1樓:匿名使用者
如果是管路堵了的話,按樓上說的可以排查一下。不過我覺得你應該能看出管路賭不賭,所以很可能是平時用時不大注意,衝的不徹底,柱子堵了,比如用了鹽的流動相,衝的不夠,鹽在柱子裡結晶了。處理一下就好了。
另外不是所有柱子 都能倒衝的,最好問問生產商。不瞭解的話,還是按下面的方法處理一下試試。
常規處理:矽膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱每一次用完後用低流速長時間的二氯甲烷或正己烷等溶劑沖洗;鍵合相矽膠色譜柱、離子交換色譜柱和凝膠色譜柱先用蒸餾水沖洗,再用甲醇沖洗,然後用甲醇與蒸餾水以一定比例混合的溶液沖洗後過夜。
對於已使用一段時間後柱效下降的色譜柱可按以下方法進行再生。再生處理包括活化(右→左)和淨化(左→右)兩種。矽膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱按下列順序沖洗:
三甲基戊烷或己烷←→三氯乙烷←→乙酸乙脂←→丙酮←→乙醇←→水。鍵合相矽膠柱:蒸餾水←→甲醇(沖洗過程中可加入少量二甲基甲醯胺)。
離子交換樹脂柱:高濃度的nacl溶液(1-2moll的nacl溶液)可使大部分樹脂再生,油脂等少數與樹脂緊密結合的物質可用低濃度鹼溶液(如0.1moll的naoh溶液)沖洗,酸性有機物吸附在固定相的用低ph緩衝液沖洗,鹼性有機物用高ph緩衝液沖洗,然後再用蒸餾水←→甲醇←→二氯甲烷←→甲醇←→蒸餾水沖洗。
凝膠色譜柱:由於凝膠色譜柱是根據被分離物質的分子量大小而分離物質,通常用稀的氫氧化鈉或非離子型去垢劑(0.2%-1%np-40或lubrol)沖洗可除去大部分的結合物質,如果一些汙染物仍然不能清除時,用24%或30%乙腈沖洗過夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去親水蛋白,用蛋白水解酶處理可分解凝膠中剩餘的痕量胃蛋白酶,然後再用蒸餾水←→甲醇←→蒸餾水沖洗。
已汙染的色譜柱的處理:因保留強的物質汙染,流動相或樣品中不溶物沉積於柱頭,可用下列方法洗滌:去除脂類可用四氫呋喃、乙腈或甲醇洗滌;去除蛋白質可用乙腈、丙醇和1%三氯乙酸進行梯度洗脫;一些高疏水性化合物可用乙腈或甲醇洗脫,同時反覆注入100-200ml的四氫呋喃。
柱頭處理:對於柱頭堵塞汙染嚴重的情況而且用溶劑沖洗無效的色譜柱,只有開啟柱子去除柱頂的填料重灌:先拆下不鏽鋼燒結過濾器,檢查柱床,常見凹陷或受汙染的帶色填料,剔去不規則床層和帶色填料,使柱床顯白色並完全水平,再用甲醇作糊狀填料勻漿液,將糊狀填料勻漿液滴在柱上靠重力從勻漿液中排出甲醇液,重複直到填料水平。
柱子的貯存:首先柱子必須清洗乾淨後才能貯存,柱子不能貯存在水或水性溶劑中,否則會引起微生物的滋生。極性色譜柱可用適當溶劑如二氯甲烷沖洗;鍵合相色譜柱用甲醇沖洗;陰離子交換色譜柱用0.
002%洗必泰(雙氯苯雙胍己烷)的緩衝液沖洗,陽離子交換色譜柱用0.005%硫柳汞緩衝液沖洗;凝膠色譜柱用緩衝液中加0.02%疊氮化鈉或用20%乙醇沖洗。
再將柱子兩頭密封,以防止溶劑蒸發使柱子乾燥而引起柱子結構的幾何學改變。
2樓:匿名使用者
辦法很簡單,先開啟排空閥看壓力,如果很大(大於10bar)就說明可能是過濾白頭堵了,更換之即可,如壓力仍大,就由上至下拆下一段一段排查,直到發現堵的地方,當然很有可能是色譜柱堵了,可採用反衝解決吧
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