1樓：匿名使用者
1.兩者的結果檢測方法不同。gfp綠色熒光蛋白，很直觀，能夠直接檢到熒光，在普通的細胞培養條件下都能夠觀察到，對細胞的生命活動和其他並行的實驗安排影響很小。
熒光素酶報告基因使用起來比gfp多一個步驟，因為熒光素酶是個酶，不發熒光，發熒光的是它的底物，熒光素。熒光素在細胞裡（要說螢火蟲細胞我就不知道了哦）是沒有的。所以檢測熒光素酶的通常步驟是裂解細胞，釋放熒光素酶，與熒光素及其他所需化學物質混合，才得到熒光。
現在雖然也有活細胞內檢測熒光素酶的手段，但要將熒光素送入活細胞，本身就已要對細胞進行相當的干擾。所以一般來說熒光素酶實驗的同一批細胞不適合再做其他並行實驗。
2.兩者的結果含義不同。gfp如果說是定量檢測表達蛋白的話，這個定量只能夠指，表達的細胞是多少個，不表達的細胞是多少個。
gfp對於單個細胞來說，就有陽性和陰性兩種結果罷了。gfp不能夠定量地告訴你，這個/群細胞裡的表達量是多高還是多低。熒光素酶就能夠定量地得到表達量/表達水平的數值，但這個數值是相對於一群細胞來說，而不是對於單個細胞。
所以熒光素酶常常用來研究啟動子的功能與調控，因為啟動子對基因表達的調控可以是漸變的，而不是簡單的開和關兩種狀態。
如何在 熒光顯微鏡下觀察切片的gfp細胞
2樓：最愛秋天的傳說
首先，你需要確定你想觀察細胞的什麼東西。你只想把細胞染亮的話，用calciem am，染核的話用dapi或者hoescht33342，染死細胞核的話用pi，染線粒體，內質網，endosome，actin等都有自己的染料。
然後，你根據不同的染料的說明配製溶液，養細胞，有些染料很快，比如dapi染細胞核就是分分鐘的事情，有的染料要慢一些，那麼就要多養一會兒。
如果你用熒光顯微鏡看，你首先要確定你的熒光顯微鏡可以用來看細胞，一般看哺乳動物細胞的顯微鏡是倒置的，如果你的顯微鏡是正置的，操作會比較麻煩。然後你要確定你的顯微鏡的激發光可以激發你要用的染料，比如，有的顯微鏡沒有紫外光，那麼就不能用dapi染細胞核。
如果你這些搞清楚了，你能正確操作顯微鏡，那麼你就可以上鏡去看了，注意，在熒光顯微鏡下，染料可能被淬滅掉，所以有些染料，你看得時候要快一點。
3樓：匡扶正義的蝸牛
在透明玻璃上滴上一滴鹼水就可以清晰的觀察了。
gfp綠色熒光蛋白的檢測方法有哪些？
4樓：網友
1.熒光顯微鏡下觀察gfp的綠色熒光；
2.利用gfp的抗體，western blot 可以檢測有無gfp蛋白。
5樓：手機使用者
我知道的，目前有兩種：1.熒光光度計，2.流式細胞儀。詳細步驟可查閱文獻。
用熒光倒置顯微鏡怎樣進行熒光蛋白的定量檢測
6樓：風淡雲靜
1全部1、定位沒問題，用影象處理軟體就可以。一般來說要在同一個視野用明場（he染色，或者蘇木素復染）和熒光場同時拍照，然後用軟體疊加就可以了。這個功能在photoshop上也可以實現，只要photoshop用的熟。
2、定量這個問題就相對差一些了，只能通過色度來分析，最好選擇配套的熒光分析軟體，當然也可以用photoshop來做（稍微麻煩一些）。但是這樣得到的結果只能算是半定量的（資料處理多用秩和檢驗）。最好的辦法還是熒游標記後的細胞過流式細胞儀，這樣結果才最為信服。
熒光素酶報告基因與gfp區別？
7樓：樂研_統統
熒光素酶報告基因和gfp都可以作為報告基因，熒光素酶報告基因表達熒光素酶，需要加入底物才能發光，檢測到目的細胞。
而gfp基因表達gfp蛋白，可以直接用熒光顯微鏡觀察，不需底物。
希望能幫到你！
熒光顯微鏡下紫外光能看到什麼熒光蛋白
8樓：匿名使用者
觀察到的細胞都是bai弱的黃色，du可能是zhi自發熒光。如果。
dao很強，則是表達很強的結果。專弱的熒光。並且每。
