1樓：聲業長孫永
電流強度與釋放出熱量（q）之間的關係可列成如下公式,則越慢；t為電泳時間.
因此、焦耳熱.在電場作用下影響電泳泳動度的因素：
1.反之,則降低顆粒的泳動速度、篩孔.
3.公式表明.一般來說顆粒帶淨電荷量越多,帶電顆粒的泳動速度越快,常常會有一些離子基團如羧基,在篩孔大的凝膠中溶質顆粒泳動速度快,此溶液層會向負極移動、顆粒性質.
電場強度越高、電滲,多用於分離小分子物質,電泳過程中釋放出的熱量與電流強度的平方成正比、電場強度.高壓電泳時間短：主要是指電極溶液（緩衝溶液）和蛋白質樣品溶液的ph值：
電場強度是指每一釐米的電位降：顆粒的直徑;釐米：當支援物不是絕對惰性物質時,則加快顆粒的泳動速度：
在電泳過程中.反之、形狀及所帶靜電荷量對泳動速度有較大影響：支援物瓊脂和聚丙烯醯胺凝膠都有大小不等的篩孔,則泳動速度慢、羥基等吸附溶液中的正離子.
反之.4,或其形狀越接近球形,而且在嚴重時會燒斷濾紙或熔化瓊脂糖凝膠支援物,有時僅需數分鐘,在電場中的泳動速度就越快.高壓電泳常需要冷卻裝置.前者電場強度為2－10伏特/、溶液的性質.
反之則越慢,後者為70－200伏特/.這種溶液層的泳動現象稱為電滲,當顆粒的泳動方向與電滲方向一致時.
2、離子強度和粘度等.又稱為電位梯度或電勢梯度、磺酸基.它對泳動速度起著十分重要的作用,溫度和儀器裝置等因子的影響也應考慮.
根據電場強度（電壓的高低）大小,又可將電泳分為常壓電泳（100－500v）和高壓電泳（500－10000v）.
6;釐米.常壓電泳多用於分離大分子物質.這不僅降低解析度.
5.當電場強度或電極緩衝液中離子強度增高時,使靠近支援物的溶液相對帶電.
除上述影響泳動速度的因子外；i為電流強度：
q＝i2rt
式中r為電阻,若支援物的離子基團吸附溶液中的負離子,則溶液層會向正極移動；當顆粒的泳動方向與電滲方向相反時,電流強度會隨著增大
2樓：bai清雅
dna分子特性和電泳條件。
⑴dna分子大小 dna分子越大在膠中的摩擦阻力就越大，泳動也越慢，遷移速率與線狀dna分子質量的對數值成反比。
⑵dna分子構型 對於質粒dna分子即使具有相同分子質量，因構型不同也會造成電泳時受到的阻力不同，最終造成泳動速率的不同。常規電泳中質粒dna分子的3種構型泳動速率：超螺旋最快、線狀分子次之，開環分子最慢。
⑶不同的膠濃度 對於同種dna分子膠濃度越高，電泳速率越慢。不同膠濃度對於dn**段呈線性關係有所區別，濃度較稀的膠線性範圍較寬，而濃的膠對小分子dn**段呈現較好的線性關係。所以常規實驗中對於小片段dna分子的分離採用高濃度的膠分離（有時甚至用2％的凝膠），而對於分離大片段則用低濃度的凝膠。
⑷電場強度
⑸溴化乙錠 簡稱eb，電泳中的染色劑，具有扁平結構，能嵌入到dna鹼基對間，對線狀分子與開環分子影響較小而對超螺旋態的分子影響較大。當dna分子中嵌入的eb分子逐漸增多時，原來為負超螺旋狀態的分子開始向共價閉合環狀轉變，電泳遷移速度由快變慢；當嵌入的eb分子進一步增加時，dna分子由共價閉合環狀向正超螺旋狀態轉變，這時電泳遷移速率又由慢變快。這個臨界點的遊離eb質量濃度為0.
1g/ml~0.5g/ml，即電泳時所加的濃度。因此一般電泳可以忽略此因素，而對於特殊電泳，消除此因素影響可採用電泳後染色。
⑹電泳緩衝液
用瓊脂糖凝膠電泳分析核酸（dna和rna）有哪些影響因素？
3樓：匿名使用者
核酸分子是兩性解離分子，在高於其等電點的電泳緩衝液中，其鹼基不解離，而磷酸基團全部解離，核酸分子因而帶負電荷，電泳時向正極遷移。瓊脂糖主要從海洋植物瓊脂中提取而來並經糖基化修飾，為一種聚合鏈線性分子，使用瓊脂糖凝膠作為電泳支援介質，發揮分子篩功能，使得大小和構象不同的核酸分子的遷移率出現較大差異，從而達到分離的目的。瓊脂糖凝膠電泳操作簡單、快速，通過調整其使用濃度，使得解析度達到大多數實驗的要求，因此成為分離、鑑定、純化核酸分子的常用方法。
但操作過程中仍有不少要注意的問題。
1 凝膠製作
1．1 凝膠濃度 配製凝膠的濃度據實驗需要而變 ，一般在0．8％ ～2．0％之間，如果一次配製凝膠100 ml，沒用完的凝膠可以再次融化，但隨著融化次數的增加，水分丟失也越多，凝膠濃度則會越來越高，導致實驗結果不穩定，補水辦法：一是在容器上標記煮膠前的刻度，煮膠後補充相應的水分至原刻度；二是在煮膠前稱重，煮膠後補充水至原重量。粗略一點的方法是通過多次較恆定的煮膠條件得出一個經驗補水值。
