1樓:匿名使用者
1,糖類、多元醇、氨基酸及其衍生物、無機鹽、甘油、多聚物如peg系列等作為蛋白質的共溶劑,可以有效的穩定你的蛋白溶液。
2,bsa由於穩定性和溶解性好,常常被用作蛋白質的穩定劑。
3,新增抗氧化劑或還原劑比如edta,dtt也可以有效的穩定蛋白溶液。
4,新增蛋白酶抑制劑(pmsf)也有類似作用,但需要注意pmsf自身會水解,所以它的有效期比較短。
5,保持溫和的ph環境,極端ph環境是蛋白質變性的主要原因。保持ph6-ph8的緩衝溶液有助於穩定蛋白溶液,但需注意蛋白質等電點(pi值)需要遠離所處緩衝液ph值。
6,穩定的溫度條件,絕大多數蛋白溶液(除去一些熱穩定的蛋白)在較高的溫度下,比如超過室溫的溫度,即變得非常不穩定。如果需要長時間儲存蛋白溶液,最好放在-20°到-80°。這樣蛋白質自身水解或降解即被最大程度抑制。
應注意蛋白溶液的避光尤其是避免日光的直接照射。光氧化會造成蛋白質的變性或失活。強烈的紫外光和離子輻射都會導致鍵的斷裂和蛋白質活性的喪失。
7,避免微生物汙染,需注意蛋白溶液的密封性,以抑制微生物尤其是細菌的生長。
2樓:
溫度溫度高,會發生變性
維持蛋白質溶液穩定的因素有哪些
3樓:雨說情感
蛋白質溶液穩定的主要因素是蛋白質分子表面帶有水化膜。
維持蛋白質溶液穩定的因素是水化膜和同種電荷。由於蛋白質的表面有很多親水基團,會吸引很多的水分子,形成水化膜,使蛋白質顆粒不容易聚集起來,另一方面蛋白質分子在一定的ph值溶液中往往帶有同種電荷而相互排除,因此,蛋白質溶液是穩定的親水膠體。
根據蛋白質膠體穩定性原理,可以通過破壞這兩個主要穩定因素,使蛋白質分子間的引力增加聚集沉澱。如鹽析法、有機溶劑沉澱法。
如果加人適當的試劑使蛋白質分子處於等電點狀態或失去水化層,蛋白質的膠體溶液就不再穩定並將產生沉澱。蛋白質溶液可因下列試劑的加入而發生蛋白質沉澱。
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根據蛋白質溶解度不同的分離方法
1、鹽析法
蛋白質具有膠體性質,維持膠體穩定的因素是蛋白質顆粒的表面電荷層和水化膜,鹽析法就是將硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等中性鹽加入蛋白質溶液,使蛋白質表面電荷被中和,水化膜被破壞,導致蛋白質在水溶液中的穩定性因素去除而沉澱。
鹽析時若溶液 ph 在蛋白質等電點處效果更好(蛋白質在等電狀態時顆粒之間靜電斥力最小,溶解度也最小)。
因各種蛋白質分子顆粒大小、親水程度不同,故鹽析所需的鹽濃度不同,調節混合蛋白質中的中性鹽濃度可使各種蛋白質分段沉澱。
2、低溫有機溶劑沉澱法
與水可混溶的有機溶劑(丙酮、乙醇等)可使多數蛋白質溶解度降低並析出。
4樓:無語翹楚
維持蛋白溶液的穩定,本質上來說就是維持蛋白質的穩定
阻止或抑制蛋白質的變性,失活,酶解,聚集,水解是關鍵
有一些方法給你參考
一,新增蛋白質穩定劑
1,糖類、多元醇、氨基酸及其衍生物、無機鹽、甘油、多聚物如peg系列等作為蛋白質的共溶劑,可以有效的穩定你的蛋白溶液.
2,bsa由於穩定性和溶解性好,常常被用作蛋白質的穩定劑.
3,新增抗氧化劑或還原劑比如edta,dtt也可以有效的穩定蛋白溶液.
