為什麼要用western blot

1樓：小禿驢升級版

在sds-page電泳前，一般樣品加入上樣緩衝液中並煮沸5~10分鐘，讓蛋白樣品變性並帶上一定電荷，使蛋白遷移速度只與分子量相關，這樣才能將不同的蛋白通過電泳儘量的區分開來。這個過程中，會打斷一些分子間的相互作用，包括抗體和蛋白樣品間的相互作用，也許是沒人這麼做的原因。

western blot為什麼必須要用內參

2樓：匿名使用者

作為一種有活性的生物大分子，抗體和抗原的反應畢竟不象1+1那麼明確，而用這種不確定的試劑來測定同樣知之甚少的表達產物，確實是有一定的不確定性的。

所以，嚴謹的western blot實驗設計中要求有良好的參照體系，對實驗結果分析是非常有用。特別是當實驗出現問題時，藉助參照體系很容易就可以查出問題所在。

要用western blot比較不同條件下或者不同組織中，目的蛋白表達量的相對多少，前提條件是等量的細胞上樣，才有比較的基礎。特別表達量不高時，上樣量誤差就很可能影響結果的分析。所以western blot必須要用內參。

western blot為什麼必須要用內參

3樓：匿名使用者

western blot 為什麼必須要用內參要檢測一個基因的表達產物是否正確，或者比較表達產物量的相對變化，首選方法是 western blot 。

因為 western blot 操作相對簡單方便，既可以定性分析表達產物，同時還可以指示目的蛋白量的相對變化。