1樓：匿名使用者
同物（植物、物、微物）基組dna提取所同; 同種類或同種類同組織其細胞結構及所含同離差
異提取某種特殊組織dna必須參照文獻經驗建立相應提取, 獲用dna尤其組織糖酶類物質隨酶切、pcr反應等較強抑制作用,用富含類物質材料提取基組dna, 應考慮除糖酚類物質
本實驗水稻幼苗材料,習基組dna提取般
dna、材料
水稻幼苗
二、裝置
移液器冷凍高速離機臺式高速離機水浴鍋陶瓷研缽50ml離 管（蓋）及5ml1.5ml離管彎鉤狀玻棒
三、試劑
1、提取緩衝液?：100mmol/l tris?cl, ph8.0, 20mmol/l edta, 500mmol/l
nacl, 1.5% sds
2、提取緩衝液?：18.6g葡萄糖6.9g二乙基二硫代碳酸鈉6.0gpvp240ul巰基乙醇加水至300ml
3、80:4:16/氯仿:戊醇:乙醇
4、 rnasea母液：配見第章
5、其試劑：液氮、異丙醇、te緩衝液水乙醇、70%乙醇、3mol/l naac
四、操作步驟：
（）水稻幼苗或其禾木科植物基組dna提取
1. 50ml離管加入20ml提取緩衝液?, 60?水浴預熱
2. 水稻幼苗或葉5-10g, 剪碎, 研缽加液氮磨粉狀立即倒入預熱
離管, 劇烈搖混勻, 60?水浴保溫30-60鍾(間,dna產量高), 搖
3. 加入20ml氯仿/戊醇/乙醇溶液, 顛倒混勻(需帶手套, 防止損傷**)室溫靜置5-10鍾, 使水相機相層(必要重新混勻)
4. 室溫5000rpm離5鍾
5. 仔細移取清液至另50ml離管,加入1倍體積異丙醇,混勻,室溫放置片刻即現絮狀dna沉澱
6. 1.5ml eppendorf加入1ml te用鉤狀玻璃棒撈dna絮團,乾淨吸水紙吸乾,轉入含te離管,dna快溶解於te
7. dna形絮狀沉澱,則用5000rpm離5鍾, 再沉澱移入te管收集沉澱,往往難溶解於te,60?水浴放置15鍾幫助溶解
8. dna溶液3000rpm離5鍾, 清液倒入乾淨5ml離管
9. 加入5μl rnasea(10μg/μl), 37? 10鍾, 除rna(rnadna操作、析般影響省略該步驟）
10. 加入1/10體積3mol/l naac及2×體積冰乙醇,混勻,-20?放置20鐘左右,dna形絮狀沉澱
植物dna提取的原理和方法？其中乙醇和氯仿一異成醇各起什麼作用
2樓：
植物dna提取方法是採用ctab法。
ctab，是一種陽離子去汙劑,能與核酸形成複合物,此複合物在高鹽(>0.7mol/l) 濃度下可溶,並穩定存在,但在低鹽濃度(0.1～0.
