盒中的稀釋線性及**率:
a.稀釋線性一般指樣本稀釋線性,是將樣本梯度稀釋下來,看各稀釋梯度濃度是否成線性;參考樣本稀釋線性可以選擇樣本的最佳稀釋倍數;
b.稀釋線性也有做加標稀釋線性的情況,加標稀釋線性是將標準品加入樣本中測定加入的標準品濃度測定是否準確;同樣也是確定待測樣本稀釋倍數的參考指標。一般線性和**率的範圍在80%-120%比較合適;
5.試劑盒的其它指標:
a.靈敏度:試劑盒能夠檢測到的樣本最低濃度的能力,如果待檢指標含量很低,需要選擇高靈敏度的elisa試劑盒;
b.板間和板內的變異係數(cv%):反映板內和不同板之間是否均勻,cv%一般小於10% 比較好。
6.試劑盒的有效期:試劑盒的有效期一般是半年至一年,樣本準備時間需要考慮到試劑盒的有效期。
7.試劑盒的特異性:elisa 試劑盒的特異性與試劑盒的關鍵組分,抗體對有關。若抗體對中之一為多抗,另一個必須為單抗,建議使用雙單抗。
8.重複性:科學實驗講求重複性,一般 elisa 試劑盒,其板內和板間變異係數應該控制在 11%和15%以內。
9.簡便性:試劑盒在保證高質量資料的情況下,實驗時間越短,操作越便利,越容易受到使用者歡迎。這也不妨作為選擇試劑盒的一個指標。
10.經濟性:進口分裝試劑盒因為省去不少物流和報關費用,與國外原裝進口試劑相比**上有比較大的優惠,而且能提供比較靈活的包裝規格,特別是 48t 等小包裝,目前很多客戶因為對品牌的信任度問題,主要還是選擇國外原裝進口,但是國內進口分裝比較成熟的公司仍然是一個非常好的選擇。
11.美譽度:一個品牌不光要有知名度,更重要的是美譽度。
通過行業調查公司以及網路,相關宣傳資料等可以找到美譽度高的 elisa 試劑盒**商,這個反映的不僅是產品質量的問題,對**商的售前售後服務也是一個非常嚴格的檢驗。目前國際上主要的 elisa **商有 r&d 細胞因子方面的試劑盒,bender 粘附分子方面的試劑盒,cayman 花生四烯酸類產品的試劑盒,merck(linco) 內分泌研究方面的試劑盒,invitrogen(biosource) 磷酸化蛋白的 elisa,動物細胞因子 elisa 試劑盒等,國內主要的 elisa 試劑盒**商有武漢華聯科(bio-swamp),武漢基因美等。
12.文獻引用:產品的文獻引用特別是高質量的 sci 文章的引用是很多使用者都關心的問題,這是業界對產品認可的一個非常重要指標,而且對相關使用者的科研有一定的借鑑作用。
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