4,新增蛋白酶抑制劑(pmsf)也有類似作用,但需要注意pmsf自身會水解,所以它的有效期比較短.
二,優化環境條件
1,保持溫和的ph環境,極端ph環境是蛋白質變性的主要原因.保持ph6-ph8的緩衝溶液有助於穩定蛋白溶液,但需注意蛋白質等電點(pi值)需要遠離所處緩衝液ph值.
2,穩定的溫度條件,絕大多數蛋白溶液(除去一些熱穩定的蛋白)在較高的溫度下,比如超過室溫的溫度,即變得非常不穩定.如果需要長時間儲存蛋白溶液,最好放在-20°到-80°.這樣蛋白質自身水解或降解即被最大程度抑制.
應注意蛋白溶液的避光尤其是避免日光的直接照射.光氧化會造成蛋白質的變性或失活.強烈的紫外光和離子輻射都會導致鍵的斷裂和蛋白質活性的喪失.
3,避免微生物汙染,需注意蛋白溶液的密封性,以抑制微生物尤其是細菌的生長.
影響蛋白質穩定的因素有哪些?
5樓:匿名使用者
主要有以下幾方面的因素
溫度:除一些特殊的嗜熱蛋白,絕大多數蛋白質在低溫時更容易保持穩定。故長期儲存蛋白質需要超低溫(-80度)凍存,或者液氮抽濾成凍乾粉。
ph:過酸或者過鹼的ph環境容易導致蛋白質變性沉澱,而過於接近蛋白質等電點的ph環境也容易造成蛋白質不穩定。
鹽濃度:不同的蛋白質有不同的親疏水性,也就是說有些蛋白質在較低的鹽濃度時比較穩定,有些則相反。
化學試劑:一些化學試劑如重金屬鹽、尿素、乙醇、鹽酸胍等等會破壞蛋白質結構,造成蛋白質不穩定。
物理因素:劇烈攪拌或者**形成的剪下力,加壓造成的內部肽鍵斷裂都會造成蛋白質的不穩定。
紫外線等:應注意蛋白溶液的避光尤其是避免日光的直接照射。光氧化會造成蛋白質的變性或失活。強烈的紫外光和離子輻射都會導致鍵的斷裂影響蛋白質的穩定性。
微生物汙染:空氣中的微生物因為蛋白溶液有較高的營養而更容易生長繁殖,故需注意蛋白溶液的密封性,以抑制微生物尤其是細菌的生長。
維持蛋白質膠體溶液穩定性的因素有哪些
6樓:我來跟你談談情
蛋白質溶液膠體系統的穩定性依賴於以下兩個基本因素:
(1)蛋白質表面形成水化層 由於蛋白質顆粒表面帶有許多如一nh3+;、一coo-、一oh、一sh、一co一nh,肽鍵等親水的極性基團,因而易於發生水合作用(hydration),進而使蛋白質顆粒表面形成一層較厚的水化層。水化層的存在使蛋白質顆粒相互隔開,使蛋白質顆粒不致聚集而沉澱。每1g蛋白質結合水0.3~0.5g。
(2)蛋白質表面具有同性電荷 蛋白質溶液除在等電點時分子的淨電荷為零外,在非等電點狀態時,蛋白質顆粒皆帶有同性電荷,即在酸性溶液中帶正電荷,在鹼性溶液中帶負電荷,與其周圍的反離子構成穩定的雙電層。蛋白質膠體分子間表面雙電層的同性電荷相互排斥,進而阻止其聚集而沉澱。
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膠體分散系統的穩定性主要取決於水化作用與膠粒的電荷二因素,現將親水膠和疏水膠的穩定性分別討論如下:
1、親水膠體的穩定性
主要靠其強的溶劑化作用與膠粒的水化層。由於膠粒周圍的水化層阻礙了粒子的相互聚結,水化層越厚,穩定性越大。因此,凡能破壞膠粒水化層的因素,均能引起親水膠體的不穩定。
如在親水膠體中新增少量電解質時,不會因相反電荷的離子作用而引起凝結。
