1樓：陸熙俊
不能，因為已經有兩個變數了，不同ph和不同濃度下，要在單一變數的情況下才能比較同種酶的活性大小
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實驗一植物抗氧化酶活性的測定
植物抗氧化酶包括超氧化物歧化酶（sod）、過氧化氫酶（cat）、過氧化物酶（pod）等。它們普遍存在於植物的各種組織中，可以通過催化植物體內的活性氧，防止發生氧化反應。所以抗氧化酶活性與植物的代謝強度及逆境適應能力有密切關係，經常被用來衡量植物的抗性強弱和衰老程度。
一、超氧化物岐化酶活性測定
超氧物歧化酶（sod）普遍存在於動、植物體內，是一種清除超氧陰離子自由基（）的酶，它催化下列反應：
2反應產物h2o2可被過氧化氫酶進一步分解或被過氧化物酶利用。因此sod有保護生物體免受活性氧傷害的能力。已知此酶活力與植物抗逆性及衰老有密切關係，故成為植物逆境生理學的重要研究物件。
【原理】
本實驗依據超氧物歧化酶抑制氮藍四唑（nbt）在光下的還原作用來確定酶活性大小。
在有可氧化物質存在下，核黃素可被光還原，被還原的核黃素在有氧條件下極易再氧化而產生，可將氮藍四唑還原為藍色的甲。後者在560nm處有最大吸收，而sod可清除從而抑制了甲的形成。於是光還原反應後，反應液藍色愈深，說明酶活性愈低，反之酶活性愈高。
一個酶活性單位定義為將nbt的還原抑制到對照一半（50％）時所需的酶量，據此可以計算出酶活性大小。63.【結果處理】2.dc
酶活性測定的原理是什麼
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超氧物歧化酶（superoxide dismutase，sod）
活性的測定 sod採用氮藍四唑（nitro-blue tetrazolium，nbt）法（beauchamp和fridovich，1971）。反應步驟為：取200μl粗提液，加入3.
7 ml nbt反應液50mmol/lph7.8的磷酸緩衝液（pbs）配製的含77.12μmol/l氮藍四唑, 100μmol/ledta－na2和13.
37mmol/l甲硫氨酸溶液〕，在30℃下保溫2分鐘後加入100μl核黃素溶液（ph7.8的50mmol/l磷酸緩衝液中含80.2μmol/l 核黃素和100μmol/ledta－na2），在4000lx日光下反應20min。
然後迅速測定a560。以不照光的管做空白。用酶標儀進行測定時按比例調整為總反應體積為400μl。
酶活性按以下公式計算：以抑制nbt光化還原的50％為一個sod活性單位，結果以u/mg蛋白表示。以加緩衝液代替酶液的作為對照。
sod總活性＝(ack－ae)×v/(ack×0.5×w×vt) 式中， ack為照光對照管的吸光度；ae為樣品管的吸光度；v為樣品液總體積（ml）；vt為測定時樣品用量（ml）；w為樣品鮮重（g）或蛋白質含量（mg）。
過氧化氫酶（catalase，cat）
活性測定 cat 活性參照aebi (1984)[7]的方法進行測定。用酶標儀進行測定時按比例調整為總反應體積為400μl 。400 μl反應液含50 mmol/l的pbs (ph 7.
0)，30 mmol/l的h2o2和50 µl粗酶液。反應從加入過氧化氫開始計時，連續測定在240 nm吸光度的降低值。酶活性定義為：
一個過氧化氫酶單位相當於在規定條件下於溫度25℃，ph7.0條件下1分鐘分解1μmol過氧化氫所需酶量，結果以u/mg蛋白或u/g鮮重表示。
多酚氧化酶（polyphenoloxidase，ppo）
活性的測定 ppo活性測定採用鄰苯二酚法（aquino-bolaños和mercado-silva，2004）。用酶標儀進行測定時按比例調整為總反應體積為400μl。350µl反應液（用50mmol/l，ph6.
