1樓:匿名使用者
博凌科為解答:您的情況我們去年也曾遇到過。目前市面上的質粒提取試劑盒林林總總,令人難以取捨。
我覺得首先應該根據自己的需要來選取。進口的試劑盒,比如 qiagene,omiga,promega等固然好,但是**較貴,如果自己的實驗要求不是很高的話,用這些試劑盒感覺有浪費的嫌疑(當然經費充足無可 厚非)。但是有些國產的試劑盒不怎麼令然放心,象樓主這樣做穩定轉染的,要花費很多的時間和精力,最後因為試劑盒的問題影響實驗的進度有點得不償失,而且 脂質體都比較貴。
因此,價效比是最重要的因素。大部分的質粒提取試劑盒所得產物可分為如下幾個級別:1.
高階轉染級:這是最高純度的去內毒素的質粒純化,主要使用於基因**,cell顯微注射,原代細胞轉染等。2.
常規轉染級:它要優於2次cscl超速離心純化的質粒。3.
分子生物學級,相當於1次cscl超速離心純化的質粒。4.測序級:
主要用於常規酶切與連線用。我們實驗室用過qiagene,axgene,omiga和國產天根的。大家對qiagene的評價最好。
但是我自己的經驗(qiagene的漂洗 液用完了)是用qiagene的吸附柱和天根的漂洗液聯合得到的質粒最滿意od26/od280為1.8(呵呵,只是個別案例,樣本含量不足,僅供參 考)。我只做過原代細胞的順時轉染,穩定轉染我沒有做過,建議樓主可以考慮大家評價較好(比如天根的)試試看。
記得有些公司經常做活動給一些試用裝,也可 以嘗試。樓主也可以結合其他戰友的建議。
2樓:試劑與耗材
德元國際科技可以提供,也用試用裝的
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