1樓：小親親
對溶劑的要求
含有雜原子的有機溶劑，通常均具有很強的末端吸收。因此，當作溶劑使用時，它們的使用範圍均不能小於截止使用波長。例如甲醇、乙醇的截止使用波長為205nm。
另外，當溶劑不純時，也可能增加干擾吸收。因此，在測定供試品前，應先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求，即將溶劑置1cm石英吸收池中，以空氣為空白（即空白光路中不置任何物質）測定其吸光度。溶劑和吸收池的吸光度，在220～240nm範圍內不得超過0.
40，在241～250nm範圍內不得超過0.20，在251～300nm範圍內不得超過0.10，在300nm以上時不得超過0.
05儀器的校正和檢定
1.波長 由於環境因素對機械部分的影響，儀器的波長經常會略有變動，因此除應定期對所用的儀器進行全面校正檢定外，還應於測定前校正測定波長。常用汞燈中的較強譜線237.
83nm，253.65nm，275.28nm，296.
73nm，313.16nm，334.15nm，365.
02nm，404.66nm，435.83nm，546.
07nm與576.96nm；或用儀器中氘燈的486.02nm與656.
lonm譜線進行校正；鈥玻璃在波長279.4nm，287.5nm，333.
7nm，360.9nm，418.5nm，460.
0nm，484.5nm，536.2nm與637.
5nm處有尖銳吸收峰，也可作波長校正用，但因**不同或隨著時間的推移會有微小的變化，使用時應注意；近年來，常使用高氯酸鈥溶液校正雙光束儀器，以10%高氯酸溶液為溶劑，配製含氧化鈥（ho2o3）4%的溶液，該溶液的吸收峰波長為241.13nm，278.lonm，287.
18nm，333.44nm，345.47nm，361.
31nm，416.28nm，451.30nm，485.
29nm，536.64nm和640.52nm。
儀器波長的允許誤差為：紫外光區±1nm，500nm附近±2nm。
2.吸光度的準確度 可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。取在120℃乾燥至恆重的基準重鉻酸鉀約60mg，精密稱定，用0.
005mol/l硫酸溶液溶解並稀釋至1000ml，在規定的波長處測定並計算其吸收係數，並與規定的吸收係數比較，應符合表中的規定。 3.雜散光的檢查 可按下表所列的試劑和濃度，配製成水溶液，置1cm石英吸收池中，在規定的波長處測定透光率，應符合表中的規定。
2樓：中國化工儀器網
測定供試品前，應先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求；即用1cm石英吸收池盛溶劑,以空氣為空白（即空白光路中不置任何物質）測定其吸收度,溶劑和吸收池的吸收度,在220～240nm範圍內不得超過0.40；在241～250nm範圍內不得超過0.20；在251～300nm範圍內不得超過0.
10， 在300nm以上時不得超過0.05。
紫外比色的問題
紫外可見分光光度法定量檢測樣品的一般流程是什麼?
3樓：2012簡單
儀器的校正和檢定 （1） 波長 由於環境因素對機械部分的影響，儀器的波長經常會略有變動，因此除應定期對所用的儀器進行全面校正檢定外，還應於測定前校正測定波長。常用汞燈中的較強譜線237.83nm、253.
65nm、275.28nm、296.73nm、313.
16nm、334.15nm、365.02nm、404.
66nm、435.83nm、546.07nm與576.
96nm，或用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正，鈥玻璃在279.
4nm、287.5nm、333.7nm、360.
9nm、418.5nm、460.0nm、484.
5nm、536.2nm與637.5nm波長處有尖銳吸收峰，也可作波長校正用，但因**不同或隨著時間的推移會有微小的差別，使用時應注意。
（2）吸光度的準確度可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。取在120℃乾燥至恆重的基準重鉻酸鉀約60mg，精密稱定 ，用0.005mol/l硫酸溶液溶解並稀釋至1000ml，在規定的波長處測定並計算其吸收係數，並與規定的吸收係數比較，應符合表中的規定。
波長/nm235（最小）257（最大）313（最小）350（最大）吸收係數
的規定值124.5144.048.62106.6吸收係數
的許可範圍123.0～126.0142.
8～146.247.0～50.
