維持蛋白質溶液穩定的因素有哪些

1樓：雨說情感

蛋白質溶液穩定的主要因素是蛋白質分子表面帶有水化膜。

維持蛋白質溶液穩定的因素是水化膜和同種電荷。由於蛋白質的表面有很多親水基團，會吸引很多的水分子，形成水化膜，使蛋白質顆粒不容易聚集起來，另一方面蛋白質分子在一定的ph值溶液中往往帶有同種電荷而相互排除，因此，蛋白質溶液是穩定的親水膠體。

根據蛋白質膠體穩定性原理，可以通過破壞這兩個主要穩定因素，使蛋白質分子間的引力增加聚集沉澱。如鹽析法、有機溶劑沉澱法。

如果加人適當的試劑使蛋白質分子處於等電點狀態或失去水化層，蛋白質的膠體溶液就不再穩定並將產生沉澱。蛋白質溶液可因下列試劑的加入而發生蛋白質沉澱。

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根據蛋白質溶解度不同的分離方法

1、鹽析法

蛋白質具有膠體性質，維持膠體穩定的因素是蛋白質顆粒的表面電荷層和水化膜，鹽析法就是將硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等中性鹽加入蛋白質溶液，使蛋白質表面電荷被中和，水化膜被破壞，導致蛋白質在水溶液中的穩定性因素去除而沉澱。

鹽析時若溶液 ph 在蛋白質等電點處效果更好（蛋白質在等電狀態時顆粒之間靜電斥力最小，溶解度也最小）。

因各種蛋白質分子顆粒大小、親水程度不同，故鹽析所需的鹽濃度不同，調節混合蛋白質中的中性鹽濃度可使各種蛋白質分段沉澱。

2、低溫有機溶劑沉澱法

與水可混溶的有機溶劑（丙酮、乙醇等）可使多數蛋白質溶解度降低並析出。

2樓：無語翹楚

維持蛋白溶液的穩定,本質上來說就是維持蛋白質的穩定

阻止或抑制蛋白質的變性,失活,酶解,聚集,水解是關鍵

有一些方法給你參考

一,新增蛋白質穩定劑

1,糖類、多元醇、氨基酸及其衍生物、無機鹽、甘油、多聚物如peg系列等作為蛋白質的共溶劑,可以有效的穩定你的蛋白溶液.

2,bsa由於穩定性和溶解性好,常常被用作蛋白質的穩定劑.

3,新增抗氧化劑或還原劑比如edta,dtt也可以有效的穩定蛋白溶液.

4,新增蛋白酶抑制劑（pmsf）也有類似作用,但需要注意pmsf自身會水解,所以它的有效期比較短.

二,優化環境條件

1,保持溫和的ph環境,極端ph環境是蛋白質變性的主要原因.保持ph6-ph8的緩衝溶液有助於穩定蛋白溶液,但需注意蛋白質等電點（pi值）需要遠離所處緩衝液ph值.

2,穩定的溫度條件,絕大多數蛋白溶液（除去一些熱穩定的蛋白）在較高的溫度下,比如超過室溫的溫度,即變得非常不穩定.如果需要長時間儲存蛋白溶液,最好放在-20°到-80°.這樣蛋白質自身水解或降解即被最大程度抑制.

應注意蛋白溶液的避光尤其是避免日光的直接照射.光氧化會造成蛋白質的變性或失活.強烈的紫外光和離子輻射都會導致鍵的斷裂和蛋白質活性的喪失.

3,避免微生物汙染,需注意蛋白溶液的密封性,以抑制微生物尤其是細菌的生長.