1樓：中山進去的
奇怪的問題哦，正負極沒變化呀，只是蛋白被sds包被以後帶了負電因此向正極泳動。
2樓：己飢己溺
效能。聚丙烯醯胺凝膠的機械效能好，有彈性，透明，相對地化學穩定，對ph和溫度變化比較穩定，在很多溶劑中不溶，是非離子型的，沒有吸附和電滲作用。通過改變濃度和交聯度，可以控制孔徑在廣泛的範圍內變動，並且製備凝膠的重複性好。由於純度高和不溶性，因此還適於少量樣品的製備，不致汙染樣品。
製備原理。聚丙烯醯胺凝膠是用丙烯醯胺（acr）和交聯劑甲叉雙丙烯醯胺（bis）在催化劑的作用下聚合而成。聚丙烯醯胺凝膠聚合的催化系統有化學聚合和光聚合兩種。本實驗是用化學聚合。
化學聚合的催化劑通常多采用過硫酸銨（ap）或過硫酸鉀，此外還需要一種脂肪族叔胺作加速劑，最有效的加速劑是n,n,n』,n』-四甲基乙二胺（temed）。在叔胺的催化下，由過硫酸銨形成氧的自由基，後者又使單體形成自由基，從而引發聚合反應。叔胺要處於自由鹼基狀態下才有效，所以在低ph時，常會延長聚合時間；分子氧阻止鏈的延長，妨礙聚合作用；一些金屬也能抑制聚合；冷卻可以使聚合速度變慢。
通常控制這些因素使聚合在1小時內完成，以便使凝膠的性質穩定。
凝膠濃度和交聯度與孔徑的關係。
凝膠濃度根據被分離的物質的分子量大小確定。當分析乙個未知樣品時，常先用的標準凝膠或用4~10%的凝膠梯度來試測，而後選出適宜的凝膠濃度。凝膠的機械效能、彈性是否適中很重要，膠太軟易斷裂，；太硬則脆，也易折斷。
sds-凝膠電泳法測定蛋白質分子量的原理。
蛋白質分子在聚丙烯醯胺凝膠中電泳時，它的遷移率取決於所帶淨電荷及分子的大小和形狀等因素。如果在聚丙烯醯胺凝膠系統中加入sds和巰基乙醇，則蛋白質分子的遷移率主要取決於它的分子量，而與所帶電荷和形狀無關。
在蛋白質溶液中加入sds和巰基乙醇後，巰基乙醇能使蛋白質分子中的二硫鍵還原；sds能使蛋白質的氫鍵、疏水鍵開啟，並結合到蛋白質分子上，形成蛋白質-sds複合物。sds與蛋白質的結合帶來兩個後果：第一，使各種蛋白質的sds-複合物都帶上相同密度的負電荷，掩蓋了不同種類蛋白質間原有的電荷差別，使所有的sds-蛋白質複合物在電泳時都以同樣的電荷／蛋白質比向正極移動；第二，sds與蛋白質結合後，還引起了蛋白質構象的改變。
這兩個原因使蛋白質-sds複合物在凝膠電泳中的遷移率不再受蛋白質原有電荷和形狀的影響，而只是蛋白質分子量的函式。
3樓：帳號已登出
非變性凝膠電泳，也稱為天然凝膠電泳，與非變性凝膠電泳最大的區別就在於蛋白在電泳過程中和電泳後都不會變性。最主要的有以下幾點：
1.凝膠的配置中非變性凝膠不能加入sds，而變性凝膠的有sds。
2.電泳載樣緩衝液中非變性凝膠的不僅沒有sds，也沒有巰基乙醇。
3.在非變性凝膠中蛋白質的分離取決於它所帶的電荷以及分子大小，不像sds-page電泳中蛋白質分離只與其分子量有關。
4.非變性凝膠電泳中，酸性蛋白和鹼性蛋白的分離是完全不同的，不像sds-page中所有蛋白都朝正極泳動。非變性凝膠電泳中鹼性蛋白通常是在微酸性環境下進行，蛋白帶正電荷，需要將陰極和陽極倒置才可以電泳。
5.因為是非變性凝膠電泳，所有的電泳時候電流不能太大，以免電泳時產生的熱量太多導致蛋白變性，而且步驟都要在0-4度的條件下進行，這樣才可以保持蛋白質的活性，也可以降低蛋白質的水解作用。這點跟變性電泳也不一樣。
所以與sds-page電泳相比，非變性凝膠大大降低了蛋白質變性發生的機率。
使用者382241171835059
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sds-聚丙烯醯胺凝膠電泳過程中正負極會發生什麼變化
4樓：網友
兩級發生水解，負極oh-失去電子 偏酸性 正極h離子得電子 偏鹼性。
蛋白質與sds結合發生形狀上的改變，一般為長棒形。pr自身所帶電荷被sds掩蔽，sds使pr帶上足夠多的負電荷，在page下，使pr間完全靠分子量的大小而分離。
sds-page電泳凝膠中各主要成分的作用?
