1樓：匿名使用者
組織細胞培養工作中，可以從以下幾方面來預防支原體的汙染：控制環境汙染；嚴格實驗操作；細胞培養基和器材要保證無菌；在細胞培養基衝加入適量的抗生素。
抗生素主要用於消毒培養液，是培養過程中預防微生物汙染的重要手段，也是微生物汙染不嚴重時的「急救」方法。不同抗生素殺滅微生物不同，應根據需要選擇。
在細胞培養過程中如果發現破碎的細胞甚多，培養細胞需要頻繁改善營養環境才能支援長期傳代培養時，應該懷疑支原體汙染。支原體汙染難以觀察特殊的外觀變化，培養液也不渾濁。
支原體汙染細胞後，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有：抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯合處理。要注意的是：
支原體沒有細胞壁，故作用於細胞壁生物合成的抗生素，如內醯胺類、萬古黴素等是不敏感的；對多粘菌素、利福平、磺胺藥物普遍耐火藥。對支原體最有抑制活性抗生素是四環素類、大環內酯類等，氨基糖苷類、氯黴素對支原體有較小的抑制作用。必要時更換所有培養用物。
通常，濾過除菌的方法對支原體是沒有作用的。
由於一些微生物，如支原體，病毒等能通過濾膜，所以過濾藥品仍潛在被外源微生物汙染的危險，近年來，60co輻射滅菌技術在醫藥、食品等領域廣泛應用，由於輻射滅菌能夠徹底殺滅所有微生物。有試驗證實以2mrad輻射處理的各培養基樣品達到了無菌要求，經多批培養試驗，輻射滅菌安全可靠；輻射滅菌的培養基營養效能不低於過濾組，證明輻射滅菌對培養基效能無不良影響；對血清的輻射滅菌試驗效果也表明60coγ射線不影響培養效果。把乾粉培養基經無菌操做定量分裝於滅菌容器內，輻射後以乾粉原型貯藏，不但培養基的純淨性得到保障，而且營養效能較過濾後以水溶液形式儲存更穩定，對谷氨醯胺等這類水溶液不穩定者特別合適。
目前，有專門做支原體檢測的試劑盒，可以用細胞滴片檢測。市場上已有了新一代支原體抗生素m-plasmocin（invivogen公司），能有效的殺滅支原體，又不影響細胞本身的代謝，而且處理過的細胞不會重新感染支原體。另外，配合支原體檢測試劑盒（市場上有售，如美國icn公司的產品），可以幫助儘快發現支原體的汙染。
2樓：遊萱斐水
用掃描電鏡方法簡便快速.
①相差顯微境檢測：將細胞按種於事先放置於培養瓶內的蓋玻片上，24h後取出，用相差油鏡觀察．支原體呈暗色微小顆粒位於細胞表面和細胞之間。
②熒光染色法：熒光染色用能與dna特異性結合的熒光染料hoechst
33258，可使支原體內含有的dna著色，染色後用熒光顯微鏡觀察。具體方法如下：首先將細胞接種蓋玻片上，在細胞未長滿前取出玻片，用不合酚紅的hanks液漂洗一下，用l：
3醋酸甲酵固定10min，然後用生理鹽水漂洗．置於用生理鹽水配濃度為50pg／ml的hoechst
33258中染色10min。染色後用蒸溜水洗1—2min．向細胞面滴加ph5．5磷酸緩衝液數滴，然後置熒光顯微鏡下觀察。鏡下支原體為散在於細胞同圍或附於細胞膜表面的亮綠色小點。
③電鏡檢查；用掃描電鏡方法簡便快速．也可以利用透射電鏡。
④dna分子條文檢查或支原體培養等方法：檢出率高．但方法較為複雜
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