在進行溫度對酶活性的影響時為什麼加入ph緩衝液?

時間 2023-04-27 22:12:02

1樓:匿名使用者

酶的活性受溫度和ph影響都很大,你必須控制一個變數來研究另一個變數的影響。酶的活性都是需要在合適ph下測定,通常生化檢測實驗用的是磷酸緩衝液、tris緩衝液、bicine緩衝液較多,想了解更多可以找德晟這樣的緩衝劑生產廠家。

2樓:匿名使用者

因為加入緩衝器以後酶的活性的話會送強。

比較溫度 與ph對酶促反應速率的影響

3樓:匿名使用者

1.溫度對酶活力的影響。

各種酶在最適溫度範圍內,酶活性最強,酶促反應速度最大。在適宜的溫度範圍內,溫度每升高10℃,酶促反應速度可以相應提高1~2倍。不同生物體內酶的最適溫度不同。

如,動物組織中各種酶的最適溫度為37~40℃;微生物體內各種酶的最適溫度為25~60℃,但也有例外,如黑曲糖化酶的最適溫度為62~64℃;巨大芽孢桿菌、短乳酸桿菌、產氣桿菌等體內的葡萄糖異構酶的最適溫度為80℃;枯草桿菌的液化型澱粉酶的最適溫度為85~94℃.可見,一些芽孢桿菌的酶的熱穩定性較高。過高或過低的溫度都會降低酶的催化效率,即降低酶促反應速度。

最適溫度在60℃以下的酶,當溫度達到60~80℃時,大部分酶被破壞,發生不可逆變性;當溫度接近100℃時,酶的催化作用完全喪失。

對酶活力的影響。

酶在最適ph範圍內表現出活性,大於或小於最適ph,都會降低酶活性。主要表現在兩個方面:①改變底物分子和酶分子的帶電狀態,從而影響酶和底物的結合;②過高或過低的ph都會影響酶的穩定性,進而使酶遭受不可逆破壞。

酶(酶製劑)適宜在()溫和()ph調節下儲存?

4樓:情商遞鶴呢朝

⑴低溫下儲存:由於多數蛋白質和酶對熱敏感,通常35℃~40℃以上就會失活,冷藏於冰箱一般只能儲存一週左右,而且蛋白質和酶越純越不穩定,溶液狀態比固態更不穩定。因此通常要儲存於-5℃~-20℃,如能在-70℃下儲存則最為理想。

極少數酶可以耐熱:如核糖核酸酶可以短時煮沸;胰蛋白酶在稀hcl中可以耐受90℃;蔗糖酶在50℃~60℃可以保持15 min~30 min不失活。還有少數酶對低溫敏感,如鳥肝丙酮酸羧化酶25℃穩定,低溫下失活,過氧化氫酶要在0℃~4℃儲存,冰凍則失活,羧肽酶反覆凍融會失活等。

製成乾粉或結晶儲存:蛋白質和酶固態比在溶液中要穩定的多。固態乾粉製劑放在乾燥劑中可長期儲存,例如葡萄糖氧化酶乾粉0℃下可儲存2年,-15℃下可儲存8年。

通常,酶與蛋白質含水量大於10%,室溫低溫下均易失活,含水量小於5%時,37℃活性會下降,如要抑制微生物活性,含水量要小於10%,抑制化學活性,含水量要小於3%。此外要特別注意酶在凍干時往往會部分失活。 _

在保護劑下儲存:很早就有人觀察到,在無菌條件下,室溫儲存了45年的血液,血紅蛋白僅有少量改變,許多酶仍保留部分活性,這是因為血液中有蛋白質穩定的因素,為了長期儲存蛋白質和酶,常常要加入某些穩定劑:例如:

惰性的生化或有機物質:如糖類、脂肪酸、牛血清白蛋白、氨基酸、多元醇等,以保持穩定的疏水環境。②中性鹽:

