1樓：匿名使用者
血清/血漿dna提取試劑盒濃度跟樣本量、洗脫體積有關，一般來說用qiagen、biog方法得率都差不多，50微升洗脫體積可以用qbit測到5-20ng/ul的讀數，濃度稍低也沒關係，關鍵還是看pcr檢測結果，畢竟濃度太低測到的讀書也沒有參考意義，還是要以pcr檢測結果為準。
2樓：名傑**
要看你做什麼用途了，血漿中的遊離dna本身就很少的，我用過天根和杭州昊鑫生物這兩家的血漿遊離dna提取試劑盒，總的來說，兩家的效能，杭州昊鑫生物的純度和提取量要略好一點，後續檢測的pcr結果也好一點，ct值比天根的要早3個迴圈左右，而且，杭州昊鑫生物的試劑盒提取耗時短，比較適合樣本多的使用者。
3樓：匿名使用者
血液遊離dna（又稱血液迴圈dna）是指血液中游離於細胞外的dna，其**主要有三：白細胞崩解釋放的dna、壞死組織特別是腫瘤組織釋放入血液的dna和感染病毒、細菌的dna。近幾年來，隨著基因診斷技術的發展，遊離核酸的應用價值越來越大，如優生篩查、腫瘤早期診斷、遺傳病檢測和病原體感染基因檢測等。
但血液中游離dna含量一般較低，片段較小，不易提取，這大大影響了遊離核酸的基因檢測和各種研究的開展。
遊離dna提取方法一般有trizol方法、離心柱法、磁珠法。其中，trizol方法與離心柱相比，提取效果相當，但是因其對操作者帶來的毒性，現在越來越被棄用。磁珠法比較適合機器自動化提取，如果沒有核酸提取儀，只是使用磁力架配套提取，磁珠法的操作就比較麻煩且容易導致樣本交叉汙染。
另外，根據研究，磁珠法的核酸提取得率不如離心柱法。如果要提取的遊離核酸的量比較低，最好選擇離心柱法。對於遊離dna含量較低的樣本或比較珍貴的樣本或樣本總數不是很多的實驗室，首選的核酸提取方法應是離心柱法。
離心柱法遊離dna提取原理主要是樣本裂解後，dna在高鹽條件下與矽膠膜結合，再在低鹽、高ph值時將dna從矽膠膜上洗脫下來。面對各種品牌的離心柱法提取試劑盒，哪種才是最適合的呢？目前國內常用的離心柱法遊離dna提取試劑盒有國內品牌biog、國際品牌q、國內品牌t等。
我們以下就幾種遊離dna提取試劑盒進行比較。
一、有較高的提取得率。核酸提取得率的確定，常用的是使用紫外分光光度計的方法。但是，血清、血漿樣本中游離核酸含量較低，如果直接用紫外法檢測，得出的數值並不準確，而且多次測量的結果會變異很大。
關於提取得率，qiagen的研究資料是1ml正常血漿樣本cfdna得為7.35ng左右，但如果白細胞大量凋亡，血漿中的遊離dna量會有所增加，腫瘤病人血漿中的dna會大幅增加。有些研究者提取血漿核酸後習慣於先用紫外檢測濃度，發現紫外檢測不出來或濃度很低時便認為提取失敗，放棄後面進一步的實驗，其實並不可取。
我們可以把紫外讀數作為參考，但是不能作為判斷得率的唯一標準，最好還是要做個pcr或熒光定量。根據qiagen公司的實驗，血清血漿的量與提取的核酸量成正比。因而，如果要提高核酸得率，可通過增加血清或血漿的量來實現。
一般地，做血漿或血清核酸提取，樣本量最好在1ml以上。如果1ml或更大量樣本得不到滿意的檢測結果，則應及時考慮更換提取試劑盒。目前國內常用的血漿核酸提取試劑有國際品牌q、國內品牌t、國產品牌biog等，我們實驗室使用下來，biog的核酸提取得率較高，1ml肺癌病人血漿樣本dna得率在85ng左右，q的得率在72ng左右，t的得率在63ng左右，基本上都能滿足下游pcr實驗的需求。
當然，如此低的濃度直接測od值不太容易，如果使用nanodrop2000c，其檢測下限為2ng/ul。如洗脫液為30ul，則需要1ml左右的血漿才能檢測出來。顯然，如果是健康人的血漿，1ml血漿的dna濃度更低，紫外可能根本就檢測不出來。
因而，血漿dna提取完成以後，最好直接做pcr，紫外檢測的意義不大。
二、提取的核酸純度高。核酸純度一般根據od260/od280比值來判斷。一般說來，試劑盒提取的dna 其od260/od280比值應在1.
