高效液相色譜的梯度洗脫實驗具體操作如何?在工作站上如何設定引數?

時間 2025-04-09 09:35:33

1樓:晉玉花春嬋

你說的倆流動相分別為15%和60%我不太瞭解,我暫時以我的方法來描述一下,比如說a相是100%乙腈。b是水。

在引數設定欄裡找到平時用的等梯度洗脫,有個下拉箭頭,選擇另乙個選項,就是雙幫浦洗脫模式。

然後下面有選擇a幫浦b幫浦分別是多少的,這是初始狀態下的流動相比例,比如開始是a相15%你就填上a

同時b就是85%

因為總量一定是100%的,這時候流動相就相當於15%的乙腈。

然後在標籤上找到時間程式設定,下面有個**,最左邊是時間,橫向第二格是控制欄,選擇pump也就是幫浦,你可以選擇pumpa或者pumpb,然後第三格就是選擇pumpa的流動相比例,你可以自己填寫需要多少比例。

比如:時間。

幫浦選擇。流動相比例。

pumpapumpa

eventstop

這就是說a幫浦的流動相比例從開始到10分鐘從15%勻速增長為60%

在時間。操作完成。具體命令好像是這個,我有點記不清了。

設定完成後要在後面選擇載入曲線按鈕,並且儲存方法,然後再開始。

2樓:色譜世界

不同的工作站的設定和操作方式是不一樣的。一般而言都是在色譜條件欄目中設定的。也有的有專門的梯度設定選單。色譜問題建議你到「生化色譜網」去看看。那裡非常專業。

3樓:楓葉寒秋雪

你要告訴我們你用的是哪個液相的工作站吧,這樣方便我們告訴你在**設定,一般都是在液相條件裡設定的。

高效液相色譜檢測條件中梯度洗脫在**中要怎麼表示

4樓:

摘要。梯度洗脫(gradient elution)又稱為梯度淋洗或程式洗脫。在同乙個分析週期中,按一定程度不斷改變流動相的濃度配比,稱為梯度洗脫。

梯度洗脫(gradient elution)又稱為梯度淋洗爛羨或程式洗脫。在同乙個分析週期中,按一飢念拍定程度不斷高簡改變流動相的濃度配比,稱為梯度洗脫。

梯度洗脫的原理:流動相由幾種不同極性的溶劑組成,通過改變流動相中各溶劑組成的比例改變流動相的極性,使每個流出的組分都有合適的容量因子k,並使樣品種的所有組分可在最短時間內實現最佳分離。梯度洗脫首碰信特點:

提高柱效,改善檢測器的靈敏度。當樣品中的乙個峰的k值和者輪最後乙個峰的k值相差幾十倍至幾百倍時,使用梯度洗脫效果特別好。梯度洗脫中為保證吵迅流速的穩定,必須使用恆流幫浦,否則難獲重複結果。

梯度洗脫常用乙個弱極性的溶劑a和乙個強極性的溶劑b.如:在60min內,流動相配比從甲醇:

水=1:99到甲醇:水=100:

0梯度洗脫(gradient elution)又稱為梯度淋洗或程式洗脫。在氣相色譜中,為了改善橡族對寬沸程樣品的分離和縮短分析週期,廣泛採用程式公升溫的方法。而在液相色譜中則採用梯度洗梁腔弊脫的方法。

在同乙個分析週期中,按一定程度不斷改變流動相的濃度配比,稱為梯度洗脫。從而可以使乙個複雜樣品中的性質差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的圓局。

就是那個梯度在**寫作中要怎麼表示。

就是生活中常說的樓梯的臺階,有些樓梯兩個臺階之間族鋒世的高度差比較大,我們就基絕說其梯度大;反之就其梯度小。在兆肢志願填報中的梯度只表示兩個或幾個院校之間錄取線差值的大小。考生地選報志願時要注意使院校與專業之間形成合理的梯度,以免造成滑檔、進檔退檔或死檔的風險。

高效液相的梯度洗脫條件,在**寫作中,它的格式是什麼樣的。

梯度洗脫還是乙個實驗性的過程,主要靠的察旦隱還是經驗,這裡有一敗廳篇論遲高文寫的非常清楚,看了這後應該比較有收穫參考資料。

問一問自定義訊息】

高效液相色譜梯度洗脫流動相設定

5樓:千葉雅之

一、這個具體還要看你的儀器型別。 15c好像是單幫浦。如果是這樣就不可能進行梯度洗脫。

簡單地說就是乙個通道。不可能設定梯度。當然了,如果是低壓二元幫浦,或者是雙幫浦的話就可以。

在梯度洗脫的地方設定:

比如,流速是。a b

調整梯度的時候。

時間 單元。

pump flow

pump 90

pump 50

pump 50

二、工具按鈕,這個太多……沒辦法一一解釋。如果你是中文版,你把滑鼠移到按鈕上,上面就會顯示功能的。

大約是這個吧:

另外關於批處理的問題。那個和梯度沒有關係好不好?批處理乙個是用來跑序列的,乙個是用來處理圖譜的。

如果你們有自動進樣器,那麼就可以批處理執行序列。其中有幾個引數必須要寫:

樣品瓶,就是瓶號。

樣品架,架子一般是由兩個。有的有乙個。

方法:執行的方法。比如你的是序列方法。

資料檔案:圖譜儲存的路徑和檔案的名字。

進樣體積:一針扎多少?20ul還是10ul

其他的樣品的id或者名稱都是可寫可不寫的。

三、液相也不是島津一家獨大。基本上是島津、安捷倫和waters並列。島津勝在價效比。

不過安捷倫的國際認可性比島津好很多。島津可以改圖,安捷倫不可以。所以國外的科研機構、國內的國家企業大多用安捷倫。

網上也有電子版的。細節的東西都是從那上面可以學到的。

液相梯度洗脫設定問題

6樓:注音臺

設定多出來的分鐘是轉換流動相比例,其實分鐘是不夠的。

高效液相色譜儀的最基本元件和梯度洗脫的含義,種類是什麼?

