1樓：念憶
細胞轉染是指將外源分子如dna，rna等匯入真核細胞的技術。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷髮展，轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。
陽離子脂質體表面帶正電荷，能與核酸的磷酸根通過靜電作用，將dna分子包裹入內，形成dna脂複合物，也能被表面帶負電的細胞膜吸附。
再通過融合或細胞內吞進入細胞。脂質體轉染適用於把dna轉染入懸浮或貼壁培養細胞中，是目前實驗室最方便的轉染方法之一，其轉染率較高。
2樓：墨汁諾
轉染一般是將目的基因構建到某個載體，將構建好的重組質粒匯入細胞中，這樣就能表達你所要的目的蛋白用於後續實驗。轉染可以得到細胞中本身不表達的蛋白或是能提高某些蛋白表達量。
dna與轉染試劑孵育的目的：dna和轉染試劑結合形成dna-轉染劑複合物。
dna-轉染劑複合物與細胞孵育的目的：細胞吸收dna-轉染劑複合物，進而dna進入細胞。
3樓：
轉染就是把你要放到細胞裡面的東西擱進去唄。。。。。。成功的證明可以將要轉染的東西進行熒光基團的修飾 載體的話加上報告基因等方法來確定 意義不是顯而易見麼。。。
細胞轉染的目的是什麼?
4樓：佰草集
是希望你所構建的目的基因（你裝入轉染載體中的基因片段）在真核細胞中得到表達（也就是將基因片段經由細胞生產出蛋白質的過程）。要注意一個概念，轉染，指的是將基因片段匯入到真核細胞的過程。
5樓：日夕夜汐
什麼細胞？轉染什麼？
一般來說染病毒是為了基因工程插入基因進行轉基因生產，農業上還使用農桿菌轉化法。
什麼是轉染？為什麼要質粒轉染？ 5
6樓：1987八月初六
轉染(transfection)：指真核細胞由於外源dna摻入而獲得新的遺傳標誌的過程。常規轉染技術可分為瞬時轉染和穩定轉染（永久轉染）兩大類。
轉染目的：研究你的目的片段到細胞內的表達。
轉染一般是將目的基因構建到某個載體，將構建好的重組質粒匯入細胞中，這樣就能表達你所要的目的蛋白用於後續實驗。
懸浮細胞的轉染怎麼做
7樓：北京索萊寶科技****
懸浮細胞的轉染方法：（以下內容**生物幫資訊）
dxy721認為：
懸浮細胞和貼壁細胞在轉染過程中差別不大，主要差別在於轉染後的篩選，當然如果你做的是瞬時轉染就不存在篩選的問題了。
其實轉染的過程很簡單，問題是能不能轉的進去的，轉染率能有多少，轉進去是否可以穩定表達目的蛋白等等。
我們也是用脂質體做懸浮細胞的轉染，說明書上都有具體的操作過程，將脂質體和目的基因按比例混合，然後加到細胞懸液裡就ok了，說的簡單，實際上還是有一些細節要注意的，比如脂質體和目的基因混合的比例，轉染的細胞數，細胞的代數，細胞的狀態，有的還要求在轉染的前一天傳代一次，不過不要怕，這些在脂質體說明書上都有明確的說明，按照說明書做就可以了。
jinghuanlv認為：
懸浮細胞和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。
脂質體轉染的原理基於電荷吸引原理，先形成脂質體-dna複合物，散佈在細胞周圍，然後通過細胞的內吞作用，將目的基因匯入細胞內，而脂質體複合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低於貼壁細胞。
我們實驗室轉染懸浮細胞是用的電穿孔法，目前為止，懸浮細胞轉染的最好方法還是電轉，我們實驗室用的電轉儀是bio-rad的，使用條件是電壓250v，電容975uf，效果不錯，不妨一用。
8樓：匿名使用者
可以分享一下rfect懸浮細胞的轉染操作說明，本說明書適用於24孔培養板的轉染實驗，其他規格的培養板的用量參照下面**，**給出的是每孔的用量與體積。a. 細胞接種：
轉染前一天接種細胞，每孔 500 μl 培養基（不可加抗生素），使細胞在轉染時密度在30-40% 。b. sirna-rfectsp混合物準備：
1. 6pmol sirna 用50μl無血清培養基稀釋。2.
2μl rfectsp用50μl無血清培養基稀釋。輕輕混勻，室溫孵育5min。注意：
確保在25 min內執行第三步操作，不要過於延遲。3. 孵育5min後，將sirna 稀釋液與rfectmn稀釋液混合（總體積100μl）。
輕輕混勻，室溫孵育20 min。c. 將混合物加到培養的細胞內（完全培養基培養）：
1. 將100μl混合物加入培養孔內，培養孔內含有0.5ml培養的細胞。
輕輕晃動培養板5min，混勻。2. 37°c培養48-72h，檢測基因抑制效果。
如果需要，細胞培養4-6h時可以更換培養基，但不是必須。孵育時間的長短，取決於細胞型別、所幹擾基因本身及分析方法。可設定不同的孵育時間進行實驗以確定最佳孵育時間。
轉染實驗優化: 為了提高轉染效率，最好對轉染條件進行優化，特別是首次使用。例如：
24孔培養板，調整 sirna與rfectsp試劑的用量。sirna用量在6-60 pmol (final concentration 10- 100 nm)之間調整，rfectsp試劑用量在1.0 - 3.
0μl之間調整。轉染實驗要點l 轉染過程不可新增抗生素，否則會導致細胞死亡；l 首次實驗sirna的用量設定在終濃度10nm、30nm、50nm、100 nm進行摸索 ，後續實驗根據實驗結果修改。
9樓：義翹神州加油
什麼細胞？什麼轉染試劑呢？
推薦看一下您手頭的轉染試劑說明書，一般都有懸浮轉染操作說明的。
siRNA轉染實驗，如何選擇siRNA轉染試劑
1.設計合成有效的sirna rnai的核心需要sirna對相應mrna進行有效的結合和作用。sirna的設計合成首先很重要，最優的設計可以用最小的工作濃度取得滿意的沉 默效果，減少副反應的發生。sirna的設計可以通過檢索,優先選用經過驗證的sirna或設計多對sirna。需要強調的是，需要同時設...
如何去除轉染後懸浮細胞中的死細胞
將培養瓶豎立放一段時間 50min左右 然後用吸管輕輕吸取上面1ml的細胞懸液，移入另一個新的已加培基的培養瓶中。或者ficoll分離，就像分離pbmc一樣，先把細胞混勻，然後小心緩慢地把細胞加入到ficol中，1000g離心20分鐘，收集位於ficoll和培養基之間的透明層，即為你的活細胞，這是在...
細胞轉染了gfp固定後還能發熒光嗎
細胞轉染gfp質粒並進行表達之後，一般細胞內會有大量的gfp蛋白，可以發出綠色熒光。gfp發出綠色熒光的原理是ca離子進入gfp的beta barrel結構中引起的特定能級，因此只要這個結構仍然保持著，就可以發出熒光。由於gfp的beta barrel結構非常穩定，一些版本的gfp蛋白 如egfp ...