1樓：匿名使用者
根本原因應該是rna純度不夠，導致反轉錄的cdna濃度低。稀釋之後dna與引物結合的機會少了，引物自己結合成二聚體.
多種原因要逐一排除：
1.先用內參基因檢測一下如 β-actin，gapdh，18s-rrna這類基因是生物體或者細胞中穩定表達的基因，表達量幾乎不變，如果有條帶證明反轉錄沒問題。
2.內參檢測時候最好讓別人代為操作，可以排除人為操原因
3.跑pcr時候可以加一個內參做陽性對照，保證cdna質量（反覆凍融會影響cdna質量）
4.適當降低退火溫度2~4℃
5.上述都排除之後就是引物問題了。
pcr試劑除了taq酶要放在-20℃，其他的都不能反覆凍融。建議分裝出來後長期儲存放-20 使用液放4℃ 。
2樓：匿名使用者
確認是引物二聚體？請問有無做空白對照，空白對照的情況又是如何？
3樓：匿名使用者
cdna濃度降低導致引物的濃度相對升高了，引物與模版的結合率降低了，所以引物會出現二聚體。
4樓：我想天下一家親
稀釋後引物與cdna的結合率低了，沒有結合的引物只能以二聚體存在啦
5樓：小小的魚兒
稀釋之後dna與引物結合的機會少了，引物自己結合成二聚體
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