0 5牛血清白蛋白儲備液的製備步驟

時間 2021-08-16 05:06:42

1樓:匿名使用者

四、操作步驟

1 .標準曲線的繪製

(1) 配置標準牛血清白蛋白溶液:在分析天平上精確稱取 0.025g 結晶牛血清白蛋白,倒至小燒杯內,加入小量蒸餾水溶解後轉入 100m1

容量瓶中,燒杯內的殘液用少量蒸餾水沖洗數次,沖洗液一併倒入容量瓶內,最後用蒸餾水定容至刻度,配製成標準蛋自質溶液,其中牛血清白蛋白的濃度為 250 ug/ ml

。 (2) 系列標準牛血清白蛋白溶液的配製:取具塞試管 6 支,按下表加入牛血清白蛋白標準溶液及蒸餾水。然後各管加入試劑甲 5ml ,混合後在室溫下放置

10min ,再加 0.5ml 試劑乙,立即混合均勻(這一步速度要快,否則會使顯色程度減弱)。 30min 後,以不含蛋白質的 1 號試管為對照,與其他 5

支試管內的溶液依次用分光光度計於 5oonm 波長下比色。記錄各試管內溶液的吸光度。

試劑 1 2 3 4 5 6

250ug/mg 牛血清蛋白( ml ) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0

h 2 o (ml) 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0

蛋白質含量( ug ) 0 50 100 150 200 250

(3) 標準曲線的繪製:以吸光度為縱標,以牛血清自蛋白含量( ug )為橫座標,繪製標準曲線。

2 .樣品測定

( 1) 稱取綠豆芽下胚軸 1g 於研缽中,加蒸餾水 2m1, 勻漿。轉入離心管,並用 6m1 蒸餾水分次洗滌研缽,併入離心管。 4000r/min 離心 20min.

棄去沉澱,上清液轉入容量瓶,定容至 10m1.

(2) 取具塞試管 2 支,各加入上清液 l ml, 分別加入試劑甲 5m1, 混勻後放置 lomin ,然後加試劑乙 0.5 ml ,迅速混勻,室溫下放置 30min ,於 500nm 波長下比色,記錄吸光值。

2樓:知識之窗之藍訊

那不就是稱取0.5g的牛血清白蛋白溶於100ml水中就ok啦!

3樓:匿名使用者

儲備液不就是濃一點嗎,沒有什麼特殊的,我認為是這樣。

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