1樓:匿名使用者
酶的活性受溫度和ph影響都很大,你必須控制一個變數來研究另一個變數的影響。酶的活性都是需要在合適ph下測定,通常生化檢測實驗用的是磷酸緩衝液、tris緩衝液、bicine緩衝液較多,想了解更多可以找德晟這樣的緩衝劑生產廠家。
2樓:匿名使用者
因為加入緩衝器以後酶的活性的話會送強。
比較溫度 與ph對酶促反應速率的影響
3樓:匿名使用者
1.溫度對酶活力的影響。
各種酶在最適溫度範圍內,酶活性最強,酶促反應速度最大。在適宜的溫度範圍內,溫度每升高10℃,酶促反應速度可以相應提高1~2倍。不同生物體內酶的最適溫度不同。
如,動物組織中各種酶的最適溫度為37~40℃;微生物體內各種酶的最適溫度為25~60℃,但也有例外,如黑曲糖化酶的最適溫度為62~64℃;巨大芽孢桿菌、短乳酸桿菌、產氣桿菌等體內的葡萄糖異構酶的最適溫度為80℃;枯草桿菌的液化型澱粉酶的最適溫度為85~94℃.可見,一些芽孢桿菌的酶的熱穩定性較高。過高或過低的溫度都會降低酶的催化效率,即降低酶促反應速度。
最適溫度在60℃以下的酶,當溫度達到60~80℃時,大部分酶被破壞,發生不可逆變性;當溫度接近100℃時,酶的催化作用完全喪失。
對酶活力的影響。
酶在最適ph範圍內表現出活性,大於或小於最適ph,都會降低酶活性。主要表現在兩個方面:①改變底物分子和酶分子的帶電狀態,從而影響酶和底物的結合;②過高或過低的ph都會影響酶的穩定性,進而使酶遭受不可逆破壞。
酶(酶製劑)適宜在()溫和()ph調節下儲存?
4樓:情商遞鶴呢朝
⑴低溫下儲存:由於多數蛋白質和酶對熱敏感,通常35℃~40℃以上就會失活,冷藏於冰箱一般只能儲存一週左右,而且蛋白質和酶越純越不穩定,溶液狀態比固態更不穩定。因此通常要儲存於-5℃~-20℃,如能在-70℃下儲存則最為理想。
極少數酶可以耐熱:如核糖核酸酶可以短時煮沸;胰蛋白酶在稀hcl中可以耐受90℃;蔗糖酶在50℃~60℃可以保持15 min~30 min不失活。還有少數酶對低溫敏感,如鳥肝丙酮酸羧化酶25℃穩定,低溫下失活,過氧化氫酶要在0℃~4℃儲存,冰凍則失活,羧肽酶反覆凍融會失活等。
製成乾粉或結晶儲存:蛋白質和酶固態比在溶液中要穩定的多。固態乾粉製劑放在乾燥劑中可長期儲存,例如葡萄糖氧化酶乾粉0℃下可儲存2年,-15℃下可儲存8年。
通常,酶與蛋白質含水量大於10%,室溫低溫下均易失活,含水量小於5%時,37℃活性會下降,如要抑制微生物活性,含水量要小於10%,抑制化學活性,含水量要小於3%。此外要特別注意酶在凍干時往往會部分失活。 _
在保護劑下儲存:很早就有人觀察到,在無菌條件下,室溫儲存了45年的血液,血紅蛋白僅有少量改變,許多酶仍保留部分活性,這是因為血液中有蛋白質穩定的因素,為了長期儲存蛋白質和酶,常常要加入某些穩定劑:例如:
惰性的生化或有機物質:如糖類、脂肪酸、牛血清白蛋白、氨基酸、多元醇等,以保持穩定的疏水環境。②中性鹽:
有一些蛋白質要求在高離子強度(1 mol/l~4mol/l或飽和的鹽溶液)的極性環境中才能保持活性。最常用的是:mgso4、nacl、(nh4)so4等。
使用時要脫鹽。③巰基試劑:一些蛋白質和酶的表面或內部含有半胱氨酸巰基,易被空氣中的氧緩饅氧化為磺酸或二硫化物而變性,儲存時可加入半胱氨酸或巰基乙醇。
總之,對樣品的儲存必須給以只夠的重視,一些常用酶的儲存條件可參見《生物化學制備技術》(蘇拔賢主編)一書中的"一些酶儲存的條件和穩定性"表,其他各種生物大分子和生物製劑的儲存條件,可查閱有關的文獻和酶學手冊。
說明ph、溫度、啟用劑、抑制劑對酶促反應速度的影響
5樓:瑞春楓
1、ph:在一定ph下,酶促反應具有最大速度,高於或低於此值,反應就會下降。
2、溫度:在溫度較低時,反應的速度隨溫度增高而加快,在溫度超過一定範圍後,酶變性且反應速度反而隨溫度上升而減慢。
3、啟用劑:不可逆抑制劑引起酶的永久性失活。可逆抑制劑引起酶活性暫時性喪失。
4、抑制劑:加入啟用劑酶促反應速度增加。通常酶對啟用劑有一定選擇性,且有濃度的要求。
6樓:村裡一姐
1、酶的濃度