4的pbs配製，內含100µmol/l鄰苯二酚）中加入50 µl的粗酶液，平衡1分鐘後連續測定398nm吸光度的變化。以1分鐘內398nm吸光度上升0.01為一個酶活性單位，結果以u/mg蛋白或u/g鮮重表示。
過氧化物酶（peroxidase，pod）
活性測定pod活性測定採用愈創木酚法（lurie等，1997)。用酶標儀進行測定時按比例調整為總反應體積為400μl。反應體系為30μl粗酶液，290 µl 0.
3%愈創木酚（用50 mmol/l的pbs配製，ph 6.4）和 80µl0.3%h2o2（用50 mmol/l的pbs配製，ph 6.
4）。反應在加入h2o2 後開始準確記時。連續吸光度在470 nm的上升值。
酶活性以每分鐘上升0.01為一個單位，結果以u/mg蛋白或u/g鮮重表示。
酶活力的常用測定方法？
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常用的測定方法有取樣法和連續法。
1、取樣法
在酶反應開始後不同的時間，從反應系統中取出一定量的反應液，並用適當方法停止其反應，再根據產物和底物在化學性質上的差別進行分析，求得單位時間內酶促反應的變化量。
2、連續法
基於底物和產物在物理化學性質上的不同，在反應過程中對反應系統新增酶的變性劑以終止反應，常用的連續測定法是光吸收測定法，即根據產物和底物在某一波長或波段上有明顯的特徵吸收差別而建立起來的連續觀測方法，幾乎所有的氧化還原酶都可用此法測定。
此外如熒光法、旋光法、電化學法也是常用的連續測定方法。對不易直接測定的反應，可使用酶偶聯分析法，即用過量、專一的「偶聯工具酶」，使被測反應繼續進行到某一可直接測定的階段。近年來，酶活性的測定工作正向兩個方向發展，超微量酶活的靈敏測定，實現測定過程的自動化控制。
擴充套件資料
酶活力的大小可以用在一定條件下，它所催化的某一化學反應的轉化速率來表示，即酶催化的轉化速率越快，酶的活力就越高；反之，速率越慢，酶的活力就越低。所以，測定酶的活力就是測定酶促轉化速率。酶轉化速率可以用單位時間內單位體積中底物的減少量或產物的增加量來表示。
酶活力的測定既可以通過定量測定酶反應的產物或底物數量隨反應時間的變化，也可以通過定量測定酶反應底物中某一性質的變化，如黏度變化來測定。通常是在酶的最適ph 值和離子強度以及指定的溫度下測定酶活力。
5樓：學子莘
酶活力的測定方法：有兩種主要方法
即終止反應法和連續反應法。
終止反應法：是在恆溫反應系統中，每隔一定時間，取出一定體積的反應液，用強酸強鹼或sds以及加熱等使反應立即停止，然後用化學法放射性化學法或酶偶聯法分析產物的形成量或底物的消耗量。這是最經典的酶活力測定方法，幾乎所有的酶都可以根據這一原理設計出具體的測定方法。
連續反應法：無須終止反應，而是在酶反應過程中用光化學儀器或電化學儀器等來監測反應的進**況，對記錄結果進行分析，然後計算出酶活力。
酶活力測定的注意事項有哪些
6樓：筆中從沫
測定酶活力時，必須注意以下幾點：
1、酶促反應過程中，只有最初一段時間內反應速度與酶濃度成正比，隨著反應時間的延長，反應速度即逐漸降低。
2、要規定一定的反應條件，如時間、溫度、ph等，並在酶測定過程中保持這些反應條件的恆定，如溫度不得超過規定溫度的士1℃，ph應恆定。
3、配製的底物濃度應準確且足夠大，底物液中應加入不抑制該酶活力的防腐劑並儲存於冰箱中，以防止底物被分解。
4、標本要新鮮，由於絕大多數酶可因久置而活力降低，標本如無法及時測定，應儲存於冰箱中。用血漿時，應考慮到抗凝劑對酶反應的影響。有些酶在血細胞、血小板中的濃度比血清高，為此在採血、分離血清時，應注意防止溶血和白細胞的破裂。
