採用組織分離法培育菌種要經過哪些步驟

時間 2021-09-05 21:31:29

1樓:中國農業出版社

菌棒分離法,包括耳(菇)木分離法和代料基質分離法,通常稱之為「基內菌絲分離法」。菌棒分離法是獲得膠質菌的常用方法。菌棒分離法的主要步驟如下:

(1)耳木分離法

耳木的採集,必須在木耳、銀耳出耳盛期,在已經長過子實體的耳木上,選擇菌絲生長旺盛,周圍無雜菌的部分,用鋸擷取一小段,先把耳木表面的雜物洗淨,然後風乾或充分晾乾,使耳木乾燥。在分離之前,先把耳木通過酒精燈火焰,重複燎過多次,燒去表面的雜菌孢子,再用75%酒精表面消毒。組織塊必須從耳木中菌絲蔓延生長的部位選取,用無菌解剖刀挑取一小塊耳木組織,接入pda培養基上,挑取的組織塊越小越好,可減少雜菌汙染,提高分離成功率。

培養基高壓滅菌後加入廣譜抗菌素(每毫升培養基加鏈黴素或青黴素50~100單位),抑制細菌生長。認真檢查組織分離獲得的菌絲體,淘汰雜菌。挑取菌落邊緣菌絲,接種到新的培養基上,獲得純培養。

(2)代料基質分離法

選擇子實體發生早、產量高、無病蟲害的栽培瓶或栽培袋,待子實體長至八成熟時,從中篩選出最佳的一瓶(或袋),去掉子實體,然後用75%的酒精消毒整個栽培瓶(或袋),同時將接種工具和待接培養料一起放入接種箱內,用甲醛燻蒸消毒。分離時,去掉料面老菌絲,用接種針挑取小塊長有菌絲的培養料,接入試管內,適宜溫度下培養。選取菌絲生長良好的試管轉管純化。

怎樣用組織分離法分離黑木耳菌種?

2樓:中國農業出版社

選取優質的耳片,用無菌水沖洗子實體4~5次,在無菌的條件下,用刀片(或接種針)切取耳片肉質較厚處的內部組織一小塊,移入斜面培養基上,在25℃恆溫箱內培養4~6天,待長出菌絲後即可轉管培養,經提純後即獲得一級種。

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