5mol/l nacl)下ctab-核酸複合物就因溶解度降低而沉澱,而大部分的蛋白質及多糖等仍溶解於溶液中。通過有機溶劑抽提,去除蛋白、多糖、酚類等雜質後加入乙醇沉澱即可使核酸分離出來。經離心棄上清後,ctab-核酸複合物再用70%酒精浸泡可洗脫掉ctab。
無水乙醇：沉澱dna。乙醇的優點是可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應，對dna很安全，因此是理想的沉澱劑。
dna溶液是dna以水合狀態穩定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去dna周圍的水分子，使dna失水而易於聚合。
氯仿：克服酚的缺點；加速有機相與液相分層。
異戊醇：減少蛋白質變性操作過程中產生的氣泡。異戊醇可以降低表面張力，從而減少氣泡產生。
另外，異戊醇有助於分相，使離心後的上層含dna的水相、中間的變性蛋白相及下層有機溶劑相維持穩定。
在dna提取過程中乙醇的作用是什麼
3樓：假面
核酸不溶於乙醇，所以可以使用乙醇對核酸進行漂洗，使殘留的雜質溶解於乙醇，並最終通過離心去除。可總結為去除dna中的殘留雜質（對混雜的rna無效）。
提取時，保證核酸一級結構的完整性；核酸樣品中不應存在對酶有抑制作用的有機溶劑和過高濃度的金屬離子；其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的汙染應降低到最低程度；其他核酸分子，如rna，也應儘量去除。
4樓：藍梓楠函樹
乙醇的優點是可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應，對dna很安全，因此是理想的沉澱劑。
dna溶液是dna以水合狀態穩定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去dna周圍的水分子，使dna失水而易於聚合。
在提取dna時，要用75%預冷乙醇進行dna沉澱,請問其機理是什麼？
5樓：
可我提取的時候好像是用95%的乙醇沉澱的，而後再用70%的乙醇洗滌。
1.為什麼用無水乙醇沉澱dna？
用無水乙醇沉澱dna，這是實驗中最常用的沉澱dna的方法。乙醇的優點是可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應，對dna很安全，因此是理想的沉澱劑。
dna溶液是dna以水合狀態穩定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去dna周圍的水分子，使dna失水而易於聚合。一般實驗中，是加2倍體積的無水乙醇與dna相混合，其乙醇的最終含量佔67％左右。因而也可改用95％乙醇來替代無水乙醇（因為無水乙醇的**遠遠比95％乙醇昂貴）。
但是加95％的乙醇使總體積增大，而dna在溶液中有一定程度的溶解，因而dna損失也增大，尤其用多次乙醇沉澱時，就會影響收得率。折中的做法是初次沉澱dna時可用95％乙醇代替無水乙酵，最後的沉澱步驟要使用無水乙醇。也可以用0.
6倍體積的異丙醇選擇性沉澱dna。一般在室溫下放置15－30分鐘即可。
2.在用乙醇沉澱dna時，為什麼一定要加naac或nacl至最終濃度達0.1～0.25mol/l？
在ph為8左右的溶液中，dna分子是帶負電荷的，加一定濃度的naac或nacl，使na+中和dna分子上的負電荷，減少dna分子之間的同性電荷相斥力，易於互相聚合而形成dna鈉鹽沉澱，當加入的鹽溶液濃度太低時，只有部分dna形成dna鈉鹽而聚合，這樣就造成dna沉澱不完全，當加入的鹽溶液濃度太高時，其效果也不好。在沉澱的dna中，由於過多的鹽雜質存在，影響dna的酶切等反應，必須要進行洗滌或重沉澱。
6樓：匿名使用者
實驗過程沉澱的效果最好.
就像用鎢做燈絲一樣,實驗的結果.
高中生物實驗中分別涉及酒精和鹽酸使用的實驗及其在實驗中的作用，總結全面一點哦！
7樓：海風教育
高中化學實驗的方法有哪些?做實驗的注意事項
我們從到了七年級就開始學習化學,但是學過的孩子們應該都知道,在初中只是先接觸一下,到了高中化學才開始真正的學習,但是學習化學就會做實驗,做實驗的方式都有什麼?
化學實驗
只要是學習這個科目你就避免不了會出現做化學實驗的情況,高中化學實驗有什麼方法.
1、掌控變數的方法
在實驗或實際問題中,往往有許多因素髮生變化,導致規律不易顯現.前提就你要控制好量程的變化,然後依次研究一個因素的影響和利用.
例如,氣體的性質、壓力、整體面積和氣溫常常一同變化.我們可以控制一個狀態引數不變,找到其他兩個引數之間的關係,然後統一它們.還有我們之前人們的一些定理都是能進行鑽研的.
2、等效替代法
還有的一些物理量還不是很好,沒有表現的測試.它們可以被直觀、但是這些還是可以很好的測出我們的成效還有這種量的出現,從而簡化了問題.
還有你要是採用這種標準的直徑,都是可以利用這種多層次的方式;丈量單擺的週期時,還有就是你可以看見這些狀況都是能進行表現還能看見紙帶,可隔幾個點找出計數點剖析等.
3、累積法
還有要經過這種試劑都是能進行變化來精確到你的一些視線,可以將少量的物理量轉化為大量的物理量.它不僅測量方便,而且可以提高測量精度,減少誤差.
