1樓：義翹神州加油
你得問題是，什麼是穩定轉染吧。
推薦瞭解一下：穩定轉染或持久的轉染是用於建立克隆的細胞系，這種細胞系中轉染的目的基因整合到染色體dna中並指導適量目的蛋白的合成。一般來說（由細胞型別決定），形成穩定轉染細胞的效率比瞬時轉染（transient transfection）的效率低1到2個數量級。
利用可選擇的遺傳標記物有利於從非轉染細胞的中分離出稀少的穩定轉染物 。
穩定轉染細胞時，質粒總是丟失，大家有什麼解決方案嗎
2樓：續煊郜冬梅
一般質粒提取最後的時候注意一下，用滅菌水和無菌的ep管，管口過火，質粒提取後如果要檢樣，用無菌槍頭。轉染完成之後，換培養液的時候要加雙抗的培養液。
注意這些一般不會有問題。
如何堅定穩定轉染基因是否整合到宿主細胞的染色體上
3樓：愛我家菜菜
基因轉染的定義是「將具生物功能的核酸轉移或運送到細胞內並使核酸在細胞內維持其生物功能」。其中，核酸包括dna（質粒和線性雙鏈dna），反義寡核苷酸及rnai（rna interference）。基因轉染技術已廣泛應用於基因組功能研究（基因表達調控，基因功能，訊號轉導和藥物篩選研究）和基因**研究。
質粒轉染細胞後是整合到基因組中還是遊離存在
4樓：匿名使用者
這要看你用的是哪一種質粒載體內，有些質粒就在細胞中進行容表達，不整合入基因組中，比如腺病毒類的表達載體；有些質粒上有整合的序列，可以整合到細胞基因組上進行表達。
一般的表達質粒上後面有自帶的polya序列，所以產生的mrna是帶polya尾巴的。
哺乳動物質粒穩轉是隨機插入的嗎
pcdna3質粒轉染細胞後，是整合到基因組中還是遊離存在？
5樓：匡雅霜
pcdna3可以整合到基因組內，但是幾率不高。
質粒入核後能與組蛋白結合嗎
6樓：楊風遊
1.進入細胞核。只有進入細胞核，才能進行dna的複製、轉錄和翻譯過程。
2.如果和組蛋白結合，裝配成核小體的話，就是整合到染色體的過程了。外源質粒dna可通過非同源性分子間重組整合進細胞染色體，然後和宿主基因一同完成複製轉錄過程。
但是由於質粒的超螺旋結構決定了整合的幾率不是沒有，而是很小。這種小概率的事件，可以通過對載體編碼抗生素抗性基因的篩選壓力來獲得整合到染色體的轉染株，即穩定轉染的過程。
如果不施加篩選壓力的話，絕大部分是遊離在染色體之外瞬時完成了翻譯全過程，可以在轉染後1-4d檢測其轉錄和表達水平。即為瞬時轉染。
質粒轉染和病毒轉染有什麼本質上的區別
7樓：匿名使用者
慢病毒包裝轉染，應該是整合到基因組的。穩定表達。
而質粒，培養幾代後，可能就丟失了。並且有時候會發生耐受。
這個就是本質區別。質粒畢竟是外來物。放在細菌裡還好，放在細胞裡，不穩定的。
pr8質粒為什麼可作為病毒骨架
8樓：匿名使用者
常規轉染技術可分為兩大類，一類是瞬時轉染，一類是穩定轉染（永久轉染）。前者外源dna/rna不整合到宿主染色體中，因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數，產生高水平的表達，但通常只持續幾天，多用於啟動子和其它調控元件的分析。一般來說，超螺旋質粒dna轉染效率較高，在轉染後24-72小時內（依賴於各種不同的構建）分析結果，常常用到一些報告系統如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來幫助檢測。
後者也稱穩定轉染，外源dna既可以整合到宿主染色體中，也可能作為一種遊離體（episome）存在。儘管線性dna比超螺旋dna轉入量低但整合率高。外源dna整合到染色體中概率很小，大約1/104轉染細胞能整合，通常需要通過一些選擇性標記，如來氨丙基轉移酶（aph；新黴素抗性基因），潮黴素b磷酸轉移酶（hph），胸苷激酶（tk）等反覆篩選，得到穩定轉染的同源細胞系。
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