屬個細胞都是黃色。一個細胞轉染的是編碼綠色熒光蛋白的空載體，一個是連線有目的基因片段的重組載體。空載體的細胞綠色熒光在胞質內分佈，很正常；而重組載體的細胞則只有胞膜上有黃色弱熒光。
當細胞狀態不好時，就可能有自發熒光出現，這種自發熒光在看綠色熒光蛋白時顯示偏黃色，可能是沒有轉染進去。
如何用綠色熒光蛋白標記細菌
9樓：匿名使用者
好專業問題，我看了些資料。將30只sd大鼠隨機分為三組：空白對照組、對照組和甲氨蝶呤(mtx)組，每組10只。
給對照組和mtx組大鼠灌飼gfp標記的大腸桿菌tg1對移位的細菌進行示蹤，mtx組大鼠皮下注射mtx製作大鼠化療模型。使用熒光顯微鏡及質粒酶切電泳鑑定內臟分離出的細菌是否**於腸道。結果：
在應用mtx大鼠的腸繫膜淋巴結、肝、脾和腎，均可分離出gfp標記。結論：
mtx能引起細菌移位，在細菌移位的動物實驗研究中，gfp示蹤技術是一種簡單、可靠和有效的方法。
10樓：匿名使用者
綠色熒光蛋白(green fluorescent protein)，簡稱gfp，這種蛋白質最早是由下村修等人在2023年在一種學名aequorea victoria的水母中發現。其基因所產生的蛋白質，在藍色波長範圍的光線激發下，會發出綠色螢光。這個發光的過程中還需要冷光蛋白質aequorin的幫助，且這個冷光蛋白質與鈣離子(ca2+)可產生互動作用。
由水母aequorea victoria中發現的野生型綠色螢光蛋白，395nm和475nm分別是最大和次大的激發波長，它的發射波長的峰點是在509nm，在可見光綠光的範圍下是較弱的位置。由海腎(sea pansy)所得的綠色螢光蛋白，僅有在498nm有一個較高的激發峰點。
在細胞生物學與分子生物學領域中，綠色螢光蛋白基因常被用作為一個報導基因(reporter gene)。一些經修飾過的型式可作為生物探針，綠色螢光蛋白基因也可以克隆到脊椎動物(例如：兔子上進行表現，並拿來映證某種假設的實驗方法。
具體操作過程
熒光顯微鏡觀察含gfp的菌發綠色的光，但是不含gfp的對照菌竟然也能觀察到綠光，這是怎麼回事？
11樓：最愛幻影
背景的綠色應該是染料的散射光或者這個波段細胞本身有綠色光。
如果是散射光，可以用降低**強度和稀釋染料來調節；如果細胞有熒光，就要用背景消除劑。
建議你先降低一下**強度，再試一下稀釋染料看看。
還有種方法就是強制調黑平衡（不知道你的軟體有這個功能沒有，就是把你認為是黑的地方用黑色顯示），不過這種方法會改變某些細節，如果要對**進行後續分析的話可能會造成偏差。
倒置熒光顯微鏡正置熒光顯微鏡落射熒光顯微鏡三者的關係比
正置熒光顯微鏡和落射熒光顯微鏡是一回事，倒置熒光跟正置熒光比較 倒置熒光顯微鏡的物鏡在所觀察物體底下，正置熒光顯微鏡的物鏡在所觀察物體的上面。倒置熒光顯微鏡一般是觀察在培養皿中培養的活體細胞，正置熒光顯微鏡一般是觀察可以放到載波片上看的物體。 光學與分析 熒光顯微鏡一般分為兩種 正置與倒置。落射熒光...
顯微鏡怎麼用，怎樣使用顯微鏡
一 取鏡和安放 1 右手握住鏡臂，左手托住鏡座。2 把顯微鏡放在實驗臺上，略偏左 顯微鏡放在距實驗臺邊緣7釐米左右處 安裝好目鏡和物鏡。二 對光 3 轉動轉換器，使低倍物鏡對準通光孔 物鏡的前端與載物臺要保持2釐米的距離 4 把一個較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內 右眼睜開，便於以後同時畫圖 轉...
如何使用顯微鏡
使用顯微鏡的方法 1 取用和放置使用時首先從鏡箱中取出顯微鏡，必須一手握持鏡臂，一手托住鏡座，保持鏡身直立，切不可用一隻手傾斜提攜，防止摔落目鏡。要輕取輕放，放時使鏡臂朝向自己，距桌邊沿5 10釐米處。要求桌子平衡，桌面清潔，避免直射陽光。2 開啟光源開啟電源開關。3 放置玻片標本將待鏡檢的玻片標本...