高效液相色譜實驗,如何確定及優化色譜條件

時間 2023-03-19 19:25:02

1樓:匿名使用者

這個問題很大,不是一句兩句就能解決的,因為一個方法的開發與優化是個系統性的工作,應該不斷的嘗試與改進。

就一般情況來說,你想確定合適的液相分析方法,應該首先搞清楚你檢測的物質中都含哪些物質,根據它們的分子式及結構物性,物理化學性質來選擇合適的分析條件。比如是否怕水,有無紫外吸收,分子量大小,極性大小,酸鹼性等因素。從這些情況來判斷你液相檢測的可能條件。

然後,基本以上情況你分別判斷出流動相的pka(酸鹼性),確定了流動相的ph(不確定就選中性),波長,色譜柱,流速,柱溫。一般情況下你可以選擇,乙腈:水,c18柱,25度柱溫,1ml/min流速,以乙腈:

水=90:10執行一針,看出峰情況,主要看最後一個峰是幾分鐘出來,然後再調整流動相比例,優化成所有的峰都能衝洗出來,還能進行分離,同時進行波長掃描,確定合適波長,等等。

最後跟據內、外標或歸一化調整流動相等達到省時,快速檢測、準確等目的。

2樓:左岸居東

在高效液相色譜分析中,分離條件的優化是指在選定的色譜柱上(即柱容量恆定條件下)來實現:

(1)在保證一定分離度的條件下,實現分析速度的最優化。

(2)在保證一定分析時間的條件下,實現難分離物質對分離度的最優化。

在色譜分析中,分離度、分析速度和柱容量三者之間的關係,呈現幻想的三角形,即其中任一因素都要受到另外兩個因素的制約,因此至今也未曾找到高分離度、高柱容量和快速分析三者同時存在的色譜分析系統。在任何情況下,色譜分析都只能沿三角形中的一個邊,去實現最佳引數的選擇,即越要在一個方向上實現最佳化,則在另外兩個引數上的損失也越大。

3樓:講凱樂筆王資葩

我公司可以提供食品防腐劑的一些圖譜和色譜條件供參考,如需要更多參考圖譜和色譜條件,請提供所需檢測的防腐劑種類到。

4樓:化工儀器網論壇

建議你去專業論壇提問吧!我的id就是,你下去找找看。

高效液相色譜法對測試樣品有什麼要求

5樓:匿名使用者

如果高效液相色譜儀的檢測器是紫外檢測器的話,首先要保證樣品具有紫外吸收,如內果沒有紫外吸收的。

容話可選擇熒光檢測器、蒸發光檢測器等等,總而言之需要你的樣品主成分在檢測器上有響應訊號。

樣品在進行檢測前還要配製成一定濃度的溶液(配製溶液的時候需根據樣品的溶解度情況選擇合適的溶劑,為了減小溶劑峰,通常使用流動相作為溶劑,樣品溶液的濃度一般配製成10ug/ml左右的就可以),如果樣品溶解很好且沒有其他雜質,可直接吸取樣品溶液進樣,如果樣品中還有其他成分,比如測定口服藥物製劑中某成分的含量,往往口服藥物製劑中有其他輔料,樣品溶液在進樣前還要進行一下過濾(通常採用或的針頭式過濾器)。

高效液相色譜法研究分析方法學有哪些

6樓:匿名使用者

你記住四大點8小點就可以了,樓上的兄弟說的是八個小點,還有四個大點,去看看分析化學書。

色譜柱 流動相 梯度 波長。

高效液相色譜有幾種定量方法,其中哪種是比較精確的定量方法?

7樓:覀覀覀瓜瓜瓜

峰面積法、峰高法、歸一法、外標法。峰面積法是比較精確的定量方法。

簡介:高效液相色譜法(highperformanceliquidchromatography\hplc)又稱「高壓液相色譜」、「高速液相色譜」、「高分離度液相色譜」、「近代柱色譜」等。它是在生化和分析化學中常用的柱層析儀。

高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,採用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離後,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。該方法有效方便快捷地解決化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中得出想要的資料,成為重要的分離分析技術。

高效液相色譜有幾種定量方法?其中那種是比較精確的定量方法?並簡述?

如何使用液相色譜,高效液相色譜使用步驟

色譜法的最早應用是用於分離植物色素,其方法是這樣的 在一玻璃管中放入碳酸鈣,將含有植物色素 植物葉的提取液 的石油醚倒入管中。此時,玻璃管的上端立即出現幾種顏色的混合譜帶。然後用純石油醚沖洗,隨著石油醚的加入,譜帶不斷地向下移動,並逐漸分開成幾個不同顏色的譜帶,繼續沖洗就可分別接得各種顏色的色素,並...

什麼是高效液相色譜的速率理論,高效液相色譜 rrt 什麼意思

速率理論 又稱隨機模型理論 1 液相色譜速率方程 1956年荷蘭學者van deemter等人吸收了塔板理論的概念,並把影響塔板高度的動力學因素結合起來,提出了色譜過程的動力學理論 速率理論。它把色譜過程看作一個動態非平衡過程,研究過程中的動力學因素對峰展寬 即柱效 的影響。後來giddings和s...

反相高效液相色譜的固定相是什麼,流動相有什麼什麼

禾鳥 反相高效液相色譜的固定相是非極性溶劑,常見的固定相是十八烷基鍵合矽膠,流動相是極性溶劑,常見的流動相是甲醇,乙腈。反相高效液相色譜是由非極性固定相和極性流動相所組成的液相色譜體系,它正好與由極性固定相和弱極性流動相所組成的液相色譜體系 正相色譜 相反。rp hplc的典型的固定相是十八烷基鍵合...