1樓:匿名使用者
熒光蛋是夜間的植物,它是一種。
綠色熒光蛋白的發現過程
綠色熒光蛋白在細胞生物學中有哪些應用
熒光素酶報告基因與綠色熒光蛋白(gfp)有什麼區別
2樓:告嶽蘇冷松
只能先就標題的問題談談我的認識。後面的追問我瞭解得也不全面。
1。兩者的結果檢測方法不同。gfp綠色熒光蛋白,很直觀,能夠直接檢到熒光,在普通的細胞培養條件下都能夠觀察到,對細胞的生命活動和其他並行的實驗安排影響很小。
熒光素酶報告基因使用起來比gfp多一個步驟,因為熒光素酶是個酶,不發熒光,發熒光的是它的底物,熒光素。熒光素在細胞裡(要說螢火蟲細胞我就不知道了哦)是沒有的。所以檢測熒光素酶的通常步驟是裂解細胞,釋放熒光素酶,與熒光素及其他所需化學物質混合,才得到熒光。
現在雖然也有活細胞內檢測熒光素酶的手段,但要將熒光素送入活細胞,本身就已要對細胞進行相當的干擾。所以一般來說熒光素酶實驗的同一批細胞不適合再做其他並行實驗。
2。兩者的結果含義不同。gfp如果說是定量檢測表達蛋白的話,這個定量只能夠指,表達的細胞是多少個,不表達的細胞是多少個。
gfp對於單個細胞來說,就有陽性和陰性兩種結果罷了。gfp不能夠定量地告訴你,這個/群細胞裡的表達量是多高還是多低。熒光素酶就能夠定量地得到表達量/表達水平的數值,但這個數值是相對於一群細胞來說,而不是對於單個細胞。
所以熒光素酶常常用來研究啟動子的功能與調控,因為啟動子對基因表達的調控可以是漸變的,而不是簡單的開和關兩種狀態。
什麼是綠色熒光蛋白
3樓:匿名使用者
你好, 綠色熒光蛋白分子的形狀呈圓柱形,就像一個桶,負責發光的基團位於桶**,因此,綠色熒光蛋白可形象地比喻成一個裝有色素的「油漆桶」。裝在「桶」中的發光基團對藍色光照特別敏感。當它受到藍光照射時,會吸收藍光的部分能量,然後發射出綠色的熒光。
利用這一性質,生物學家們可以用綠色熒光蛋白來標記幾乎任何生物分子或細胞,然後在藍光照射下進行顯微鏡觀察。原本黑暗或透明的視場馬上變得星光點點——那是被標記了的活動目標。對生物活體樣本的實時觀察,在綠色熒光蛋白被發現和應用以前,是根本不可想象的。
而這種徹底改變了生物學研究的蛋白質,最初是從一種廣泛生活於太平洋海域的發光水母體內分離得到的。
在大自然中,具有發光能力的生物有不少,螢火蟲是陸地上最為我們所熟悉的發光生物,中國古代還有「捕螢數百入囊內照明夜讀」的佳話。在海洋裡,某些水母、珊瑚和深海魚類也有發光的能力。特別是有的肉食性魚類專門靠一條閃著熒光的觸角來把其他小魚吸引到自己的嘴邊,《海底總動員》裡就有這種魚。
事實上,大多數發光動物能發光是靠兩種物質——熒光素和熒光素酶——合作產生的結果。不同發光生物的熒光素和熒光素酶結構是不一樣的。因此,這些生物的發光本領只能是它們自己的「專利」。
20世紀60年代,一位日本科學家從美國西岸打撈了大量發光水母,帶回位於華盛頓州的實驗室進行研究。這些水母在受到外界的驚擾時會發出綠色的熒光,這位科學家希望找到這種水母的熒光素酶。然而,經過長期的重複努力,居然毫無收穫。
他大膽地假設,這種學名叫aequorea victoria的水母能發光也許並不是常規的熒光素/熒光素酶原理。他想,可能存在有另一種能產生熒光的蛋白。此後,他進行了更多的實驗,終於搞清楚了這種水母的特殊發光原理。
原來,在這種水母的體內有一種叫水母素的物質,在與鈣離子結合時會發出藍光,而這道藍光未經人所見就已被一種蛋白質吸收,改發綠色的熒光。這種捕獲藍光併發出綠光的蛋白質,就是綠色熒光蛋白。這位日本科學家也因為這項發現,獲得了剛剛頒發的諾貝爾化學獎,他就是日本科學家下村修。
希望能幫到你。
綠色熒光蛋白的蛋白性質
4樓:匿名使用者
gfp熒光極其穩定,在激發光照射下,gfp抗光漂白(photobleaching)能力比熒光素(fluorescein)強,特別在450~490nm藍光波長下更穩定。
gfp需要在氧化狀態下產生熒光,強還原劑能使gfp轉變為非熒光形式,但一旦重新暴露在空氣或氧氣中,gfp熒光便立即得到恢復。而一些弱還原劑並不影響gfp熒光。中度氧化劑對gfp熒光影響也不大,如生物材料的固定、脫水劑戊二酸或甲醛等。
gfp融合蛋白的熒光靈敏度遠比熒光素標記的熒光抗體高,抗光漂白能力強,因此更適用於定量測定與分析。但因為gfp不是酶,熒光訊號沒有酶學放大效果,因此gfp靈敏度可能低於某些酶類報告蛋白。
由於gfp熒光是生物細胞的自主功能,熒光的產生不需要任何外源反應底物,因此gfp作為一種廣泛應用的活體報告蛋白,其作用是任何其它酶類報告蛋白無法比擬的。
"綠色熒光蛋白"是怎樣的一種物質?
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