6--1.8之間。如果提取的dna溶液od260/od280比值小於1.
6，通常說明有蛋白質或酚、多糖等的汙染。如果提取的dna溶液od260/od280>1.9,則表明有rna汙染。
使用q公司血漿dna提取試劑盒提取的血漿dna, od260/od280一般在1.7-1.9之間；使用biog血漿遊離dna提取試劑盒提取的血漿dna, od260/od280一般在1.
6-1.9之間，使用t公司血漿dna提取試劑盒提取的血漿dna od260/od280比值也在1.6-1.
9之間。q公司提取dna的純度似乎優於國產試劑，但我們提取的dna是用於pcr檢測，結果並無明顯影響。可能因為b公司血漿遊離dna提取試劑盒提取的血漿dna量得率較高的原因，同樣的dna加樣體積（2ul），biog試劑盒提取的dna 熒光定量pcr檢測結果ct值要小於q公司試劑盒提取的dna。
三、操作簡便性。操作簡便性也是血漿dna提取試劑選擇的一個重要因素。操作過於複雜，不僅費時費力，還容易導致樣本間的交叉汙染，也容易損失樣本。
特別是用於臨床檢測或樣本較多情況下的檢測，操作複雜如果導致交叉汙染會引起誤診，還會影響出檢測報告的時間。因而，選用操作簡便、流暢的提取試劑盒非常重要。就我們曾經用過的以上三種提取試劑盒來說，q公司的血漿dna提取試劑盒提取過程大約30min，從樣本處理開始需要個10步驟；t公司血清/血漿遊離dna提取試劑盒整個提取過程需要約40min，從樣本開始處理10個步驟；b公司的biog血漿遊離dna提取試劑盒提取過程大約25min，從樣本開始處理8個步驟，b公司的血漿遊離dna提取試劑盒在操作簡便性上具有一定優勢，更適合於較多樣本的檢測。
據瞭解，該產品已通過藥監局備案，也更適合臨床樣本的檢測。
綜合看來，與國外知名品牌相比，國產試劑盒在血漿dna提取純度上稍有不足，但在提取得率和操作簡便性上基本沒有區別，有些品牌還略有優勢，可根據實驗需求進行選擇。對純度要求較高的實驗，可選擇q等國外知名品牌，如果對提取量要求較高或提取後主要進行pcr或分子雜交之類的實驗，可考慮選擇biog等國產品牌。
我們院裡要進質粒提取試劑盒？求助
常規的使用小提試劑盒提取得到的質粒，並不適合用來轉染細胞，其原因在於 1.小提質粒濃度較低，一般僅為0.1 0.2ug ul。而用質粒轉染細胞，一般至少需要2 5ug左右，如果使用小提質粒，只能加大上樣量，這樣對轉染操作會有一定影響。2.小提質粒純度不夠，且內毒素含量較高，會對目的細胞有一定毒性，影...
植物DNA提取的原理和方法是什麼
原理就是去掉植物細胞壁 細胞膜 質體 線粒體 葉綠體 剩下細胞核了。就是dna了。通常採用機械研磨的方法破碎植物的組織和細胞，由於植物細胞勻漿含有多種酶類 尤其是氧化酶類 對dna的抽提產生不利的影響，在抽提緩衝液中需加入抗氧化劑或強還原劑 如巰基乙醇 以降低這些酶類的活性。在液氮中研磨，材料易於破...
做穩定轉染選擇何種質粒提取試劑盒
博凌科為解答 您的情況我們去年也曾遇到過。目前市面上的質粒提取試劑盒林林總總，令人難以取捨。我覺得首先應該根據自己的需要來選取。進口的試劑盒，比如 qiagene，omiga，promega等固然好，但是 較貴，如果自己的實驗要求不是很高的話，用這些試劑盒感覺有浪費的嫌疑 當然經費充足無可 厚非 但...