例如,在測量均勻細絲直徑時,可以採用多圈閉合法,但是在你進行測量的情況之下,可以測量30-50次全振幅的時間;在分析點定時產生的膠帶時,可以按幾個間隔找到計數點.
4、留跡法
有些物理過程是短暫的,我們需要記錄和研究它們,拍攝它們,像照相機一樣分析它們.
例如,你要是使用這種實驗的方式就可以看見這些波動的趨勢,用點定時器記錄物體的位置,用一些物種來進行拋球的位置,用示波器觀察交流訊號的波形.
5、外推法
但是還有的一些物理都是能進行改變都是可以不斷的觀察.但是在這種狀況在之下,直接觀察是不容易的.如果將區域性觀測規律外推到極端,就可以達到目的.
化學實驗儀器
8樓：無奈啊快點
分析如下：
一.酒精的作用
1、脫色劑
「**葉綠體在光照下合成澱粉實驗」中,將處理過的天竺葵葉片放入盛有酒精的小燒杯裡,隔水加熱,使葉片褪色（破壞和溶解葉片中所含的色素）.這樣就可在滴加碘液後,避免對觀察葉片顏色變化的干擾.
2、漂洗劑
酒精是良好的有機漂洗劑.「脂肪的鑑定實驗」中,用蘇丹ⅲ染液對脂肪組織進行染色後,可用體積分數為50%的酒精來沖洗浮色,以免干擾對細胞內脂肪顆粒的觀察.
3、 提取劑和層析劑
綠葉中色素的提取和分離實驗」中,可以用純酒精作為提取色素的試劑和層析劑.在「dna的粗提取與鑑定實驗」中,採用酒精沉澱法,利用dna不溶於酒精,而蛋白質、脂肪及磷脂等能溶解其中,可以進一步提出含雜質較少的dna絲狀物.
4、固定劑
在「觀察植物細胞有絲**實驗」中,一般採用質量分數為15%的鹽酸和體積分數為95%的酒精按體積比1：1混合而成的藥液作為解離試劑.鹽酸能夠使洋蔥細胞的細胞壁軟化,並使細胞間的中膠層物質溶解,
從而達到分離細胞的目的.酒精的作用是固定蛋白質,使細胞的原生質凝固,不發生變化,固定細胞的**相,以儘可能保持原來的結構供觀察.酒精也可與其它試劑混合成複合固定劑,如「低溫誘導染色體加倍」中的卡諾固定液就是由無水酒精3份：
冰醋酸1份配製而成,適用於一般植物組織和細胞的固定,常用於根尖、花葯壓片及子房石蠟切片等."土壤中動物類群豐富度的調查 " 3.消毒劑5消毒劑 選一中所有的70％的酒精都是消毒劑.
70％～75％濃度殺菌作用最強,此濃度的酒精與細菌的滲透壓近似,
在細菌表面蛋白未變性前能不斷地向菌體內部滲入,使細菌所有蛋白脫水、變性凝固,最終殺死細菌,以達到消毒殺菌的目的.濃度低於70％,則滲透性降低,達不到滅菌消毒目的.4.
燃燒劑 酒精燈中的燃料
二.鹽酸的作用
1、「dna和rna在細胞在的分佈」中 8％鹽酸的作用
（1） 鹽酸能改變細胞膜的通透性,加速染色劑的跨膜運輸；
（2） 鹽酸使染色體中的dna與蛋白質分離,便於dna與染色劑的結合
2、「有絲**觀察」和「低溫誘導染色體加倍」中15％鹽酸能夠使洋蔥細胞的細胞壁軟化,並使細胞間的中膠層物質溶解,從而達到分離細胞的目的.
3、「酶活性受ph影響實驗」和「生物組織中ph維持穩定的機制」鹽酸用來變ph值。
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配製75 乙醇溶液100ml，需95 乙醇79ml75 100 95 x x 79 需95 乙醇約79毫升 公式就是 需配製的濃度 需配製的毫升數 母液的濃度 母液的毫升數乘法的計演算法則 1 數位對齊，從右邊起，依次用第二個因數每位上的數去乘第一個因數，乘到哪一位，得數的末尾就和第二個因數的哪一位...
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