5樓：
丙烯醯胺、甲叉雙丙烯醯胺，這兩個是形成凝膠的temed可以催化過硫酸銨從而產生自由基，從而加速丙烯醯胺凝膠的聚合。
聚合的引發劑。
tris緩衝溶液一般用hcl來調ph值。
sds 表面活性劑，跟蛋白結合，使蛋白表面帶負電。
6樓：匿名使用者
制膠緩衝液：濃縮膠選擇，分離膠選擇，選擇tris-hcl系統，具體作用後面介紹；
temed與ap：促凝作用，加速聚丙烯醯胺的凝固；
十二烷基硫酸鈉(sds)：陽離子去汙劑，作用有四：去蛋白質電荷、解離蛋白質之間的氫鍵、取消蛋白分子內的疏水作用、去多肽摺疊。
生物幫上面有這方面的知識的動物學等科研進展，動物學研究，昆蟲學，魚類學，鳥類學，哺乳動物。
做卵清蛋白sds凝膠電泳時會又兩條帶 該怎麼解釋呢
7樓：網友
最大的不同是。
聚丙烯醯胺凝膠電泳。
page）用的蛋白質不做任鎮中圓何變性處理。
sds-page中的sds是十御塌二烷基磺酸鈉。
是蛋白質變性劑，sds能拆散蛋白質的摺疊結構，然後沿伸展的多肽鏈的表面吸培銀附。使肽鏈帶淨負電荷，蛋白質在電場中的泳動速度僅與蛋白質顆粒大小有關。
在sds聚丙烯醯胺凝膠電泳中,不同蛋白質如何電泳？
8樓：魚同書昝念
dna電泳一般使用的都是瓊脂糖凝膠電泳，電泳的驅動力靠dna骨架本身的負電荷。
蛋白質電泳（一般指sds-page）一般使用的都是聚丙烯醯胺凝膠電泳，電泳的驅動力靠與蛋白質結合的sds上所攜帶的負電荷。
所以相同點就是樣品都是帶負電荷的，從負極向正極移動，移動的距離都和樣品的分子量有關。而且這兩個電泳體系可以互相交換使用。進行大分子蛋白質電泳時，可以考慮換用瓊脂糖凝膠，因為該體系孔徑大。
相反，如果需要精確到各位數鹼基的dna電泳也可以使用聚丙烯醯胺凝膠系統，因為使用該系統可以將相差乙個鹼基的兩條dna鏈分開。
不同點首先是樣品不同。這個就不用多說了。其次是結果的觀察方法不同。
dna電泳普遍使用eb做染料，在紫外燈下觀察；而蛋白電泳使用的考馬斯亮藍染色，還需要經過脫色步驟，不過觀察起來比較簡單。還有就是膠體系的差別，dna電泳通常是一膠跑到底，而蛋白質電泳則會有分離膠和濃縮膠之區別。
電泳中樣品移動的本質確實是樣品所攜帶的電荷。但是，區分這些條帶直接可以用分子量而無需使用電荷數，是因為這些樣品的電荷/分子量比都是恆定的了。以dna分子為例，它在電泳中的移動是靠其骨架中磷酸所攜帶的負電荷來實現的，而這個磷酸分子又是每乙個核苷酸中都有的，所以dna分子所攜帶的負電荷數是由其核苷酸總數決定的。
而且，dna分子中核苷酸的組成動輒成百上千，在如此大的分子量面前，討論單個核苷酸之間分子量的差別就顯得毫無意義。這樣，dna分子中負電荷的量就可以用dna的分子量來代替，反過來，dna的分子量也就可以用dna分子所攜帶的電荷來代替（一句話，dna分子的電荷/分子量比是恆定的）。
這在蛋白電泳中（特別是sds-page中）是一樣的。在sds-page中，sds將蛋白質變性成直線分子並緊密包裹於其上，使得其所攜帶的電荷與蛋白分子量成了一定的比例，剩下的就和核酸電泳一樣了。
至於為什麼核酸的橫著跑，蛋白豎著跑，個人認為最大的問題是蛋白制膠的過程導致的。蛋白制膠由於使用了兩種不同的凝膠系統，所以需要乙個水平的分介面。這個分介面在配膠的過程中是依靠異丙醇在重力作用下的壓力下形成的。