3105.5～108.5 （3） 雜散光的檢查可按下頁表的試劑和濃度，配製成水溶液，置1cm石英吸收池中，在規定的波長處測定透光率，應符合表中的規定。
試劑濃度%（g/ml）測定用波長（nm）透光率 %碘化鈉
亞硝酸鈉1.00
5.00220
340<0.8
<0.8
對溶劑的要求
含有雜原子的有機溶劑，通常均具有很強的末端吸收。因此，當作溶劑使用時，它們的使用範圍均不能小於截止使用波長。例如甲醇、乙醇的截止使用波長為205nm 。
另外，當溶劑不純時，也可能增加干擾吸收。因此，在測定供試品前，應先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求，即將溶劑置1cm石英吸收池中，以空氣為空白（即空白光路中不置任何物質）測定其吸收度。溶劑和吸收池的吸光度，在220～240nm 範圍內不得超過0.
40，在241～250nm範圍內不得超過0.20，在251～300nm範圍內不得超過0.10，在300nm以上時不得超過0.
05。測定法測定時，除另有規定外，應以配製供試品溶液的同批溶劑為空白對照，採用1cm的石英吸收池，在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度，或由儀器在規定波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確，除另有規定外，吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內，並以吸光度最大的波長作為測定波長。一般供試品溶液的吸收度讀數，以在0.3～0.
7之間的誤差較小。儀器的狹縫波頻寬度應小於供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度會偏低；狹縫寬度的選擇，應以減小狹縫寬度時供試品的吸收度不再增大為準，由於吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸光度後應減去空白讀數，或由儀器自動扣除空白讀數後再計算含量。當溶液的ph值對測定結果有影響時，應將供試品溶液和對照品溶液的ph值調成一致。
（1） 鑑別和檢查 分別按各品種項下的方法進行。
（2） 含量測定 一般有以下幾種。
對照品比較法
按各品種項下的方法，分別配製供試品溶液和對照品溶液，對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分規定量的100%±10%，所用溶劑也應完全一致，在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸光度後，按下式計算供試品中被測溶液的濃度∶
cx=（ax/ar）cr
式中 cx為供試品溶液的濃度；
ax為供試品溶液的吸收度；
ar為對照品溶液的濃度；
cr為對照品溶液的吸收度。
吸收係數法
按各品種項下的方法配製供試品溶液，在規定的波長處測定其吸光度，再以該品種在規定條件下的吸收係數計算含量。用本法測定時，吸收係數通常應大於100，並注意儀器的校正和檢定。
比色法供試品溶液加入適量顯色劑後測定吸光度以測定其含量的方法為比色法。
用比色法測定時，應取數份梯度量的對照品溶液，用溶劑補充至同一體積，顯色後，以相應試劑為空白，在各品種規定的波長處測定各份溶液的吸光度，以吸光度為縱座標，濃度為橫座標繪製標準曲線，再根據供試品的吸光度在標準曲線上查得其相應的濃度，並求出其含量。
也可取對照品溶液與供試品溶液同時操作，顯色後，以相應的試劑為空白，在各品種規定的波長處測定對照品和供試品溶液的吸光度，按上述（1）法計算供試品溶液的濃度。
除另有規定外，比色法所用空白係指用同體積溶劑代替對照品或供試品溶液，然後依次加入等量的相應試劑，並用同樣方法處理製得。
紫外-可見分光光度法的使用方法
4樓：匿名使用者
《中華人民共和國藥典》2023年版 第一部 附錄va （p附錄28）： （1） 波長 由於環境因素對機械部分的影響，儀器的波長經常會略有變動，因此除應定期對所用的儀器進行全面校正檢定外，還應於測定前校正測定波長。常用汞燈中的較強譜線237.
83nm、253.65nm、275.28nm、296.
73nm、313.16nm、334.15nm、365.
02nm、404.66nm、435.83nm、546.
07nm與576.96nm，或用儀器中氘燈的486.02nm與656.
10nm譜線進行校正，鈥玻璃在279.4nm、287.5nm、333.
7nm、360.9nm、418.5nm、460.
0nm、484.5nm、536.2nm與637.
5nm波長處有尖銳吸收峰，也可作波長校正用，但因**不同或隨著時間的推移會有微小的差別，使用時應注意。
（2）吸光度的準確度可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。取在120℃乾燥至恆重的基準重鉻酸鉀約60mg，精密稱定 ，用0.005mol/l硫酸溶液溶解並稀釋至1000ml，在規定的波長處測定並計算其吸收係數，並與規定的吸收係數比較，應符合表中的規定。
波長/nm235（最小）257（最大）313（最小）350（最大）吸收係數
的規定值 124.5 144.0 48.62 106.6 吸收係數
的許可範圍 123.0～126.0 142.