有一些蛋白質要求在高離子強度(1 mol/l~4mol/l或飽和的鹽溶液)的極性環境中才能保持活性。最常用的是:mgso4、nacl、(nh4)so4等。

使用時要脫鹽。③巰基試劑:一些蛋白質和酶的表面或內部含有半胱氨酸巰基,易被空氣中的氧緩饅氧化為磺酸或二硫化物而變性,儲存時可加入半胱氨酸或巰基乙醇。

總之,對樣品的儲存必須給以只夠的重視,一些常用酶的儲存條件可參見《生物化學制備技術》(蘇拔賢主編)一書中的"一些酶儲存的條件和穩定性"表,其他各種生物大分子和生物製劑的儲存條件,可查閱有關的文獻和酶學手冊。

說明ph、溫度、啟用劑、抑制劑對酶促反應速度的影響

5樓:瑞春楓

1、ph:在一定ph下,酶促反應具有最大速度,高於或低於此值,反應就會下降。

2、溫度:在溫度較低時,反應的速度隨溫度增高而加快,在溫度超過一定範圍後,酶變性且反應速度反而隨溫度上升而減慢。

3、啟用劑:不可逆抑制劑引起酶的永久性失活。可逆抑制劑引起酶活性暫時性喪失。

4、抑制劑:加入啟用劑酶促反應速度增加。通常酶對啟用劑有一定選擇性,且有濃度的要求。

6樓:村裡一姐

1、酶的濃度

假設一分子的唾液澱粉酶,在底物充足,其他條件均適宜的條件下,1秒鐘能將5mmol的澱粉分子水解,那麼該過程中酶促反應的速率為5mmol/s,在該條件下唾液澱粉酶的活性也為5mmol/s。根據高中階段的理解,如果將酶分子數增加為10個,則酶的濃度增加10倍,則1秒鐘就能將50mmol的澱粉分子水解,此過程中酶促反應的速率為50mmol/s,但在該條件下唾液澱粉酶的活性還是為5mmol/s。

因此,酶的濃度只會影響酶促反應速率,而不會影響酶的活性。

2、底物濃度

底物在較低濃度範圍內,底物濃度越高,底物與酶結合的速率就越快,從而使酶促反應越快,那這個過程能否說明底物濃度影響了酶的活性呢?實際上,從上面我們對酶活性的定義的理解,是當酶被底物飽和時,每分子的酶在單位時間內催化底物分子轉變為產物的數量,因此在底物不充足的情況下的酶促反應速率不能用來衡量酶活性。

根據高中階段的理解,如果當底物充足,隨底物濃度增大,酶促反應速率是不會加快。我們可以看出,底物的濃度在較低的情況下,只會影響酶促反應速率,不能影響酶的活性,而在底物充足的情況下,底物濃度對酶促反應速率和酶的活性均沒有影響。

3、ph和溫度

對於這兩個因素影響酶的活性是不存在爭議的。在張楚富主編的《生物化學原理》的書中是這樣提到:ph可以影響酶蛋白的結構、酶的活性部位的解離狀態、輔酶的解離以及底物分子的解離,從而影響酶與底物的結合以及對底物的催化效力。

溫度升高是通過對酶結構破壞,從而抵消了酶促反應速率隨溫度升高而升高的趨勢。我們可以看出ph和溫度都通過影響了酶的結構來影響酶促反應速率。

因此,ph和溫度均影響酶的活性。

4、抑制劑和啟用劑

該類影響因素可以分為三類:

第一類是競爭性抑制劑,同底物競爭酶的活性位點,從而影響酶和底物的結合效率。

第二類是反競爭性抑制劑,同底物和酶複合體結合,阻止產物的形成,從而影響產物的生產速率。其實也可以看做酶的結構發生了改變,從而導致酶促反應速率下降。

第三類是非競爭性抑制劑,同酶以及酶和底物的複合體結合,從而降低酶促反應速率。啟用劑是可以改變一個無活性酶前體(酶原),使之成為有活性的酶,或加快某種酶反應的速率產生酶啟用作用的一些物質。