所以，一併就豎著跑了～～
你也是搞生化的？
甘氨酸在sds-page凝膠電泳中，起到什麼作用
9樓：校愛景兆詞
sds-page中樣品液和濃縮膠選tris/hcl緩衝液，電極液選tris/甘氨酸，電泳開始後，hcl解離成氯離子，甘氨酸解離出少量的甘氨酸根離子。蛋白質帶負電荷，因此一起向正極移動，其中氯離子最快，甘氨酸根離子最慢，蛋白居中。電泳開始時氯離子泳動率最大，超過蛋白，因此在後面形成低電導區，而電場強度與低電導區成反比，因而產生較高的電場強度，使蛋白和甘氨酸根離子迅速移動，形成以穩定的介面，使蛋白聚集在移動介面附近，濃縮成一中間層。
10樓：叔淑蘭本乙
簡單點說：甘氨酸在濃縮膠中不電解，也就是不帶電，泳動速度比樣品慢，與跑到快cl-之間形成乙個強電勢，把樣品夾中間，壓成一條線。到分離膠中甘氨酸電離，電泳速度超過樣品，沒有了強電勢差，樣品分離。
sds-聚丙烯醯胺凝膠電泳分離血清蛋白質的實驗中，當分離膠加完之後為什麼需要在上面加一層水？
11樓：網友
加一層水稱為水封。
目的是隔絕空氣使催化反應快速進行，進。
而形成凝膠，還可使分離膠上版沿平直。
並且權加水後，保持分離膠表面的平整性，使濃縮膠和分離膠都處於同一水平面上。
甘氨酸是為了解離出甘氨酸根離子，甘氨酸根離子可以穩定的介面，使蛋白聚集在移動介面附近，濃縮在一起。
樣品液煮沸這個問題我個人認為是可以商榷的，因為理論上煮沸可以使sds和蛋白更快更好的結合，以便於sds-page的進行。但是有些蛋白似乎不煮沸直接上樣結果更好。對於非還原loading buffer（即不含巰基乙醇）的樣品，一般是不要煮沸的。
長時間的電泳會使正極變酸，負極變鹼。
sds聚丙烯醯胺凝膠電泳中,樣品溶液中各種試劑的作用是什麼?
12樓：煙碩傅翰藻
為觀察電缺畢泳前沿加入伏告芹溴酚藍（陽極電泳，陰極電泳常用焦寧）,如果樣品溶解不佳可以加入尿素或非離子去汙劑助溶。tris和甘氨酸印象光聚合，sds結合蛋白消除電友和荷的影響。
瓊脂糖凝膠電泳的原理什麼，簡述凝膠電泳的原理與方法
汪小東最懷薰 瓊脂糖凝膠具有網路結構，物質分子通過時會受到阻力，大分子物質在湧動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決於淨電荷的性質和數量，而且還取決於分子大小，這就大大提高了分辨能力。但由於其孔徑相比於蛋白質太大，對大多數蛋白質來說其分子篩效應微不足道，現廣泛應用於核酸的研究中。...
聚丙烯醯胺凝膠電泳實驗操作過程中，應注意哪些事項
致愛約定 一 凝膠製備時 temed和ap要後加，加入後用玻棒緩慢勻速的混勻，避免有氣泡產生 然後馬上注入電泳槽內，插入梳子，這時也要勻速，但不能太慢，因為太慢的話底部的膠會比上面的膠凝的快，影響膠的質量，同時小心有氣泡 二 加樣時要注意 1.每空的上樣量不能過大，以免樣品溢位，造成各泳道相互汙染 ...
誰知道凝膠電泳中mark的作用機制
茗荷兒 dna marker 即標準dna，當然是dna了，要不怎麼能用來對比確定dna的分子量呢。marker是經過特殊酶切消化的dna 可能也有人工合成的，我也不太清楚 dna被切割成大小不等的片段，而切割位點是已知的，這樣marker中有哪些片段 片段的大小就是確定的了。所以電泳時可以跑出許多...