1樓：瘦成一導閃電呀
sanger 法測序的原理就是利用一種dna聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構成，每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸(dntp)，並混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸(ddntp)。
由於ddntp缺乏延伸所需要的3-oh基團，使延長的寡聚核苷酸選擇性地在g、a、t或c處終止。終止點由反應中相應的雙脫氧而定。每一種dntps和ddntps的相對濃度可以調整，使反應得到一組長几百至幾千鹼基的鏈終止產物。
它們具有共同的起始點，但終止在不同的的核苷酸上，可通過高解析度變性凝膠電泳分離大小不同的片段，凝膠處理後可用x- 光膠片放射自顯影或非同位素標記進行檢測。
雙脫氧法dna測序的基本原理是什麼
2樓：下限醬
dna測序技術，即測定dna序列的技術。在分子生物學研究中，dna的序列分析是進一步研究和改造目的基因的基礎。目前用於測序的技術主要有sanger等（1977）發明的雙脫氧鏈末端終止法和 maxam和 gilbert（1977）發明的化學降解法。
這二種方法在原理上差異很大，但都是根據核苷酸在某一固定的點開始，隨機在某一個特定的鹼基處終止，產生 a，t，c，g四組不同長度的一系列核苷酸，然後在尿素變性的page膠上電泳進行檢測，從而獲得dna序列。目前 sanger測序法得到了廣泛的應用。
sanger 法測序的原理就是利用一種dna聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構成，每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸(dntp)，並混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸(ddntp)。
由於ddntp缺乏延伸所需要的3-oh基團，使延長的寡聚核苷酸選擇性地在g、a、t或c處終止。終止點由反應中相應的雙脫氧而定。每一種dntps和ddntps的相對濃度可以調整，使反應得到一組長几百至幾千鹼基的鏈終止產物。
它們具有共同的起始點，但終止在不同的的核苷酸上，可通過高解析度變性凝膠電泳分離大小不同的片段，凝膠處理後可用x- 光膠片放射自顯影或非同位素標記進行檢測。
3樓：淡定的思考做事
將四條一樣dna放到四個相同的試管，四（1，2，3，4）個試管原料的組成為：datp、dgtp、dctp、dttp、ddatp；datp、dgtp、dctp、dttp、ddgtp；datp、dgtp、dctp、dttp、ddctp；datp、dgtp、dctp、dttp、ddttp。這樣在1，2，3，4試管中遇到a，g，c,t鹼基就會有繼續或停下兩種可能，所以產生不同的片段。
然後再電泳，根據各個片段的長短，讀出序列。
4樓：紅色の狐狸喵
sanger法測序是酶法測序
如何對某種生物進行全面的基因組學研究？
為什麼sanger測序被稱為dna序列測定"金標準
5樓：匿名使用者
為什麼sanger測序被稱為dna序列測定sanger 法測序的原理就是利用一種dna聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構成，每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸(dntp)，並混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸(ddntp)。
由於ddntp缺乏延伸所需要的3-oh基團，使延長的寡聚核苷酸選擇性地在g、a、t或c處終止。終止點由反應中相應的雙脫氧而定。每一種dntps和ddntps的相對濃度可以調整，使反應得到一組長几百至幾千鹼基的鏈終止產物。
它們具有共同的起始點，但終止在不同的的核苷酸上，可通過高解析度變性凝膠電泳分離大小不同的片段，凝膠處理後可用x- 光膠片放射自顯影或非同位素標記進行檢測。
雙脫氧鏈終止法的原理
6樓：鬱悶的太陽
雙脫氧鏈終止法是現在應用最多的核酸測序技術（也即第一代dna測序技術），由sanger等2023年發明提出。主要用於dna基因分析。其原理是：
核酸模板在核酸聚合酶、引物、四種單脫氧鹼基存在條件下複製或轉錄時，如果在四管反應系統中分別按比例引入四種雙脫氧鹼基，只要雙脫氧鹼基摻入鏈端，該鏈就停止延長，鏈端摻入單脫氧鹼基的片段可繼續延長。
如此每管反應體系中便合成以共同引物為5』端，以雙脫氧鹼基為3』端的一系列長度不等的核酸片段。反應終止後，分四個泳道進行電泳。以分離長短不一的核酸片段（長度相鄰者僅差一個鹼基），根據片段3』端的雙脫氧鹼基，便可依次閱讀合成片段的鹼基排列順序。
sanger雙脫氧鏈終止法（酶法）測序程式 操作程式是按dna複製和rna反轉錄的原理設計的。
1.分離待測核酸模板，模板可以是dna，也可以是rna，可以是雙鏈，也可以是單鏈。
2.在4只試管中加入適當的引物、模板、4種dntp（包括放射性標記的ddntp，例如32p ddntp和dna聚合酶（如以rna為模板，則用反轉錄酶），再在上述4只管中分別加入一種一定濃度的ddntp（雙脫氧核苷酸）。
3.與單鏈模板（如以雙鏈作模板，要作變性處理）結合的引物，在dna聚合酶作用下從5』端向3』端進行延伸反應，32p隨著引物延長摻入到新合成鏈中。當ddntp摻入時，由於它在3』位置沒有羥基，故不與下一個dntp結合，從而使鏈延伸終止。
ddntp在不同位置摻入，因而產生一系列不同長度的新的dna鏈。
4.用變性聚丙烯醯胺凝膠電泳同時分離4只反應管中的反應產物，由於每一反應管中只加一種ddntp（如ddatp），則該管中各種長度的dna都終止於該種鹼基（如a）處。所以凝膠電泳中該泳道不同帶的dna 3』 末端都為同一種雙脫氧鹼基。
5.放射自顯影。根據四泳道的編號和每個泳道中dna帶的位置直接從自顯影圖譜上讀出與模板鏈互補的新鏈序列。
7樓：手機使用者
核酸模板在核酸聚合酶、引物、四種單脫氧鹼基存在條件下複製或轉錄時，如果在四管反應系統中分別按比例引入四種雙脫氧鹼基，只要雙脫氧鹼基摻入鏈端，該鏈就停止延長，鏈端摻入單脫氧鹼基的片段可繼續延長。如此每管反應體系中便合成以共同引物為5』端，以雙脫氧鹼基為3』端的一系列長度不等的核酸片段。反應終止後，分四個泳道進行電泳。
以分離長短不一的核酸片段（長度相鄰者僅差一個鹼基），根據片段3』端的雙脫氧鹼基，便可依次閱讀合成片段的鹼基排列順序。
dna測序技術有哪些？
8樓：北京理工大學出版社
dna的序列分析是進一步研究和改造目的基因的基礎。目前用於測序的技術主要有sanger等（1977）發明的雙脫氧鏈末端終止法與gilbert（1977）發明的化學降解法。這兩種方法在原理上差異很大，但都是根據核苷酸在某一固定的點開始，隨機在某一個特定的鹼基處終止，產生a，t，c，g四組不同長度的一系列核苷酸，然後在尿素變性的page膠上電泳進行檢測，從而獲得dna序列。
目前sanger測序法得到了廣泛的應用。
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