7樓:網友

高效液相色譜儀的最基本元件:1、幫浦 2、檢測器 3、進樣閥 4、色譜柱。

梯度洗脫的含義通俗的回講,就是講待答測樣品中過早出峰的物質延遲保留時間,過晚出峰的物質提前保留時間,比如有個混合物,組分1在分鐘的時候出峰,而組分2卻在50多分鐘出峰,這時候就可以使用梯度,將組分1的出峰時間延後,組分2的出峰時間提前,當然梯度洗脫對於雜質分析來說絕不是這麼簡單的問題。種類有高壓梯度(島津的儀器常用)低壓梯度(安捷倫常用)

8樓:網友

基本元件是幫浦、色譜柱、檢測器。

梯度洗脫是說:由不同的幫浦將不同比例的溶劑輸送到色譜系統中,這個比例是可調的,叫梯度,比例是單一的,就叫等度。

在高效液相色譜中梯度洗脫裝置的作用是什麼

9樓:飛實濮嫣

梯度洗脫裝置分兩種:

高壓梯度:用兩臺高壓輸液幫浦將兩種溶劑輸入。

低壓梯度:在常壓下將兩種溶劑(或多元溶劑)混合,然後用高壓輸液幫浦將流動相輸入到色譜柱中。

梯度洗脫可提高分離度、縮短分離時間、降低最小檢測量和提高分離精度。

但在使用中,梯度洗脫也有許多與等度洗脫不同的地方需要注意。

梯度洗脫時應注意:

1、注意各溶劑間的互溶性。

2、對溶劑的純度要求更高(影響重現性)。

3、注意梯度變化時系統壓力的變化,防止超出限度。

4、梯度結束後,用初始流動相沖洗,使柱子平衡一段時間(再生),使系統回覆到初始狀態。(梯度週期)

5、低壓梯度要注意脫氣,混合後容易產生氣泡。

6、容易出現鬼峰,應作空白試驗。

7、梯度選擇時儘量幾相之間相變化要小,否則不易平衡。

8、梯度洗脫應使用對流動相組成變化不敏感的選擇性檢測器(如紫外吸收檢測器或螢光檢測器),而不能使用對流動相組成變化敏感的通用型檢測器(如示差折光檢測器)。

9、要注意水相中鹽的濃度,防止在有機相提公升過程中鹽的析出。

液相梯度洗脫設定問題

10樓:玉鶴軒蔚飛

呵呵。你說能看明白。你舉這個例子不是特別的恰當了。我給我舉個例子,希望能幫助你。時間。a

b這個例子能說明你的問題,前面0-10分鐘採用的梯度是等比例的把a80%和b20%變換成a10%和b90%,而當10分鐘時,已經變換成了a10%和b90%,這只是梯度變換成了這個比例,實際上,因為液相色譜的死時間問題,在柱子中的比例還沒到這樣的比例,再就是現在這個比例應枝渣該是有機相猛告悄最多的時候,這時會把一些難於洗脫的物質洗脫出來,一般還需要幾分鐘的時間吧,然後過了四分鐘,覺得洗脫完全了,就在分鐘立即把梯度換成了a80%和b20%,接下來其實現在已經不在分析樣品了,是在平衡系統了。在實際執行中,我做的這個梯度只有14分鐘再加上大約2分鐘的死時間,也就是說大約16分鐘的時間是整友頌個樣品中的譜圖正常時間,16分鐘之後不可能再有峰出來了,如果有峰說明方法梯度設定有問題了。

而你上面的梯度其實是個等度,設定這個梯度沒意義,可以都刪除,直接在ab幫浦上設定就行了。

高效液相色譜實驗,如何確定及優化色譜條件

這個問題很大,不是一句兩句就能解決的,因為一個方法的開發與優化是個系統性的工作,應該不斷的嘗試與改進。就一般情況來說,你想確定合適的液相分析方法,應該首先搞清楚你檢測的物質中都含哪些物質,根據它們的分子式及結構物性,物理化學性質來選擇合適的分析條件。比如是否怕水,有無紫外吸收,分子量大小,極性大小,...

什麼是高效液相色譜的速率理論,高效液相色譜 rrt 什麼意思

速率理論 又稱隨機模型理論 1 液相色譜速率方程 1956年荷蘭學者van deemter等人吸收了塔板理論的概念,並把影響塔板高度的動力學因素結合起來,提出了色譜過程的動力學理論 速率理論。它把色譜過程看作一個動態非平衡過程,研究過程中的動力學因素對峰展寬 即柱效 的影響。後來giddings和s...

如何使用液相色譜,高效液相色譜使用步驟

色譜法的最早應用是用於分離植物色素,其方法是這樣的 在一玻璃管中放入碳酸鈣,將含有植物色素 植物葉的提取液 的石油醚倒入管中。此時,玻璃管的上端立即出現幾種顏色的混合譜帶。然後用純石油醚沖洗,隨著石油醚的加入,譜帶不斷地向下移動,並逐漸分開成幾個不同顏色的譜帶,繼續沖洗就可分別接得各種顏色的色素,並...