1樓：匿名使用者
western 通常是sds-page，兩種膠是為了加大分離效果 分離的是蛋白
而dna/rna是瓊脂糖電泳，通常0.7-1%即可有很好的分離效果，分離的是核酸
因分離目的不同，使用試劑不同而定
2樓：
你是指積層膠和分離膠吧？因為使用兩層膠可以是條帶更銳利。
積層膠又叫濃縮膠，是一老外最先開始做的。由於濃縮膠是低濃度的聚丙烯醯胺凝膠，具有較大的孔徑，各種蛋白質都可以不受凝膠孔徑阻礙而自由通過。而且濃縮膠通常ph值較低(如ph6.
8)，這樣離子遷移速度不一致，所以樣品進入分離膠前將濃縮成很窄的區帶，便於以後的分離，這也叫濃縮膠的濃縮效應。
3樓：肥善
因為使用兩層膠可以是條帶更銳利。
積層膠又叫濃縮膠，是一老外最先開始做的。由於濃縮膠是低濃度的聚丙烯醯胺凝膠，具有較大的孔徑，各種蛋白質都可以不受凝膠孔徑阻礙而自由通過。而且濃縮膠通常ph值較低(如ph6.
8)，這樣離子遷移速度不一致，所以樣品進入分離膠前將濃縮成很窄的區帶，便於以後的分離，這也叫濃縮膠的濃縮效應。
4樓：我的世界紀錄表
我不是大人，我是三年級學生。
westernblot技術電泳前為什麼要蛋白定量
5樓：淵源
由於跑膠的時候每個點樣孔，每個跑道有一定的容量，加多了會堵塞，加太少則有可能檢測不到，造成假陰性。
所以有必要對總蛋白量有所控制。但是，是否有必要定量還是取決於實驗的目的。
westernblot電泳後，為什麼要考馬斯亮藍染色，直接轉膜不行嗎？謝謝！
6樓：匿名使用者
wb的膠用考馬斯亮藍染色，有為了確定你的目的條帶電泳情況目的，還有一個目的，就是跟用麗春紅染摸一樣的作用，看轉膜的效率。也就是看你的目的條帶是否都轉移到你的膜上了。
這步染色完全可以省略，一般都可以用預染marker來進行轉膜觀察，另外考馬斯亮藍與蛋白結合後，很難再去除。
7樓：匡雅霜
可以啊。
一般只是用考馬斯亮藍進行預染，提前看一下粗略的結果，不然等westernblot的結果出來基本要第二天了。所以不染色直接轉膜沒問題。
為什麼要用western blot
在sds page電泳前，一般樣品加入上樣緩衝液中並煮沸5 10分鐘，讓蛋白樣品變性並帶上一定電荷，使蛋白遷移速度只與分子量相關，這樣才能將不同的蛋白通過電泳儘量的區分開來。這個過程中，會打斷一些分子間的相互作用，包括抗體和蛋白樣品間的相互作用，也許是沒人這麼做的原因。western blot為什麼...
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