5、在測定過程中，所用儀器應絕對清潔，不應含有酶的抑制物，如酸、鹼、蛋白沉澱劑等。
7樓：匿名使用者
1．底物濃度 除選擇適合的底物外，在實際應用中更多考慮的是底物濃度。由於[s]與反應速度v成雙曲線關係，在酶活性測定時，要求[s]達到一定水平以保證酶活性與酶量成正比。[s]範圍一般選擇在10～20km為宜，此時反應速度基本達到最大反應速度，測定的誤差在可接受範圍。
2．酶濃度 在反應條件一定時，酶濃度與反應速度成正比。按照中間產物學說，只有[s]>>[e]時，酶才能被底物分子飽和，反應速度才能達到最大值。因此當標本酶活力過高時，應將標本適當稀釋後再加以測定。
3．溫度 不同的酶最適溫度可以不同，多數酶的最適溫度在37～40℃，高於或低於最適溫度，酶活性都降低。目前，酶活性的測定溫度尚未統一，但常規實驗室多使用37℃。溫度對酶促反應的影響程度通常用溫度係數(q10)表示。
溫度係數指溫度每升高10℃，化學反應速度增加的倍數。q10通常為l～2。由溫度係數得知，溫度的變化對酶活性有著重要影響，因此要求酶活性測定要在恆溫條件下進行，溫度波動要控制在±1℃。
4．離子強度和ph值 在最適ph時，酶的活性最強，高於或低於最適ph，酶的活性都降低，多數酶的最適ph在5～8之間。在測定酶活性時，要求緩衝液具有足夠的緩衝容量，以便使ph值保持穩定。血漿或血清標本含有多種緩衝溶質，具有較強的緩衝能力。
為了防止血漿或血清標本緩衝溶質對反應液酸鹼度的影響，使ph不致偏離設定值，標本用量不宜過大，血漿或血清標本體積／反應液體積≤1／10為宜。
5 輔助因子 某些金屬離子和維生素類輔酶是結合酶的輔助因子，例如zn2+是羧基肽酶的輔基，mo6+是黃嘌呤氧化酶的輔基，nadh是不需氧脫氫酶的輔酶。這些酶離開它們的輔基或輔酶就不能表現活性，因此在酶活性測定時，就要保證輔基或輔酶的供給。
6．啟用劑 有些酶在有啟用劑存在時才有活性或活性較高，例如mg2+是肌酸激酶的啟用劑，cl-是澱粉酶的啟用劑。因此在酶活性測定時，也要滿足酶對啟用劑的需要。
7．抑制劑 酶的抑制可分為不可逆抑制和可逆抑制，後者又可分為競爭性抑制和非競爭性抑制。重金屬離子和砷化物對巰基酶的抑制、有機磷對羥基酶的抑制屬於不可逆抑制；丙二酸對琥珀酸脫氫酶的抑制、磺胺類藥物對二氫葉酸合成酶的抑制屬於競爭性抑制；哇巴因對na+，k+-atp酶的抑制屬於非競爭性抑制。抑制劑使酶活性降低，在測定酶活性時，應避免抑制劑的影響。
綜上所述，測定酶活性時，最適條件的選擇應該遵循最適底物濃度、最適溫度、最適ph值、滿足輔助因子和啟用劑、避免抑制劑的原則。
酶活性指什麼，影響酶活性的條件是什麼？
來自大竹海標新立異的蘭果樹 酶活性指的是有機體的生命活動表現了它內部化學反應歷程的有序性，這種有序性是受多方面因素調節的，一旦破壞了這種有序性，就會導致代謝紊亂，產生疾病，甚至死亡。酶活力受到調節和控制是區別於一般催化劑的重要特徵。酶的活性受抑制劑可調節 酶受大分子抑制劑或小分子物質抑制，從而影響活...
求助測定酶活時的稀釋倍數問題，測定酶活力時，為什麼要控制酶的稀釋倍數
即100萬份藥液中含有效成分的份數。例如。一般用於稀釋倍數較大的農藥或植物生長調節劑，對水時應先配成母液，a為ppm濃度的數值，表示在100公斤尿素溶液中有2公斤尿素。1。公式是。將熬好的石硫合劑，常用重量來表示 1份農藥的加水份數。式中x為稀釋1克原液加水量，小數點向後移4位。倍數濃度，一般用來表...
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