水中微生物的玻片標本製作和觀察,製作微生物的玻片標本與製作植物的玻片標本有什麼不同

時間 2021-05-07 20:00:15

1樓:匿名使用者

1 、非切片法

即不用切片機,不經切片手續而製成切片的方法,根據材料性質的不同,有不同的處理方法,該類方法操作簡單快捷,其中鋪片法、封藏法可使原有組織結構不被破壞,塗片法、壓片法彌補了用包埋、切片法所不可能觀察清楚的不足,因此是顯微標本製作的中常用的手段。

1.1 塗片法

主要用於血液、**、尿液、痰液、微生物等不能切片成薄片的液態顆粒性材料,可在載玻片上塗成單層細胞,再經固定,脫水,染色等手段製成永久標本。

1.2 鋪片法

主要用於動、植物組織的表皮層觀察,可活體取待觀察動、植物組織,用尖鑷子撕去一層表皮,迅速平鋪在載玻片上。 如洋蔥表皮細胞的鋪片製備。

1.3 壓片法

一些較幼嫩,柔軟的材料可將其置載玻片上,用小解剖刀將其分散,加染料一滴,再蓋上蓋玻片,用拇指垂直用力擠壓,使組織散成一薄片,再進行觀察,如植物根尖觀察染色體,花粉粒觀察發育階段等。

1.4 離析法

該方法是利用化學試劑使組織的細胞間質溶解,使細胞能分散成單個個體。經染色、脫水、透明即可觀察其個體形態,適用於肌肉、葉片、莖等部位。

1.5 磨片

用於很堅硬的組織,如骨和牙。

2 、切片法

切片法是必須依靠手或切片機將組織切成薄片來進行觀察的方法。為了能清晰地觀察到動、植物的組織結構及細胞形態,必須先經過一系列步驟將組織內滲入某些支援物質,使組織變硬以利於切成薄片,根據所用支援劑的種類不同,可分為徒手切片法、石蠟切片法、火棉膠切法、冰凍切片法等型別,切成薄片後還需要去蠟,染色、脫水、透明等步驟,將其製成永久標本。

下邊以石蠟切片為例,介紹顯微標本製作方法。

2.1 取材

根據不同的實驗目的,選擇相應的材料,材料要求新鮮、準確、完整,材料要避免擠壓、挫傷、乾枯。所採集材料應立即放入固定劑,並編號,註明採集時間、地點、名稱、組織部位,所取組織塊要大小適當,即要能說明問題,又要考慮固定劑的穿透能力。一般組織學取材稍大,細胞學取材稍小,植物組織取材稍小,動物組織取材要稍大。

動、植物的任何組織部位,要製成切片,首先用化學試劑將其固定,固定的作用在於通過固定劑,在儘量短的時間內使原生質體停止生命活動,並如同生前一樣精細的儲存其細胞結構,同時易於後步驟的染色所以良好的固定劑應該具備以下條件:迅速滲入組織殺死原生質體,在短時間內,組織內外完全固定;儘可能避免使組織膨脹或收縮,並且軟硬合適於切片;增加細胞內含物的折光程度,易於鑑別,同時增加媒染作用和染色能力。固定液同時是防腐液,使材料不致變質。

2.3 脫水

脫水是用一種即能與水又能與透明液混合的液體來逐漸置換樣品中游離的水。現採用的脫水劑一般是丙酮或乙醇來進行梯度脫水,脫水的時間,可根據組織的型別,大小而定。

脫水的過程:

一般是30%乙醇→50%乙醇→70%乙醇→80%→90%→100% →100%

脫水應逐步而不應跨越太大的進行,否則將引起組織強烈的收縮或變形,在經無水乙醇處理時,應保證試劑的純度。

2.4 透明

透明是用一種即能與酒精又能與包埋介質混合的液體來置換樣品中的酒精,從而為最終的包埋創造一個有利的條件。 現採用的透明劑一般是二甲苯、甲苯、氯仿等。

其過程為:1/3二甲苯+2/3乙醇混合液→1/2二甲苯+1/2乙醇混合液→2/3二甲苯+1/3乙醇混合液→二甲苯→二甲苯

二甲苯是使用最廣泛的一種透明劑,它具有滲透力強,溶解石蠟量大,又易揮發的優點,其缺點是易使組織收縮,變硬,變脆,因此透明時間應根據組織塊大小及質地酌情而定。

2.5 滲蠟

將完成透明步驟的組織塊浸入透明劑與石蠟混合液中,不斷提高石蠟的比例,直至用石蠟完全置換了組織塊中的透明劑,便於今後的包理與切片。 石蠟有液態與固態二種,滲蠟要在恆定溫箱(60°c)中進行,以保證石蠟處於液態中。

