1樓:匿名使用者
3種,分別是目的基因自身相連的、運載體自身相連的和目的基因與運載體相連的(即基因表達載體)
2樓:網友
太多了成環的就有四種:基因自連、載體自連、基因+載體、如果基因或載體酶切後沒有方向性,那基因+載體的連線產物還有方向性的問題。
成鏈的就沒法說了,誰知道會是幾倍體的串聯呢。
用同種限制酶切割目的基因和載體,有多少種連線方式
3樓:熱情的聖潔百合
用同種限制酶切割目的基因和載體,有三種連線方式。載體的自身環化,目的基因的自身環化,載體和目的基因的連線。
【求助/交流】目的基因與表達載體連線時有哪些要點?
4樓:破鬼鬼
2.片段和載體酶且copy
要完全,確定大小沒問題。
不過有些載體本身就很很難連線!
建議在連線時,先加入載體和目的基因,85度熱浴15min,除去殘留的酶和未純化乾淨的雜蛋白。然後再加入酶和buffer。
適當延長連線時間24小時以內都沒問題的!
如果還是不行,就試試對載體去磷酸化,每一步處理都要在結束後熱變性,失活殘留的酶,適當加大目的基因的量(10以內),連線溫度也可以在4-16度內用pcr做個梯度!不過如果有平末端的,就不用做這個梯度了。dfdxhghg(站內聯絡ta)我們只做醫學**,所以更專業!
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在什麼情況下,切割目的基因和載體時使用不同種限制酶
5樓:匿名使用者
如果要獲得互補的缺口用於連線,而載體或目標片段上又有多個酶切位點,如果有同尾酶的話就可以使用。一般情況下切割載體和目的基因需要使用相同的酶,偶爾也會使用不同的同尾酶。
為什麼必須使用同一種限制酶對載體和目的基因進行切割?
6樓:夏末裡的初生
其實是語句理解問題,想強調目的基因的兩個末端要不同所以b答案錯,但又要分別要和質粒吻合所以a答案對。「和」「或」兩字意思可以琢磨一下。
為什麼目的基因不能直接插入載體?
7樓:然如是
插?怎麼插?
運載體多為質粒,是很穩定且牢固的環狀dna。
dna分子就像梯子,梯子的扶手由磷酸二酯鍵構成,非常牢固,要限制性內切酶才能切開。
切開後質粒會出現兩個粘性末端,所以必須用相同的內切酶切下目的基因,這樣目的基因和。
粘性末端才能接合。
8樓:一思三千
要先用限制內切酶處理目的基因和載體,使它們露出相同的粘性末端(基本上都是粘性末端,平末端較少),這樣才能使目的基因和載體兩者的末端很好的拼合在一起。否則接不上。
什麼是基因工程的載體,基因工程中載體,運載體,表達載體之間的區別是什麼?
文 基因工程載體是能將分離或合成的基因匯入細胞的dna分子,有質粒dna 病毒dna 科斯質粒三種主要型別的載體。按人們的意願去有目的地改造,建立生物遺傳性,因此其最基本的工程就是要得到目的基因或核酸序列的克隆。分離或改建的基因和核酸序列自身不能繁殖,需要載體攜帶它們到合適的細胞中複製和表現功能。常...
如何構建能高效表達目的基因的表達型載體
養豬等於養於 研究方向 1 果樹生理生態 本研究以發展都市農業和特色園藝植物為目的,著力開展優良果樹種植資源的收集 評價和選育,抗逆性植物資源的研究與利用。通過傳統理論和現代化生物技術等手段和方法,特殊條件下果樹植物的生態適應機制 各種環境因子的相互作用對果樹生長的影響和主栽果樹的物質生產特性,進行...
為什麼用兩種不同的限制酶切目的基因和運載體,就能防止運載體本身 基因本身連起來
兩種不同的限制性內切酶識別並切割的序列是不同的,也就是兩種酶分別切割了基因和載體時,產生了兩個切口,這兩個切口不是粘性末端,不能互補配對,所以不可能連線在一起,如果用一種酶來切那麼這樣基因中或者是載體上就會有相同的粘性末端,這樣基因本身除了切下來的那段之外,剩下的部分在連線酶作用下相同的粘性末端就會...