8～146.2 47.0～50.
3 105.5～108.5 （3） 雜散光的檢查可按下頁表的試劑和濃度，配製成水溶液，置1cm石英吸收池中，在規定的波長處測定透光率，應符合表中的規定。
試劑濃度%（g/ml）測定用波長（nm）透光率 %碘化鈉 1.00 220 <0.8 亞硝酸鈉5.
00340<0.8 測定時，除另有規定外，應以配製供試品溶液的同批溶劑為空白對照，採用1cm的石英吸收池，在規定的吸收峰波長±2nm以內測試幾個點的吸收度，或由儀器在規定波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確，除另有規定外，吸收峰波長應在該品種項下規定的波長±2nm以內，並以吸光度最大的波長作為測定波長。一般供試品溶液的吸收度讀數，以在0.
3～0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波頻寬度應小於供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度會偏低；狹縫寬度的選擇，應以減小狹縫寬度時供試品的吸收度不再增大為準，由於吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸光度後應減去空白讀數，或由儀器自動扣除空白讀數後再計算含量。
當溶液的ph值對測定結果有影響時，應將供試品溶液和對照品溶液的ph值調成一致。
（1） 鑑別和檢查 分別按各品種項下的方法進行。
（2） 含量測定 一般有以下幾種。 按各品種項下的方法，分別配製供試品溶液和對照品溶液，對照品溶液中所含被測成分的量應為供試品溶液中被測成分規定量的100%±10%，所用溶劑也應完全一致，在規定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸光度後，按下式計算供試品中被測溶液的濃度∶
cx=（ax/ar）cr
式中 cx為供試品溶液的濃度；
ax為供試品溶液的吸光度；
cr為對照品溶液的濃度；
ar為對照品溶液的吸光度。 供試品溶液加入適量顯色劑後測定吸光度以測定其含量的方法為比色法。
用比色法測定時，應取數份梯度量的對照品溶液，用溶劑補充至同一體積，顯色後，以相應試劑為空白，在各品種規定的波長處測定各份溶液的吸光度，以吸光度為縱座標，濃度為橫座標繪製標準曲線，再根據供試品的吸光度在標準曲線上查得其相應的濃度，並求出其含量。
也可取對照品溶液與供試品溶液同時操作，顯色後，以相應的試劑為空白，在各品種規定的波長處測定對照品和供試品溶液的吸光度，按上述（1）法計算供試品溶液的濃度。
除另有規定外，比色法所用空白係指用同體積溶劑代替對照品或供試品溶液，然後依次加入等量的相應試劑，並用同樣方法處理製得。
紫外分光光度法測定藥物含量的方法主要有哪兩種
標準物質做吸收度的標準曲線，再測樣品的吸收度，換算成濃度。有的測透過率。前者是主要的 標準曲線法 對比吸光係數法 hi漫海 紫外 可見分光光度法 是根據物質分子對波長為200 760nm這一範圍的電磁波的吸收特性所建立起來的一種定性 定量和結構分析方法。操作簡單 準確度高 重現性好。波長長 頻率小 ...
分光光度法能測定些什麼物質！要具體點的最好有國標
定量分析，廣泛用於各種物料中微量 超微量和常量的無機和有機物質的測定。定性和結構分析，紫外吸收光譜還可用於推斷空間阻礙效應 氫鍵的強度 互變異構 幾何異構現象等。反應動力學研究，即研究反應物濃度隨時間而變化的函式關係，測定反應速度和反應級數，反應機理。研究溶液平衡，如測定絡合物的組成，穩定常數 酸鹼...
凱氏定氮法與分光光度法的優缺點，常用來測定蛋白質含量的方法有哪些？優缺點是什麼？
假面 凱氏定氮法的優點 可用於所有食品的蛋白質分析中 操作相對比較簡單 實驗費用較低 結果準確，是一種測定蛋白質的經典方法 用改進方法 微量凱氏定氮法 可測定樣品中微量的蛋白質。缺點 最終測定的是總有機氮，而不只是蛋白質氮 實驗時間太長 至少需要2h才能完成 精度差，精度低於雙縮脲法 所用試劑有腐蝕...