2.6 包理

組織塊經石蠟滲透後,其內部間隙已完全被石蠟佔據,此時還需要用同種硬度的石蠟包理成蠟塊以利於後邊的切片,包理可用相同的器具,也可摺疊一牛皮紙盒。

將液態石蠟緩緩倒入紙盒中,再用鑷子輕輕將浸好蠟的組織塊夾入紙盒,淺埋在石蠟內,待石蠟冷卻成固態即包埋完畢。

至此,一塊組織已完成前處理過程,可以切片,前邊的步驟表明看來既無高深的理論,又無複雜的技術,一切看似簡單,但一步做不到都會造成整個製片的前功盡棄。

2.7 切片

修塊:切片前需修整蠟塊,即將包埋好的一大塊蠟塊切開,使每一小塊都含有一塊組織,並將這組織周圍的石蠟切除,將組織修成一小塊蠟塊並粘在大小適宜的硬木塊上,以便於固定在切片機上。

貼片:一手持毛筆,一手轉動切片機,切片的蠟片連成一長條蠟帶

切下的蠟帶放在一干淨黑紙上,用小刀根據需要切成數段,分別貼在乾淨載玻片上。在恆溫展片臺上展平、烘乾。

2.8 染色

切片可用不同方法,使其乾燥,然後進行染色。因為每一張載片上貼上的是蠟帶,因此必須先用二甲苯去除石蠟再用酒精去除二甲苯,再進入水中,才能染色,染色的方法很多,要根據每張標本要求顯示的目的選擇不同的染劑,最常用的是蘇木精,伊紅染色蘇木精使細胞核是深紫色,伊紅使細胞質顯粉紅色,以此顯示清晰的細胞形態和核的大小,位置,染色後再根據製片的基本原理,使帶水的載片經歷脫水→透明步驟最後喲感樹膠封片

基本步驟如下:二甲苯×2(脫蠟)→酒精+二甲苯(1:1)→100%酒精×2→90% 酒精→80%→70%→50%→30%→水→蘇木精染色(鏡檢)→水→50%→70%→90%→0.

5%伊紅(95%酒精配製)→95%→100%×2→二甲苯:酒精(1:1)→二甲苯×2→樹膠封片

簡便方法:

先將各種材料切成片,要薄,不要用力的用鑷子夾,放在載玻片上,在載玻片上滴一滴水,將薄片放入,如顏色十分淡,加碘酒染色,蓋上蓋玻片,用紙巾將水吸乾,即可。

2樓:匿名使用者

先將各種材料切成片,要薄,不要用力的用鑷子夾,放在載玻片上,在載玻片上滴一滴水,將薄片放入,如顏色十分淡,加碘酒染色,蓋上蓋玻片,用紙巾將水吸乾,即可。

製作微生物的玻片標本與製作植物的玻片標本有什麼不同

3樓:匿名使用者

製作bai微生物玻片標本通du常採用塗片法,微生物包括zhi細菌和真菌(或包dao

括病毒),細菌個體內小,通常用塗片容法制作玻片標本。塗片法是裝片法制作玻片標本的一種方法。製作方法是,細菌可以用細菌液直接塗布在載玻片上,蓋上蓋片直接觀察或乾燥後染色觀察,染色觀察通常需要洗去染色液後觀察。

製作真菌標本可以採用塗片法、撕片法、貼片法和切片法,單細胞或孢子或菌絲採用塗片法,大型真菌有較大的組織塊,可以採用撕片法(如撕取一部分蘑菇絲)、貼片法(將蘑菇的菌褶貼到載片上)和切片法(切片的方式觀察蘑菇的結構)。

製作植物玻片標本方法很多,根據材料不同和觀察目的不同採用不同方法。塗片法(觀察果實營養組織,如西瓜瓤)、撕片法(觀察洋蔥表皮、觀察導管)、切片法(觀察組織、器官結構)、磨片法(堅硬的果核磨成薄片觀察)。

切片法分為徒手切片、冰凍切片和石蠟切片等方法。

4樓:匿名使用者

植物薄片上一般會新增生理鹽水,而微生物的不用

微生物怎麼定義的,微生物是什麼

微生物是一切肉眼看不見或看不清楚的微小生物的總稱 人們通常要藉助光學顯微鏡或者電子顯微鏡才能看清它們的形態和結構.對於蘑菇,只是人們的習慣分類罷了 微生物 原核生物,真核生物 原生生物,真菌 非細胞生物等原核生物 細菌,藍藻,防線菌,支原體,衣原體,立克次氏體等 原生生物 原生動物 變形蟲,喇叭蟲等...

微生物的生長,什麼是微生物的生長?

阮彩阮彩 是指整個菌落,即你發酵液中的生物量的含量。那麼我們如何確定哪個時期是對數期,哪個時期是穩定期等呢?我們需要在不同的時間測定發酵液中細菌的含量,即在不同的時間裡面取相等含量的發酵液體積,測定細菌的含量。然後以時間為橫座標,細菌的含量為縱座標,你會得到一條此細菌生長週期的曲線,從曲線上我們可以...

微生物的速度,微生物生長的四個週期?

微生物可以隨氣流和水流移動。 微生物的繁殖速度快得驚人。細菌每隔20分鐘即可 一次,一天時間內即可繁殖72代,如果一個不死,總數將達到4722噸。假如再這樣繁殖4 5天,它們就會形成跟地球同樣重量的物體。當然不會出現這種情況,因為影響細菌繁殖的各種因素隨時都在起作用。微生物這種驚人的繁殖速度,使我們...