7樓:宿夕章茶

酶促反應速度受酶活性影響,酶大多數是蛋白質,也就是蛋白質的活性影響酶促反應速率。

蛋白質都有最適溫度和最適ph。在這個溫度、ph下反應速率最大,溫度過高或者過低,ph過高或者過低,都會時酶促反應速率降低。

啟用劑使酶促反應速率加快,抑制劑則降低。

8樓:那淑珍汗子

酶是具有生物催化功能的生物大分子,即生物催化劑,它能夠加快生化反應的速度,但是不改變反應的方向和產物。也就是說酶只能用於改變各類生化反應的速度,但並不是生化。

**ph對酶活性影響時,為什麼要先讓酶在緩衝液中保溫一段時間後在加入反應液?

9樓:鵝子野心

先分別保溫,然後混合,這將使反應溫度均勻,反應速率穩定,也便於準確計算反應時間。

**ph對酶活影響,是瞭解不同ph條件下,酶催化底物反應速度的差異,因此需要將酶與底物混合,不混合,酶怎麼催化底物反應呢!酶不與底物混合在不同ph條件下放置,是瞭解酶在不同ph條件下的穩定性,因為酶的活力是隨著存放時間的延長逐漸損失的,合適的ph下儲存時間長,不合適的條件下儲存時間段。

溫度同樣有上述兩種情況,一是溫度對酶活力的影響(酶與底物混合),二是溫度對酶的穩定性的影響(酶不與底物混合)。

酶活性測定時,加緩衝液的目的是什麼?

10樓:匿名使用者

緩衝來液 1)緩衝溶液作用原理和ph值源。

當往某些溶液中加入一定量的酸和鹼時,有阻礙溶液ph變化的作用,稱為緩衝作用,這樣的溶液叫做緩衝溶液。弱酸及其鹽的混合溶液(如hac與naac),弱鹼及其鹽的混合溶液(如nh3·h2o與nh4cl)等都是緩衝溶液。

由弱酸ha及其鹽naa所組成的緩衝溶液對酸的緩衝作用,是由於溶液中存在足夠量的鹼a-的緣故。當向這種溶液中加入一定量的強酸時,h 離子基本上被a-離子消耗:

所以溶液的ph值幾乎不變;當加入一定量強鹼時,溶液中存在的弱酸ha消耗oh-離子而阻礙ph的變化。

在測定酶活性時要測定酶促反應的初速度,其目的是為了防止各種干擾因素對酶促反應的影響。

酶活性指什麼,影響酶活性的條件是什麼?

來自大竹海標新立異的蘭果樹 酶活性指的是有機體的生命活動表現了它內部化學反應歷程的有序性,這種有序性是受多方面因素調節的,一旦破壞了這種有序性,就會導致代謝紊亂,產生疾病,甚至死亡。酶活力受到調節和控制是區別於一般催化劑的重要特徵。酶的活性受抑制劑可調節 酶受大分子抑制劑或小分子物質抑制,從而影響活...

溫度對鋼材效能有什麼影響,溫度對鋼材效能的影響

豆豆安靜 其他回答 鋼是含碳量在0.04 2.3 之間的鐵碳合金。為了保證其韌性和塑性,含碳量一般不超過1.7 鋼的主要元素除鐵 碳外,還有矽 錳 硫 磷等。鋼的分類方法多種多樣,其主要方法有如下七種 1 按品質分類 1 普通鋼 2 優質鋼 3 高階優質鋼 2.按化學成份分類 1 碳素鋼 a.低碳鋼...

TaqDNA聚合酶的最適溫度為74為什麼延伸溫度為

雖然tap酶的最適溫度在74度,但處於這個溫度下酶失活的速度也較72度要快,而72度時,酶的活力與74度相比雖有下降,但對最終結果影響不大而且溫度高,不利於引物和模板的結合,也不利於合成出的dna鏈與模板結合。taq dna聚合酶是第一個被發現的熱穩定dna聚合酶,分子量65kd,最初由saiki等...