1樓：
dna在複製時,由隨從鏈所形成的一些子代dna短鏈稱為岡崎片段(okazaki...⑵連線岡崎片段:在dna連線酶的催化下,將岡崎片段連線起來,形成完整的dna長鏈。...
⑴自動終止:模板dna鏈在接近轉錄終止點處存在相連的富含gc和at的區域,使rna轉錄...
有岡崎本人的實驗方案可供參考：
2023年岡崎（reiji okazaki）設計了兩組實驗，其一是脈衝標記實驗（pilse－labeling
experiment）。岡崎利用t4噬菌體侵染e.coli(t-)菌株，並分別用dttp(3h-t)進行2’’，7’’,15’’,30’’,60’’,120’’的脈衝標記，分離提取t4噬菌體dna，變性後，進行cscl密度梯度離心，以檢測具放射性的沉降片斷，判斷片斷大小。
結果表明經不同標記時間的，被3h-t標記的新合成的dn**段幾乎都為10-20s， 即均為1000-2000核苷酸大小。第二組實驗是脈衝追蹤實驗（pulse－chase
experiment），為了研究在脈衝標記實驗中所發現的10－20s的小片段在複製全過程中的發展結局，岡崎將實驗菌株先進行同位素標記培養30秒，然後轉入正常培養基繼續培養數分鐘，分離dna進行密度梯度離心，發中∑�我馴渙�映晌?0－120s的大片段。為此將dna的這種複製方式稱為不連續複製模式，將最初合成的10－20s片段稱為岡崎片段。
參考資料
2樓：匿名使用者
樓上提出的設計引物pcr不科學，岡崎片段只存在於複製叉，大小隨機，沒有可供設計引物的序列資訊，而且即使能夠pcr也不能說明問題
有岡崎本人的實驗方案可供參考：
2023年岡崎（reiji okazaki）設計了兩組實驗，其一是脈衝標記實驗（pilse－labeling
experiment）。岡崎利用t4噬菌體侵染e.coli(t-)菌株，並分別用dttp(3h-t)進行2’’，7’’,15’’,30’’,60’’,120’’的脈衝標記，分離提取t4噬菌體dna，變性後，進行cscl密度梯度離心，以檢測具放射性的沉降片斷，判斷片斷大小。
結果表明經不同標記時間的，被3h-t標記的新合成的dn**段幾乎都為10-20s， 即均為1000-2000核苷酸大小。第二組實驗是脈衝追蹤實驗（pulse－chase
experiment），為了研究在脈衝標記實驗中所發現的10－20s的小片段在複製全過程中的發展結局，岡崎將實驗菌株先進行同位素標記培養30秒，然後轉入正常培養基繼續培養數分鐘，分離dna進行密度梯度離心，發現小片段已被連線成為70－120s的大片段。為此將dna的這種複製方式稱為不連續複製模式，將最初合成的10－20s片段稱為岡崎片段。
可能你會覺得他的試驗太麻煩，確實，不過那時是2023年，呵呵。現在做的話只要將提取的t4dna變性後上電泳，然後放射自顯影就可以取代昂貴的氯化銫梯度離心了。其他方案我認為可以完全依照前人的做法，只限答題哦～～自己設計試驗的話就不用t4了，缺點太多。
3樓：匿名使用者
設計引物，進行pcr擴增
很專業的，我特意請教生化專業的研究生回答的
4樓：紫杉之顛
看書啊，分子生物學書上有
朱玉賢版的
生物化學實驗題(高手或老師進)急!!!!!!!!
5樓：匿名使用者
這個還是很有難度
的，我是學生物的，但研究方向不是
說點粗淺想法：
即然是要證明其是否有校正功能，那肯定是通過觀察用野生型聚合酶i指導的dna合成其鹼基配對正確率高低
不知可否人工pcr，通過pol i 與其它人工合成酶對比，分析結果
6樓：匿名使用者
先把野生型的大腸桿菌置於不利於其生長環境，生長就會受到抑制，然後再把其置於有利其生長環境中，如果能生長，就能證明dna聚合酶ⅰ具有自我校正能力
7樓：
（1）原核生物大腸桿菌dna聚合酶
1)dna聚合酶ⅰ。在隨從鏈合成時，先合成了許多岡崎片段，而後由於rna引物的去除形成了空隙，此時dna polⅰ它催化聚合反應，延長了各個片段，從而填補了片段間的間隙，使以上片段得以靠近，為片段連線成長鏈創造了條件。所以dna polⅰ的聚合作用主要是在填補隨從鏈片段間空隙上發揮作用。
dna polⅰ還具有3′→5′外切酶活性可識別並去除錯誤的鹼基。這種活性在dna複製中起了校對功能。dna polⅰ的校對活性對dna複製的準確性起著重要作用。
dna polⅰ還具有5′→3′外切酶活性。5′→3′外切酶活性也有修正錯誤的功能，補充其3′→5′外切酶修正錯誤的作用。例如紫外照射產生的嘧啶二聚體，就是在其5′→3′切酶作用下切除的。
dna pol ⅲ結構中不對稱的二聚體，同時分別催化著前導鏈和隨從鏈的合成。
dna pol ⅲ也具有3′→5′外切酶活性，所以對於dna複製也有校對的功能，可停止加入或除去錯誤的核苷酸然後繼續加正確的核苷酸。因此，dna polⅲ配合dnapoli可將複製的錯誤率大大地降低，從10-4降為10-6或更少。 當此片段接近前方的片段時，由dna pol ⅲ的5′→3′外切酶活性切除了rna引物，造成了片段間的空間；繼而dna poli催化進行5′→3′方向的聚合作用，填補了片段間的空隙。
（2）真核生物dna聚合酶。 真核生物dna pol有α、β、γ、δ及 ε五種。
真核生物的dna複製是在dna聚合酶α與dna聚合酶δ互配合下催化進行的，還有一些酶及蛋白質因子參與反應。dna polα與引發酶共同起引發作用，然後由dna polδ催化前導鏈及隨從鏈的合成。dna polγ是線粒體中dna複製酶。
dna polδ及ε均有外切酶活性，因此也有編輯功能，校正複製中的錯誤。它們的5′→3′外切酶活性可能在切除引物rna中有作用。（2）真核生物dna聚合酶。
真核生物dna pol有α、β、γ、δ及 ε五種。酶活性
8樓：大衰哥無敵
我只知道這些
一、dna的複製的特徵
1．半保留複製 在dna複製時，親代的每一條鏈均可作為模板合成一條新鏈。一條來自親代的舊鏈與一條新鏈以氫鍵相連，形成子代雙鏈dna。由於兩個子代分子中各有一條鏈來自親代，而另一條鏈是新生成的，所以這就是半保留複製方式。2
9樓：匿名使用者
任何問題都不是問題.如何解決問題才是問題.
