1樓:哎呀沃去
雙縮脲試劑與蛋白質反應的實質其實是與肽鍵反應雙縮脲試劑分為a液與b液.該反應需在鹼性環境下完成.a為氫氧化鈉.
雙縮脲試劑其實是在利用鹼性條件下的二價銅離子.01 g/ml的水溶液,b為硫酸銅,以免藍色的氫氧化銅蓋住了紫色複合物的紫色導致觀察失敗,1. 斐林試劑主要是利用兩者反應後的氫氧化銅溶液.
而肽鍵實際上是斷開後與銅離子形成紫色複合物.故僅僅滴加3~4滴硫酸銅溶液. 其實看反應物你就知道了, 雙縮脲試劑a的成分是氫氧化鈉的質量分數為0.
但硫酸銅遇到大量鹼會生成氫氧化銅沉澱,氫氧化鈉和硫酸銅肯定會反應,因此需要現配現用;雙縮脲試劑b的成分是硫酸銅的質量分數為0,但是不是完全反應還有有銅離子剩餘的;ml的水溶液.1 g/:1反應還有一半的硫酸銅剩餘的
2樓:匿名使用者
斐林試劑的工作原理是醛基與氫氧化銅發生氧化還原反應生成氧化亞銅,所以斐林試劑氫氧化鈉是生成氫氧化銅的反應物之一,也提供了鹼性條件。
雙縮脲試劑的工作原理是銅離子在強鹼性條件下與肽鍵發生反應生成紫色絡合物。
(我們做實驗的時候,斐林試劑是先在一個試管裡制,然後加到還原糖溶液裡,雙縮脲試劑是先往蛋白質里加鹼,再加銅離子。之所以這樣就是這個原因。這也是為什麼雙縮脲試劑的硫酸銅濃度比氫氧化鈉稀了很多而斐林試劑二者濃度相近的原因)
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