1樓：匿名使用者
兩種不同的限制性內切酶識別並切割的序列是不同的，也就是兩種酶分別切割了基因和載體時，產生了兩個切口，這兩個切口不是粘性末端，不能互補配對，所以不可能連線在一起，如果用一種酶來切那麼這樣基因中或者是載體上就會有相同的粘性末端，這樣基因本身除了切下來的那段之外，剩下的部分在連線酶作用下相同的粘性末端就會配對連線，同樣載體也會繼續連線成環，基因和載體連在一一起也有，而且首尾的順序也有兩種，連線體系跑電泳結果會有4個條帶，至少是4種，而且就算那個連線後的片段大小符合你要求的那段純化後也有一部分是不能表達的。哪四種就不用寫了，你肯定知道的，不能表達的那部分就是順序不對的，這就是同種酶切連線的缺陷性。
2樓：匿名使用者
兩個不同的限制性核酸內切酶識別並切割的順序是不同的，是，這兩種酶分別切割的基因和載體，以產生的兩個切口，這兩個切口不粘性末端，不能互補配對，所以不可能連線在一起，與切斷，然後該基因或載體的酶將具有相同的粘性末端，從而使該基因本身除了切片，和下連線酶相同的粘性末端，將配對的連線的剩餘部分，在相同的載波如果要求將繼續連線成一個環，一個基因和連線到一個共同的載體，和順序2種執行電泳結果的連線系統，將有四個條帶，至少4種，甚至純化的片段大小與連線部分無法表達的。什麼是四不寫，你肯定知道，不能表達這部分是不正確的順序，這是同一種消化的連線缺陷。
3樓：夢之翼
同種限制酶切割基因上的同一個位點，產生相同的粘性末端或平末端，所以可以連起來，不同限制酶切割位點不一樣，所以連不起來。
4樓：_苦沙彌
還有一個疑問，如果是兩個載體或是兩個目的基因相連，也是兩種酶切位點只是順序相反了，那不是有三種了嗎，怎麼可能不用篩選？
為什麼要兩種酶才能切割基因（兩端要不同的限制酶），不能是同一種嗎？
5樓：雲南萬通汽車學校
切割目的基因時同種序列當然可以用同種限制
酶切割；但有時也用不同種的限制性酶割。
用不同限制酶切割的目的是：保證目的基因和質粒（運載體）的準確連線，避免無效連線（如：目的基因—目的基因連線物、質粒自身環化等）過多。可以用不同限制酶切割相同序列的原理：
雖然一種限制酶只能識別一種特定的氨基酸序列，但兩種限制酶識別的序列可以相包含，例：酶a識別ggatcc序列，酶b識別gatc序列，則ggatcc序列就可以被兩種限制酶切割。**不明白請追問，滿意請採納，希望對你有幫助~
生物基因工程中用限制酶切割目的基因和運載體
6樓：蘇蘇
個人覺得用2種酶切不能完全避免錯誤連線，但可以降低50%的錯誤率，質粒多為環裝而不是線性，一般不會連線
7樓：匿名使用者
你說的這種情況不是不會出現，但與用同一種酶同時目的基因與運載體相比，個自相連的機會大大降低了，應該還是用不同的酶切要好一些。
目的基因和運載體不是應該用同種限制酶切割的嗎？？為什麼這個題用不同種？
8樓：匿名使用者
目的基因和運載體copy不是應該用同種限制酶切割的
a、限制性內切酶能夠識別雙鏈dna分子的某種特定核苷酸序列，並且切割形成特定的粘性末端，a正確；
b、真核生物基因有編碼區和非編碼區之分，並且編碼區包括外顯子和內含子，而以蛋白質的氨基酸序列為依據合成的目的基因只包含外顯子，沒有內含子和非編碼序列，因此與原基因的鹼基序列不同，故b錯誤；
c、目的基因在受體細胞中成功表達才表示基因工程操作成功，僅僅檢測到受體細胞含有目的基因，並不代表該基因可以正常的轉錄和翻譯，故c錯誤；
d、質粒中抗生素抗性基因一般用於檢測目的基因是否成功匯入受體細胞中，故d錯誤．
基因工程中，是否常用一種限制性核酸內切酶切割目的基因和運載體
9樓：uv鏡
是的，這樣可以是得到的目的基因和運載體末端相同
但有時也用兩種不同的限制酶，是為了防止目的基因和運載體自己成環
就高中來說：當目的基因與運載體結合時，必需用同一種限制酶處理目的基因與運載體。這句話對嗎？
10樓：匿名使用者
如果把切割的地方比作一個傷口 那麼就是說一個什麼樣的傷口必須用一個專門切這種傷口的刀子（限制酶）來切 然後切下來的這塊要與運載體連線 運載體上邊也必須有一個這樣完全吻合的傷口來讓這段基因連結 所以只有用同一種限制酶才能切出這樣的傷口！！
11樓：匿名使用者
對！因為要通過同一種限制酶切割出相同的黏性末端，才能鹼基互補啊，還得通過連線酶連線！
12樓：匿名使用者
對的，因為要產生相同的粘性末端...
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