假設一分子的唾液澱粉酶,在底物充足,其他條件均適宜的條件下,1秒鐘能將5mmol的澱粉分子水解,那麼該過程中酶促反應的速率為5mmol/s,在該條件下唾液澱粉酶的活性也為5mmol/s。根據高中階段的理解,如果將酶分子數增加為10個,則酶的濃度增加10倍,則1秒鐘就能將50mmol的澱粉分子水解,此過程中酶促反應的速率為50mmol/s,但在該條件下唾液澱粉酶的活性還是為5mmol/s。
因此,酶的濃度只會影響酶促反應速率,而不會影響酶的活性。
2、底物濃度
底物在較低濃度範圍內,底物濃度越高,底物與酶結合的速率就越快,從而使酶促反應越快,那這個過程能否說明底物濃度影響了酶的活性呢?實際上,從上面我們對酶活性的定義的理解,是當酶被底物飽和時,每分子的酶在單位時間內催化底物分子轉變為產物的數量,因此在底物不充足的情況下的酶促反應速率不能用來衡量酶活性。
根據高中階段的理解,如果當底物充足,隨底物濃度增大,酶促反應速率是不會加快。我們可以看出,底物的濃度在較低的情況下,只會影響酶促反應速率,不能影響酶的活性,而在底物充足的情況下,底物濃度對酶促反應速率和酶的活性均沒有影響。
3、ph和溫度
對於這兩個因素影響酶的活性是不存在爭議的。在張楚富主編的《生物化學原理》的書中是這樣提到:ph可以影響酶蛋白的結構、酶的活性部位的解離狀態、輔酶的解離以及底物分子的解離,從而影響酶與底物的結合以及對底物的催化效力。
溫度升高是通過對酶結構破壞,從而抵消了酶促反應速率隨溫度升高而升高的趨勢。我們可以看出ph和溫度都通過影響了酶的結構來影響酶促反應速率。
因此,ph和溫度均影響酶的活性。
4、抑制劑和啟用劑
該類影響因素可以分為三類:
第一類是競爭性抑制劑,同底物競爭酶的活性位點,從而影響酶和底物的結合效率。
第二類是反競爭性抑制劑,同底物和酶複合體結合,阻止產物的形成,從而影響產物的生產速率。其實也可以看做酶的結構發生了改變,從而導致酶促反應速率下降。
第三類是非競爭性抑制劑,同酶以及酶和底物的複合體結合,從而降低酶促反應速率。啟用劑是可以改變一個無活性酶前體(酶原),使之成為有活性的酶,或加快某種酶反應的速率產生酶啟用作用的一些物質。
7樓:宿夕章茶
酶促反應速度受酶活性影響,酶大多數是蛋白質,也就是蛋白質的活性影響酶促反應速率。
蛋白質都有最適溫度和最適ph。在這個溫度、ph下反應速率最大,溫度過高或者過低,ph過高或者過低,都會時酶促反應速率降低。
啟用劑使酶促反應速率加快,抑制劑則降低。
8樓:那淑珍汗子
酶是具有生物催化功能的生物大分子,即生物催化劑,它能夠加快生化反應的速度,但是不改變反應的方向和產物。也就是說酶只能用於改變各類生化反應的速度,但並不是生化。
**ph對酶活性影響時,為什麼要先讓酶在緩衝液中保溫一段時間後在加入反應液?
9樓:鵝子野心
先分別保溫,然後混合,這將使反應溫度均勻,反應速率穩定,也便於準確計算反應時間。
**ph對酶活影響,是瞭解不同ph條件下,酶催化底物反應速度的差異,因此需要將酶與底物混合,不混合,酶怎麼催化底物反應呢!酶不與底物混合在不同ph條件下放置,是瞭解酶在不同ph條件下的穩定性,因為酶的活力是隨著存放時間的延長逐漸損失的,合適的ph下儲存時間長,不合適的條件下儲存時間段。
溫度同樣有上述兩種情況,一是溫度對酶活力的影響(酶與底物混合),二是溫度對酶的穩定性的影響(酶不與底物混合)。
酶活性測定時,加緩衝液的目的是什麼?
10樓:匿名使用者
緩衝來液 1)緩衝溶液作用原理和ph值源。
當往某些溶液中加入一定量的酸和鹼時,有阻礙溶液ph變化的作用,稱為緩衝作用,這樣的溶液叫做緩衝溶液。弱酸及其鹽的混合溶液(如hac與naac),弱鹼及其鹽的混合溶液(如nh3·h2o與nh4cl)等都是緩衝溶液。
由弱酸ha及其鹽naa所組成的緩衝溶液對酸的緩衝作用,是由於溶液中存在足夠量的鹼a-的緣故。當向這種溶液中加入一定量的強酸時,h 離子基本上被a-離子消耗:
所以溶液的ph值幾乎不變;當加入一定量強鹼時,溶液中存在的弱酸ha消耗oh-離子而阻礙ph的變化。
在測定酶活性時要測定酶促反應的初速度,其目的是為了防止各種干擾因素對酶促反應的影響。
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