10樓：不知火舞
不會！！！！！！！！！！！！1
11樓：匿名使用者
這都不會 你是考研的嗎 真丟人 高中幹嗎呢
生物化學問題！高手請進！
12樓：
從atp分子中含有兩個高能磷酸鍵，當在酶作用下水解時，遠離腺苷a也就是γ-p的那個高能磷酸鍵斷裂，形成adp和pi（磷酸），並將其蘊藏的能量釋放出來。該鍵在一定條件下很容易斷裂或重新形成，從而保證了能量的釋放與儲存。所以32p放射活性會出現在pi中。
而靠近a的高能磷酸鍵（β-p）不易斷裂和重新組合，不能參與能量代謝。所以[β-32p]-atp在同樣的時間內，32p的放射活性不出現在pi中。
13樓：匿名使用者
atp水解形成adp和adp和pi形成atp 是一個動態平衡的過程。當加入[γ-32p]-atp時，其水解會生成adp和32p標記的pi。但是當加入[β-32p]-atp時，其水解是生成32p標記的adp和pi。
只有當帶32p標記的adp再發生水解才會生成amp和32p標記的pi。
生物化學問題(有難度,希望高手作答) 20
14樓：綠毛水怪的墨跡
選a.限速步驟：這個要從酶的km來說，即米氏常數。
1/km近似地表示酶對底物親和力的大小。這個倒數值越大，酶促反應越容易進行。一般生化書上都會寫關鍵酶。
即~限速步驟所在第二點，嘌呤核苷酸有兩個途徑。從頭合成途徑中，關鍵酶為磷酸核糖醯胺轉移酶，合成的是pra即5-磷酸核糖胺。
有兩個生物化學考研題目不會，高手幫忙解決下啊，感激涕零 50
15樓：漆雕皎
第一題我記得是說酶液裡面有抑制活性的物質存在（好像主要是金屬類的，，，我們本科時老師提過，很久不記得了），所以很多時候，稀釋了反而酶的活性可以體現出來
第二道題我也不是很清楚，我想可能是脯氨酸或者是天冬氨酸，穀氨酸。因為在三羧酸反應中，那個琥珀醯coa反應到琥珀酸那個反應，產生一個gtp的那個裡面，是琥珀醯coa合酶裡面的脯氨酸在起作用。。。那個pi可以連到pro的n原子上。。。
這樣我也在想，那鹼性氨基酸都有可能了的說。。。
至於為什麼我猜天冬氨酸和穀氨酸，是因為那個糖酵解途徑第二階段裡面，1，3-二磷酸甘油酸那個磷酸就是通過和羧基形成磷脂鍵的。。。
不知道，看看別人怎麼說吧先~~~
（其實可以去問問你們生化老師，然後類，順便聊聊，看看人家有什麼建議之類，興許還可以幫著猜題。。。）
第二題你們老師說的有道理啦。。。比我的實際多了。。。可是第一題說來也是，但是我覺得我們老師說的更加make sense啦，建議你答題的時候都寫上去吧
16樓：匿名使用者
1.co2
2coiu5
生物化學三羧酸迴圈問題，高手進！ 10
17樓：匿名使用者
這要復看是第幾輪生成制co2了。
如果乙醯輔bai
酶a和oxaloacetate是第一輪結du合，那麼兩份子的co2都不zhi會來自乙醯輔酶daoa。原因什麼的不太清楚，但是證明是用的同位素標記證明的。
第二輪以及以後的co2，就不知道來自於誰了。
書上的一個觀點應該是不嚴謹的。
另，國外的biochemistry寫得比較詳細，有什麼問題可以查查的~~
18樓：醉美雨雪
兩個都是草醯乙酸的。異檸檬酸的離羥基最遠的羧基是乙醯輔酶a的第一次脫羧是中間的羧基第二次是離羥基最近的羧基。不知道我說懂沒!
生物化學問題(有難度,希望高手作答)
求解一道大學生物化學簡答題 高手進！！關於血漿脂蛋白
生物化學肽鏈推斷問題，求高手解答
19樓：匿名使用者
單肽鏈用硼氫化鋰還原後c-末端氨基酸被還原成相應的α-氨基醇。
還有一種是lys或者arg，因為胰蛋白酶識別位點是lys或者arg的羧基端肽鍵。
所以原來肽鏈的結構是
（n）val-lys（or arg）-trp-gly（c）lys和arg能不能排除其中一個我再想想。。。。
ms我想不出來有什麼條件可以排除lys或者arg~~~他為啥不用edman降解捏？非要搞sanger法還要胰蛋白酶水解~浪費我感情啊~
化學生物高手求助 生物化學問題！高手請進！
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