一旦水化層被除去,形成了疏水膠粒後,則很容易發生凝結面析出沉澱。例如阿拉伯膠、瓊脂等膠液中新增乙醇脫水後,膠粒失去水化層,遇陽離子即發生凝結。
同樣,若在親水膠體中加入大量電解質,由於電解質離子本身具強烈的水化性質,加入後,脫掉了膠粒的水化層,也必引起凝結與沉澱。此作用稱為鹽析。
在親水膠體中加入大量乙醇、丙酮、糖漿等脫水劑,亦可使溶劑化了的膠粒水化層破壞,脫水而析出。或者雖未析出,但對電解質的敏感性增加而更易鹽析。
親水膠體若久經光、熱、空氣等影響而發生化學變化,其變化產物又具有較小的溶解度時,也會出現凝結現象。如在膠體溶液中加入不相混合的液體後通電,或猛烈振搖,或煮沸、冰凍時,均能產生部分或全部膠粒的凝結。紫外線與x射線亦能使膠液對電解質敏感。
2、疏水膠體的穩定性
由於其膠粒不能水化而主要靠粒子表面帶相同電荷,互相排斥才免於凝結而得穩定。但疏水膠粒只有在構成吸附層的吸附離子和部分異性離子存在時才能帶電而具一定程度穩定性。若將疏液膠體(一般指溶膠)中少量電解質用透析法除去,膠粒失去電荷,膠體就產生凝結而沉澱。
因此,膠體中必須有少量電解質的存在作穩定劑,其正負電荷組成膠粒的雙電層結構,使疏水膠粒帶一定量電荷而達到一定程度的穩定作用。
電解質的加入量必須適當,若加入過多,隨著外加離子濃度的增加,可將原來分佈在擴散層中的異性離子擠到吸附層中,使其離予吸附層較遠的擴散層中異性離子向吸附層靠近,使擴散層逐漸變薄,降低了起穩定作用的電位。當電位降至臨界值下,膠粒發生凝結。可見溶膠對電解質是敏感的。
7樓:匿名使用者
維持蛋白質膠體穩定的因素有三個:蛋白質分子的大小、蛋白質所帶電荷的性質和水化作用。蛋白質在水溶液中和親水膠體相似,其分子表面形成水化層和雙電層,因此形成穩定的膠體顆粒。
8樓:當年雲霧裡
維持蛋白質膠體溶液穩定性的兩個因素是 水化膜結構和帶同種電荷
9樓:匿名使用者
1.蛋白質分子水分子之間的水化作用
2.蛋白質分子之間的靜電相互作用
蛋白質溶液不沉澱的兩個穩定因素是
10樓:仵英卓烏婀
維持蛋白質膠體溶液穩定性的兩個因素是
水化膜結構和帶同種電荷
影響蛋白質結構穩定的因素有哪些
11樓:匿名使用者
溫度過高可以破壞蛋白質結構,溫度過低,暫時失活,溫度正常後又有活性。酸鹼度在7.25至7.45範圍內。最主要是溫度影響
維持蛋白質溶液穩定的因素有哪些
雨說情感 蛋白質溶液穩定的主要因素是蛋白質分子表面帶有水化膜。維持蛋白質溶液穩定的因素是水化膜和同種電荷。由於蛋白質的表面有很多親水基團,會吸引很多的水分子,形成水化膜,使蛋白質顆粒不容易聚集起來,另一方面蛋白質分子在一定的ph值溶液中往往帶有同種電荷而相互排除,因此,蛋白質溶液是穩定的親水膠體。根...
論述影響蛋白質變性的因素有哪些,引起蛋白質變性的因素有哪些
文化永生 變性作用是蛋白質受物理或化學因素的影響,改變其分子內部結構和性質的作用。一般認為蛋白質的二級結構和 結構有了改變或遭到破壞,都是變性的結果。能使蛋白質變性的化學方法有加強酸 強鹼 重金屬鹽 尿素 丙酮等 能使蛋白質變性的物理方法有加熱 高溫 紫外線及x射線照射 超聲波 劇烈振盪或攪拌等。 ...
蛋白質該如何補充,怎樣補充蛋白質?
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