以保證凝膠濃度基本維持在原濃度。核酸染色劑溴化乙錠(ethidium bromide)可加在融化的瓊脂糖中，終濃度為0．5 t*g／ml；也可在電泳結束後染色。
1、2 梳板的選用 一般每個制膠模具均配有多個齒型不同的梳板，梳齒寬厚，形成的點樣孑l容積較大，用於dna 片段**實驗等；相反，梳齒窄而薄，形成的點樣孑l容積就較小，用於pcr產物、酶切產物鑑定等。梳板的選擇主要是看上樣量的多少而定，一般來說，上樣量小時儘量選擇薄的梳板制膠，此時電泳條帶緻密清晰，便於結果分析。另外，每次制膠時都要注意梳齒與底板的距離至少要1 mm，否則，拔梳板時易損壞凝膠孑l底層，導致點樣後樣品滲漏。
當然，點樣孑l的破壞還與拔梳板的時間和方法有關，一般凝膠需冷卻30 min以上方可拔梳板，應急的情況下可以將成型的凝膠塊放4℃ 冰箱中冷卻15 min 左右，拔梳板的方法是將制膠槽放置在電泳槽中的電泳緩衝液中，然後垂直向上慢慢用力，因為有液體的潤滑作用，梳板易拔出且不易損壞點樣孑l。
2 點樣
點樣需加上樣緩衝液，因為上樣緩衝液中加了甘油或蔗糖增加密度，使樣品沉入孑l底；指示樣品的遷移過程，上樣緩衝液中一般加了兩種指示劑，溴酚蘭和二甲苯青(值得注意的是指示劑並非染色劑，dna染色劑是溴化乙錠，而且要在紫外光的激發下才能看見桔紅色熒光)。上樣緩衝液儲存液一般為6× (10×)，表示其濃度為工作濃度的六倍。使用時上樣緩衝液應稀釋到一倍濃度。
點樣方法是將移液器基本垂直點樣孑l，用另一隻手幫助固定移液器下端，移液器槍頭(tip)尖端進入點樣孑l即可將樣品注入孑l內，千萬不可將tip尖插至孑l底，並點上適合的dna分子量標準，所謂適合是指樣品dna分子量大小應基本在dna分子量標準範圍之內。
3 電泳
將電泳儀的正極與電泳槽的正極相連，負極與負極相連，核酸帶負電荷，從負極向正極移動。電泳槽中電泳緩衝液與制膠用電泳緩衝液應相同，電泳緩衝液剛好沒過凝膠1 mm 為好，電泳緩衝液太多則電流加大，凝膠發熱。電泳時凝膠上所加電壓一般不超過5 v／cm(指的是正負電極之間的距離，而不是凝膠的長度)，電泳時間一般為3o～60 min，根據實驗需要也可作適當調整，電壓增高，電泳時間縮短，核酸條帶相對來說不夠整齊，不夠清晰；相反，電壓降低，電泳時間較長，核酸條帶整齊清晰。
另外，如果電泳後樣品泳動很慢或者沒泳動，請檢查膠模兩端的封口膠條是否已去掉。
4 結果分析
較成功的電泳結果是分子量標準條帶整齊清晰，樣品條帶也整齊清晰，如果條帶模糊暗淡，單從瓊脂糖凝膠電泳角度來說，可能的原因：溴化乙錠的質和量怎樣?溴化乙錠見光易分解，母液配製時間過長或儲存不當(一般4℃ 避光儲存一年內有效)，或者終濃度沒達到0．5 vg／ml；電泳槽中緩衝液使用次數過多，緩衝能力下降。
特別是tae緩衝液，一般用2～3次就要更換，tbe緩衝液則可使用10次左右。
實際工作中經常發現dna 分子量標準小片段模糊不清，那足因為瓊脂糖凝膠濃度一般不會超過2 0％ ，較小的核酸片段在它的分辨範圍之內，並且eb帶正電荷，電泳時會向負傲移動，如果將凝膠置含eb(0．5#g／m1)的水溶液中30 min，較小的片段則可重新染色：另外，溴化乙錠(eb)是一種中等強度誘變劑，操作過程中要戴手套，並將加有eb的染色液作好標記、妥善儲存
瓊脂糖凝膠電泳的原理什麼，簡述凝膠電泳的原理與方法
汪小東最懷薰 瓊脂糖凝膠具有網路結構，物質分子通過時會受到阻力，大分子物質在湧動時受到的阻力大，因此在凝膠電泳中，帶電顆粒的分離不僅取決於淨電荷的性質和數量，而且還取決於分子大小，這就大大提高了分辨能力。但由於其孔徑相比於蛋白質太大，對大多數蛋白質來說其分子篩效應微不足道，現廣泛應用於核酸的研究中。...
瓊脂糖凝膠電泳的DNA為什麼要酶切
雷昊文庫 你好 我所知道的酶切的目的大致分為兩大類 載體的檢測和southern預備實驗。你做的如果是常規的pcr檢測，一般不需要酶切後再電泳，只是檢測一下你的目的基因是否成功進入你的受體材料，酶切後反而看不出來了。酶切的依據是你自己的載體圖中酶切位點的位置與類別，根據不同的酶切位點選擇不同種類的酶...
誰知道凝膠電泳中mark的作用機制
茗荷兒 dna marker 即標準dna，當然是dna了，要不怎麼能用來對比確定dna的分子量呢。marker是經過特殊酶切消化的dna 可能也有人工合成的，我也不太清楚 dna被切割成大小不等的片段，而切割位點是已知的，這樣marker中有哪些片段 片段的大小就是確定的了。所以電泳時可以跑出許多...