1樓:
性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
蛋白質含量 3.5%~5.0%( w/v)血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)
無菌檢驗 陰性
支原體檢驗 陰性
細菌內毒素 ≤5(eu/ml)
牛腹瀉病毒 陰性
大腸桿菌噬菌體 陰性
支援細胞增殖(sp2/0-ag14) 生長曲線(接種濃度)最大增殖濃度≥2.5×106 個/ml
細胞倍增時間 ≤15h
克隆率 ≥85%
2樓:陸小鳳一笑
一、胎牛血清
各項質量指標符合2005版《中華人民共和國藥典》第三部附錄的要求。
1、性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
2、蛋白質含量 3.5%~5.0%( w/v)3、血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)4、無菌檢驗 陰性
5、支原體檢驗 陰性
6、細菌內毒素 ≤5(eu/ml)
7、牛腹瀉病毒 陰性
8、大腸桿菌噬菌體 陰性
9、支援細胞增殖(sp2/0-ag14) 生長曲線(接種濃度)最大增殖濃度≥2.5×106 個/ml
細胞倍增時間 ≤15h
克隆率 ≥85%
胎牛血清功能和應用有哪些
3樓:用智慧解答
胎牛血清 各項質量指標符合2005版《中華人民共和國藥典》第三部附錄的要求。 1、性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。 2、蛋白質含量 3.
5%~5.0%( w/v) 3、血紅蛋白含量 ≤0.02%( w/v) 4、無菌檢驗 陰性 5、支原體檢驗 陰性 6、細菌內毒素 ≤5(eu/ml) 7、牛腹瀉病毒 陰性 8、大腸桿菌噬菌體 陰性 9、支援細胞增殖(sp2/0-ag14) 生長曲線(接種濃度)最大增殖濃度≥2.
5×106 個/ml 細胞倍增時間 ≤15h 克隆率≥85%血清的主要成分: 血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很複雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。 顯然,胎牛血清是品質最高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。功能:
牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用於動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。 1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。
2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。 3.
有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。 4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子**。
5.起酸鹼度緩衝液作用。 6.
提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩餘胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
胎牛血清與小牛血清的區別有哪些
4樓:湯小軍
胎牛是未與外界環境接觸的母體內的牛,所以血清內igg等免疫因子相對含量較少,適合用於免疫類細胞的培養。小牛血清是出生後再採血的,所以相對來說免疫因子會多一些。其他滲透壓,ph,蛋白,血紅蛋白,內毒素之類的就跟採血過程和生產過程有關了。謝謝。
5樓:南堅談幼安
小牛血清含在離開母體後自身產生的一些代謝物質,當然也包括一些生長激素,而胎牛血清絕大部分的物質來自於母體
6樓:匿名使用者
除了生產成本和****不一樣外,兩種血清的成分也很不相同。胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時,將胎牛取出並進行心臟穿刺取血。穿刺取血可最大程度的避免外界的汙染。
而新生牛血清是從剛出生到2周內的新生牛靜脈採血。和新生牛血清相比,胎牛血清顯然產量低,成本高。
二者的成分也很不一樣。和新生牛血清相比,胎牛血清除了免疫球蛋白含量很低之外,還含有豐富的胚胎生長促進因子以及各種還未完全鑑定的成分,可滿足所培養細胞的特殊的代謝需求。
如何檢測培養基裡有無胎牛血清
7樓:王標異
培養基的選擇:
細胞培養是實驗室裡最常見和最基本的實驗了,但卻不是最簡單的。別小看細胞培養,這裡可蘊含著大學問。有時候細胞狀態不好,轉染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。
影響細胞培養的因素很多,讓我們先從培養基和血清說起。
◆ mem是由eagle』s基礎培養基(bme)發展而來的,其中增加了組分的範圍及濃度。
◆ 改良的bem(dmem)培養基是為小鼠成纖維細胞設計的,現在常用於貼壁細胞的培養。dmem的氨基酸濃度是mem的兩倍,維生素濃度是mem的4倍,採用雙倍的hco3-和co2濃度起到更好的緩衝作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/l,後來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調整為4500 mg/l,這就是大家常說的低糖和高糖了。
◆ amem含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應用於各種細胞型別,包括對營養成分要求苛刻的細胞。
◆ ham』s f12是為在低血清濃度下克隆cho細胞而設計的,現在也廣泛應用於克隆形成率的分析及原代培養。f12還可以與dmem等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物,這種培養基已應用於許多原代培養及更難養的細胞系的培養。
◆ rpmi 1640培養基是專為淋巴細胞培養而設計的,現在已廣泛應用於懸浮細胞的培養。
準備幾種培養基,然後花大約兩週的時間做一個簡單的細胞生長實驗,來選擇其中最適合的。
以前大部分實驗室都是用乾粉培養基,但配製過程就較為繁瑣,要溶解、調ph值,過濾,過程中可能會產生一些濃度誤差,而且有些實驗室的水質並不理想,所以培養的效果會有差異。
血清的選擇:
血清含有生長因子可促進細胞的繁殖,含有附著因子可促進細胞的貼壁,同時還具有抗胰酶活性。血清同時也是礦物質、脂類及激素的**。最常用的血清有小牛血清、新生牛血清、胎牛血清和馬血清等。
牛血清是按照採血時間的早晚來分類的。採血時間越早,營養物質越豐富,所含抗體也越少,因而胎牛血清適合要求高的細胞系和克隆化培養。
而血清批次間的差別就是不可避免的,這種差異**於不同的製備方法和除菌方法、動物的年齡差別及血清的儲存條件等,而且與取血動物的**關係密切。不同的牧場、不同的氣候天氣及其他環境因素都可能影響血清的質量。因此選好了一種血清就要儘可能長期使用它。
在需要更換時,也要儘量保持與原有的一批血清相似。現在很多公司都提供血清預留,你一旦選定了某個批次的血清,最好備足一年的量,這樣可以避免很多麻煩。
血清固然是細胞培養中不可或缺的成分,但血清的批間差異大,更換血清時需要做大量的測試以取保替換的血清與原來的相似。而血清的**也是必須要考慮的因素。
無血清培養基(serum-free media),通常以sfm表示,顧名思義,就是在細胞培養中不需要新增血清,但是在某些應用中可能要新增生長因子或細胞因子。無血清培養基中新增了血清的主要成分:粘附因子、生長因子、必需的營養物質和激素等,能減少上述血清帶來的不利因素,使細胞培養的條件更穩定。
但它也不是完美的,從有血清培養過渡到無血清培養的條件並不像想象中那麼直截了當。處於發育的不同分化階段的細胞(例如幹細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方,對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時,也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用,因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。
另外,它的**也比普通的培養基貴很多。
這麼多種,要選擇起來也是個頭疼的事情。除了部分培養基是公開配方的,如用於培養內皮細胞的mcdb 131(sigma),大部分液體培養基都是專利配方的,也就是說其中的成分是保密的。那麼你只能是檢索文獻、讓**商推薦,然後用自己的細胞做幾次傳代培養來選出最合適的培養基。
畢竟實踐出真知嘛。
胎牛血清和小牛血清在動物細胞培養的應用上有什麼區別?為什麼?謝謝
8樓:
有區別,胎牛血清含有豐富的胚胎髮育過程中必須的一些生長因子和激素等。而小牛血清中的含量則少很多。對於更嬌貴/對培養環境要求更苛刻的細胞,當然是胎牛血清更好。
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