1樓:sks精品本本
這個說起來很麻煩了,最好是有師傅帶一下或是自己仔細看使用說明
2樓:
那得學個幾個月吧,功能太多了,沒招
根據流式細胞儀的資料,如何分析?
3樓:匿名使用者
假設你在這個圖前面的步驟都是對的,包括設定gate,單細胞的gate等等。
這兩個圖不具備可比性,第一個的圖記錄了超過1萬個資料,而第二個只有2千多個。相差的很遠。這是最大的錯誤。
從現有的百分率來看,g1, g2的百分率也很接近。所以是看不出差別來的。你如果要做的是看你的實驗手段是否一直細胞週期。
做這個實驗是不行的。必須做brdu或者edu加pi的雙染實驗。在不同時間點取對照組和實驗組做,才能得出結論細胞週期是否有抑制。
這樣的pi單染實驗,只能得出各個週期的百分率有沒有改變,就算有改變,也不能說是有抑制。至於凋亡,就更加不可靠了。這個實驗的特異性非常差。
如何分析流式細胞儀顯示的資料
4樓:諾諾
(一)單引數直方圖
單引數直方圖是一維資料用得最多的圖形顯示形式,既可用於定性分析,又可用於定量分析,形同一般x-y平面描圖儀給出的曲線。根據選擇放大器型別不同,橫座標可以是線性標度或對數標度。用"通道"來表示,實質上是所測的熒光或散射光的強度。
縱座標一般表示的是細胞的相對數。只能顯示一個引數與細胞之間的關係是它的侷限性。
(二)雙引數直方圖
雙引數直方圖是一種細胞數與雙測量引數的圖形。常見有以下三種:
1.二維點圖:能夠顯示兩個獨立引數與細胞相對數之間的關係。
橫座標和縱座標分別為與細胞有關的兩個獨立引數,平面上每一個點表示同時具有相應座標值的細胞存在。可以由二維點圖得到兩個一維直方圖,但是由於兼併現象存在,二維點圖的資訊量要大於兩個一維直方圖的資訊量。所謂兼併就是說多個細胞具有相同的二維座標在圖上只表現為一個點,這樣對細胞點密集的地方就難於顯示它的精細結構。
2.二維等高圖:類似於地圖上的等高線表示法。
它是為了克服二維點圖的不足而設定的顯示方法。等高圖上每一條連續曲線上具有相同的細胞相對或絕對數,即「等高」。曲線層次越高所代表的細胞數越多。
一般層次所表示的細胞數間隔是相等的,因此等高線越密集則表示變化率越大,等高線越疏則表示變化平衡。
3.假三維圖:是利用計算機技術對二維等高圖的一種視覺直觀的表現方法。
它把原二維圖中的隱座標-細胞數同時顯現,但引數維圖可以通過旋轉、傾斜等操作,以便多方位的觀察「山峰」和「谷地」的結構和細節,這無疑是有助於對資料進行分析的。假三維圖列表模式其實只是多引數資料檔案的一種計算機儲存方式,三個以上的引數資料顯示是用多個直方圖、二維圖和假三維圖來完成的。
(三)三引數直方圖
目前,由於計算機軟體的發展,很多商品化的軟體均提供三引數直方圖功能,意指這一類直方圖的三維座標均為引數而非細胞數。這種立體圖以點圖為顯示方式,同樣可以作全方位旋轉以便仔細觀察。
(四)流式細胞儀的多引數分析
當細胞標記了多色熒光在流式細胞儀上被鐳射激發後,所得到的熒光訊號和散射訊號可以根據需要組合分析以獲得所需的資訊,這就是流式細胞儀的多引數分析。
求助,急需流式細胞儀分析軟體
5樓:匿名使用者
給你推薦一款免費的軟體 flowing software,可以讀取任何fcs檔案。
如何把流式細胞儀資料拷貝到自己盤裡 10
6樓:匿名使用者
有幾個辦法。一是用流式本身自帶的分析軟體,輸出為圖表的格式。二是直接把流式實驗的原始資料從硬碟上直接拷貝,將來還是用分析軟體開啟,也可以用excel開啟,自行生成圖表。
誰有貝克曼fc500流式細胞儀資料分析軟體cxp
7樓:匿名使用者
所有流式的儀器都產生fcs格式的檔案,並不需要特定的軟體,只要能識別fcs檔案的,任何第三方軟體都可以分析。
比如flowjo, 還有一些免費的,也可以
流式細胞儀怎麼用? 30
8樓:匿名使用者
一般有本使用指南,請按說明說使用。
9樓:
流式細胞儀的結構 流式細胞儀是進行流式細胞分析的儀器,集電子、計算機、鐳射、流體理論於一體,被譽為試驗室的「ct」。
流式細胞術(flow cytometer, fcm)是一種在功能水平上對單細胞或其他生物粒子進行定量分析和分選的檢測手段,它可高速分析上萬個細胞,並能同時從一個細胞中測得多個引數,與傳統熒光鏡檢查相比,具有速度快、精度高、準確性好等優點,成為當代最先進的細胞定量分析技術。
工作原理
