用Trizol法提DNA遇到的問題求教

時間 2023-01-13 22:55:05

1樓:匿名使用者

trizol是用來提取rna的,因為ph低,所以dna都是溶解在酚相的,你可以用的tris平衡酚來提取dna

2樓:

您好!具體參考94頁內容!

trizol的ph為什麼是酸性

3樓:匿名使用者

trizol是一種新型總rna抽提試劑,可以直接從細胞或組織中提取總rna。其含有苯酚、異硫氰酸胍等物質,能迅速破碎細胞並抑制細胞釋放出的核酸酶。

異硫氰酸胍、核酸酶都是酸性的。

trizol法提取rna如何避免dna汙染

4樓:國際不配叫米蘭

專兩層,取rna層的時候吸取一定要屬小心,吸得時候一定要緩慢,不要怕浪費,有的人吸得很多,很怕浪費,結果就吸到了中間層和下層,個人覺得吸取80%最多了,再多就很容易吸到雜質了,操作要小心,動作快速準卻,這樣才能提到高質量的rna

5樓:9武

1,裂解組織或者細胞使用的。

trizol量偏少;

2,使用的組織材料中含有大量的有機回溶劑(如:乙醇/異丙醇答等)、高純度的buffer、鹼性溶劑等;

3,如果提取的rna中含有dna時,也可以使用dnase i進行dna消化。

6樓:匿名使用者

除了上樓的方法—復—一般操作都需制要那樣進行的。

還有bai,如果你對rna質量du要求很高的話,可以用zhidna酶去除daodna汙染。不過有可能導致rna的部分降解。或者也可以純化rna,這些步驟都可以避免dna汙染。

不過dna酶慎用!

7樓:比哦三代眼

我也是bai類似問題,rna用dutaq酶擴出片段。。。悶zhi可以在rt前用dnase1處理~

方法dao:rna(1ug)回+buffer(1ul)+water(to9ul)+dnase(1ul) 37度。

答30分。+ 25mm edta 60度 10分鐘。

然後不換管直接在裡面加rt的東西 最後定容到20ul 上pcr

trizol法提取rna 如何去除dna

8樓:匿名使用者

1,裂解組織或者細胞使用的trizol量偏少; 2,使用的組織材料中含有大量的有機溶劑(如:乙醇/異丙醇等)、高純度的buffer、鹼性溶劑等; 3,如果提取的rna中含有dna時,也可以使用dnase i進行dna消化。

這個如果你做反轉錄的話,只能是用pcr檢測了。電泳基本檢測不出來。象現在的試劑盒或者trizol提的rna,除質量太差,一般含基因組很少。

如果rt-pcr發現結果不對,可以用那種不含rna酶的dna酶處理一下。 如果引物能避開的話,有點dna也沒關係。

trizol處理的樣本可以提dna嗎

9樓:smile我的愛人

可以的,trizol加氯仿離心後分三層,上中下分別是rna 蛋白質 dna

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