1樓：鬱悶的太陽
雙脫氧鏈終止法是現在應用最多的核酸測序技術（也即第一代dna測序技術），由sanger等2023年發明提出。主要用於dna基因分析。其原理是：
核酸模板在核酸聚合酶、引物、四種單脫氧鹼基存在條件下複製或轉錄時，如果在四管反應系統中分別按比例引入四種雙脫氧鹼基，只要雙脫氧鹼基摻入鏈端，該鏈就停止延長，鏈端摻入單脫氧鹼基的片段可繼續延長。
如此每管反應體系中便合成以共同引物為5』端，以雙脫氧鹼基為3』端的一系列長度不等的核酸片段。反應終止後，分四個泳道進行電泳。以分離長短不一的核酸片段（長度相鄰者僅差一個鹼基），根據片段3』端的雙脫氧鹼基，便可依次閱讀合成片段的鹼基排列順序。
sanger雙脫氧鏈終止法（酶法）測序程式 操作程式是按dna複製和rna反轉錄的原理設計的。
1.分離待測核酸模板，模板可以是dna，也可以是rna，可以是雙鏈，也可以是單鏈。
2.在4只試管中加入適當的引物、模板、4種dntp（包括放射性標記的ddntp，例如32p ddntp和dna聚合酶（如以rna為模板，則用反轉錄酶），再在上述4只管中分別加入一種一定濃度的ddntp（雙脫氧核苷酸）。
3.與單鏈模板（如以雙鏈作模板，要作變性處理）結合的引物，在dna聚合酶作用下從5』端向3』端進行延伸反應，32p隨著引物延長摻入到新合成鏈中。當ddntp摻入時，由於它在3』位置沒有羥基，故不與下一個dntp結合，從而使鏈延伸終止。
ddntp在不同位置摻入，因而產生一系列不同長度的新的dna鏈。
4.用變性聚丙烯醯胺凝膠電泳同時分離4只反應管中的反應產物，由於每一反應管中只加一種ddntp（如ddatp），則該管中各種長度的dna都終止於該種鹼基（如a）處。所以凝膠電泳中該泳道不同帶的dna 3』 末端都為同一種雙脫氧鹼基。
5.放射自顯影。根據四泳道的編號和每個泳道中dna帶的位置直接從自顯影圖譜上讀出與模板鏈互補的新鏈序列。
2樓：手機使用者
核酸模板在核酸聚合酶、引物、四種單脫氧鹼基存在條件下複製或轉錄時，如果在四管反應系統中分別按比例引入四種雙脫氧鹼基，只要雙脫氧鹼基摻入鏈端，該鏈就停止延長，鏈端摻入單脫氧鹼基的片段可繼續延長。如此每管反應體系中便合成以共同引物為5』端，以雙脫氧鹼基為3』端的一系列長度不等的核酸片段。反應終止後，分四個泳道進行電泳。
以分離長短不一的核酸片段（長度相鄰者僅差一個鹼基），根據片段3』端的雙脫氧鹼基，便可依次閱讀合成片段的鹼基排列順序。
雙脫氧鏈終止法的sanger雙脫氧鏈終止法（酶法）測序程式
3樓：匿名使用者
（一） sanger雙脫氧鏈終止法（酶法）測序程式 操作程式是按dna複製和rna反轉錄的原理設計的。
1.分離待測核酸模板，模板可以是dna，也可以是rna，可以是雙鏈，也可以是單鏈。
2.在4只試管中加入適當的引物、模板、4種dntp（包括放射性標記的ddntp，例如32p ddntp和dna聚合酶（如以rna為模板，則用反轉錄酶），再在上述4只管中分別加入一種一定濃度的ddntp（雙脫氧核苷酸）。
3.與單鏈模板（如以雙鏈作模板，要作變性處理）結合的引物，在dna聚合酶作用下從5』端向3』端進行延伸反應，32p隨著引物延長摻入到新合成鏈中。當ddntp摻入時，由於它在3』位置沒有羥基，故不與下一個dntp結合，從而使鏈延伸終止。
ddntp在不同位置摻入，因而產生一系列不同長度的新的dna鏈。
4.用變性聚丙烯醯胺凝膠電泳同時分離4只反應管中的反應產物，由於每一反應管中只加一種ddntp（如ddatp），則該管中各種長度的dna都終止於該種鹼基（如a）處。所以凝膠電泳中該泳道不同帶的dna 3』 末端都為同一種雙脫氧鹼基。
5.放射自顯影。根據四泳道的編號和每個泳道中dna帶的位置直接從自顯影圖譜上讀出與模板鏈互補的新鏈序列。
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