將待測細胞染色後製成單細胞懸液。用一定壓力將待測樣品壓入流動室,不含細胞的磷酸緩衝液在高壓下從鞘液管噴出,鞘液管入口方向與待測樣品流成一定角度,這樣,鞘液就能夠包繞著樣品高速流動,組成一個圓形的流束,待測細胞在鞘液的包被下單行排列,依次通過檢測區域。
流式細胞儀通常以鐳射作為發光源。經過聚焦整形後的光束,垂直照射在樣品流上,被熒光染色的細胞在鐳射束的照射下,產生散射光和激發熒光。這兩種訊號同時被前向光電二極體和90°方向的光電倍增管接收。
光散射訊號在前向小角度進行檢測,這種訊號基本上反映了細胞體積的大小;熒光訊號的接受方向與鐳射束垂直,經過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,形成多個不同波長的熒光訊號。
這些熒光訊號的強度代表了所測細胞膜表面抗原的強度或其核內物質的濃度,經光電倍增管接收後可轉換為電訊號,再通過 a/d轉換器,將連續的電訊號轉換為可被計算機識別的數字訊號。計算機把所測量到的各種訊號進行計算機處理,將分析結果顯示在計算機螢幕上,液可以列印出來,還可以資料檔案的形式儲存在硬碟上以備日後的查詢或進一步分析。
檢測資料的顯示視測量引數的不同由多種形式可供選擇。單引數資料以直方圖的形式表達,其x軸為測量強度,y軸為細胞數 目。一般來說,流式細胞儀座標軸的解析度有512或1024通道數,這視其模數轉換器的解析度而定。
對於雙引數或多引數資料, 既可以單獨顯示每個引數的直方圖,也可以選擇二維的三點圖、等高線圖、灰度圖或三維立體檢視。
細胞的分選是通過分離含有單細胞的液滴而實現的。在流動室的噴口上配有一個超高頻電晶體,充電後振動,使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,待測定細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正負不同的電荷,當液滴流經帶有幾千伏特的偏轉板時,在高壓電場的作用下偏轉,落入各自的收集容器中,不予充電的液滴落入中間的廢液容器,從而實現細胞的分離。
應用範圍
用於白血病的分型、腫瘤細胞染色體的異倍性測定,以及免疫學研究,並已開始用於細菌鑑定,病毒感染細胞的識別和愛滋病感染者t4、t8細胞的記數。
70年代以來,隨著流式細胞技術水平的不斷提高,其應用範圍也日益廣泛。流式細胞術已普遍應用於免疫學、血液學、腫 瘤學、細胞生物學、細胞遺傳學、生物化學等臨床醫學和基礎醫學研究領域。
技術特點
流式細胞儀作為一種先進的細胞定量分析檢測儀器,設計上採用了許多獨特的技術,其中涉及到液流系統、光路系統、訊號測量和細胞分選等4個方面。
展望 流式細胞儀從細胞技術開始發展到今天,60至70年代是其飛速發展時期,鐳射技術、噴射技術以及計算機的應用使流式細胞儀在原理和結構上形成了固定的模式。
80年代則是流式細胞儀的商品化時期,這期間不斷有新型號的儀器推出,在多引數檢測技術上不斷提高。
進入90年代,隨著微電子技術特別是計算機技術的發展,流式細胞儀的功能也越來越強大。在資料管理、資料分析方面有了長足進步。但是,在技術原理和設計方面並沒有突破性的進展。
人們的注意力開始轉向流式細胞儀的應用,新的熒光探針、新的 熒光染料、新的染色方法不斷推出,使流式細胞技術在新的細胞引數分析方面日益發展。
從新推出的儀器看,流式細胞儀會在硬體上不斷更新,採用更新的器件(如半導體鐳射、大規模積體電路),以實現小型化;用數位電路取代類比電路,充分發揮微處理器的功能以實現簡單化;在軟體上提高資料自動分析能力,充分發揮圖形介面的優點, 使操作更加簡便。
流式細胞儀檢測的原理
流式細胞儀的工作原理是什麼
緋攻 流式細胞儀主要由四部分組成 流動室和液流系統,鐳射源和光學系統,光電管和檢測系統,計算機和分析系統。四大系統共同完成訊號的產生 轉換和傳輸任務。檢測時將待測細胞或微粒製成細胞懸液,進行熒光染色後加入樣品管中。以一定壓力將待測樣品壓 動室,在高壓下磷酸緩衝液 鞘 液 從鞘液管噴出,鞘液管人口方向...
如何用流式細胞儀分離肺泡上皮細胞
1 取得完全無血液殘留的肺臟 實驗前將大鼠全身血液放淨,取得完全無血液殘留的肺臟。2 消化肺組織 常用於細胞消化的酶有胰蛋白酶 彈性蛋白酶 膠原酶。胰蛋白酶是最早用於消化 分離上皮細胞的酶,現在一般用損傷性小的彈性蛋白酶來替代胰蛋白酶。但這種酶卻有活性不穩定,有效作用時間短暫,容易自我降解等問題。d...
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