1樓：
1. 將質粒轉入dh5α的感受態態細菌中，塗布於含有氨苄抗性的固體培養板上，過夜培養。2.
挑選單克隆，轉接3-5ml含氨苄抗性的液體培養基，37度振盪培養10-12h。3. 提取質粒（步驟省略），並將質粒進行進行瓊脂糖凝膠電泳，一般可以觀察到2-3條帶，選擇其中最下面一條帶（超螺旋形式）大小約為2000左右的克隆。
4. 以上述挑選的克隆質粒為模版，以m13為引物，進行pcr檢測（步驟省略，退火溫度為55度），注意設定陰性和陽性對照。5.
pcr產物，進行瓊脂糖凝膠電泳，注意選擇合適的dna分子量marker，比如dl2000。6. 擴充套件產物為750bp左右條帶的即為正確的克隆。
在構建基因表達載體時候，怎麼利用選擇培養基鑑別是質
質粒加入宿主細胞進行轉化，為什麼在塗布含有a
2樓：匿名使用者
一般認為,感受態細胞製備過程和質粒轉化過程會使宿主細胞活力受損,所以在轉化完後,會在lb培養基中活化一小時,使細胞恢復活力.
連線克隆載體,提取質粒後目的基因仍然在,怎麼回事
3樓：
提取質粒後目的基因仍然在是什麼意思？
是說應該被替換了嗎？
如果是沒有連線成功考慮
載體酶切是否完全；
載體與目的片段的比例是否合適，推薦載體：目的片段=1：3感受態細菌的效率如何，保證感受態效率達到10^8以上對於連線轉化非常重要。
4樓：匿名使用者
目的基因仍然在，是什麼意思？仍然在克隆載體上？不在就不正常了好不好
培養真菌的液體培養基，真菌用什麼培養基培養
愛伺機摸人 1 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 pda 培養基 是培養真菌的最主要培養基，其做法是稱取200g馬鈴薯，洗淨去皮切成小塊，加水1000ml煮沸半個小時，紗布過濾，再加10 20g葡萄糖，充分溶解後定容到1000ml，121度滅菌30min。2 馬丁氏培養基 葡萄糖10g 蛋白腖5g 磷酸二氫鉀1g ...
LB培養基和MS培養基的區別
文庫精選 內容來自使用者 泥越 疑難問題 在選修1教材中出現兩種培養基，有必要整理它們之間的不同之處，以免在回答問題時混淆。一 lb培養基 lb一般被解釋為luria bertani培養基，根據其發明人貝爾塔尼 giuseppebertani 的說法，這個名字 於英語的lysogenybroth，即...
ss培養基是什麼培養基，什麼是ss瓊脂培養基
ss培養基是篩選沙門和志賀菌的強選擇培養基， 菜青頭 肺炎雙球菌轉化實驗裡，證明dna是遺傳物質，而非蛋白質的那個實驗裡 用s型細菌的培養基，還有r型細菌的培養基。什麼是ss瓊脂培養基 飛雪之靈 ss瓊脂培養基 salmonella shigella agar 是細菌篩選試驗用的培養基。ss是沙門氏...