1樓：菸草帶晚鴉
血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳與濾紙相比較,有以下優點 。
（1）醋酸纖維素薄膜對蛋白質樣品吸附極少，無“拖尾”現象，染色後背景能完全脫色，各種蛋白質染色帶分離清晰，因而提高了測定的精確性。
（2）快速省時.由於醋酸纖維素薄膜親水性較濾紙小，薄膜中所容納的緩衝液也較少，電滲作用小，電泳時大部分電流是由樣品傳導的，所以分離速度快，電泳時間短，一般電泳45—60min即可，加上染色，脫色，整個電泳完成僅需90min左右。
（3）靈敏度高,樣品用量少。血清蛋白僅需2μl血清,甚至加樣體積少至0.1μl，僅含5μg蛋白樣品也可得到清晰的分離帶。
臨床醫學檢驗利用這一點，檢測在病理情況下微量異常蛋白的改變。
（4）應用面廣。某些蛋白在紙上電泳不易分離，如胎兒甲種球蛋白，溶菌酶，胰島素，組蛋白等用醋酸纖維薄膜電泳能較好地分離。
（5）醋酸纖維素薄膜電泳染色後，經冰乙酸，乙醇混合液或其它溶液浸泡後可製成透明的幹板，有利於掃描定量及長期儲存。
2樓：聽雲者
醋酸纖維素薄膜電泳的特點：
醋酸纖維素薄膜是由醋酸纖維素加工製成的.醋酸纖維素薄膜作為是電泳支援體.
它有以下優點：
①電泳後區帶界限清晰；
②通電時間較短（二十分鐘至一小時）；
③它對各種蛋白質（包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶）都幾乎完全不吸附,因此無拖尾現象；
④對染料也沒有吸附,因此不結合的染料能完全洗掉,無樣品處幾乎完全無色.它的電滲作用雖高但很均一,不影響樣品的分離效果,由於醋酸纖維素薄膜吸水量較低,因此必需在密閉的容器中進行電泳,並使用較低有電流避免蒸發.
醋酸纖維素薄膜電泳已經廣泛用於血清蛋白,血紅蛋白,球蛋白,脂蛋白,糖蛋 白,甲胎蛋白,類固醇及同工酶等的分離分析中,儘管它的分辨力比聚丙醯胺凝膠電泳低,但它具有簡單,快速等優點.根據樣品理化性質,從提高電泳速度和分辨力出發選擇緩衝液的種類,ph和離子強度.選擇好的緩衝液最好是揮發性強,對顯色或紫外光等觀察區帶沒有影響,若樣品含鹽量較高時,宜採用含鹽緩衝液.
例如血清蛋白電泳可選用ph8.6的巴比妥緩衝液或硼酸緩衝液；氨基酸的分離則可選用ph7.2的磷酸鹽緩衝液等.
電泳時先將濾膜剪成一定長度和寬度的紙條.在欲點樣的位置用鉛筆做上記號,點上樣品,在一定的電壓,電流下電泳一定時間,取下濾膜,進行染色.不同物質需採用不同的顯色方法,如核苷酸等物質可在紫外分析燈下觀察定位,但許多物質必須經染色劑顯色.
醋酸纖維素薄膜電泳染色後區帶可剪下,溶於一定的溶劑中進行光密度測定.也可以浸於折射率為1.474的油中或其他透明液中使之透明,然後直接用光密度計測定.
它的缺點是厚度小,樣品用量很小,不適於製備.
原理：醋酸纖維素薄膜電泳（cellulose acetate membrance electrophoresis）以醋酸纖維薄膜為支援物.它是纖維素的醋酸酯,由纖維素的羥基經乙醯化而製成.它溶於丙酮等有機溶液中,即可塗布成均一細密的微孔薄膜,厚度以0.
1mm—0.15mm為宜.太厚吸水性差,分離效果不好；太薄則膜片缺少應有的機械強度則易碎.
醋酸纖維素薄膜與濾紙相比較,有以下優點
（1）醋酸纖維素薄膜對蛋白質樣品吸附極少,無“拖尾”現象,染色後背景能完全脫色,各種蛋白質染色帶分離清晰,因而提高了測定的精確性.
（2）快速省時.由於醋酸纖維素薄膜親水性較濾紙小,薄膜中所容納的緩衝液也較少,電滲作用小,電泳時大部分電流是由樣品傳導的,所以分離速度快,電泳時間短,一般電泳45—60min即可,加上染色,脫色,整個電泳完成僅需90min左右.
（3）靈敏度高,樣品用量少. 血清蛋白僅需2μl血清,甚至加樣體積少至0.1μl,僅含5μg蛋白樣品也可得到清晰的分離帶.
臨床醫學檢驗利用這一點,檢測在病理情況下微量異常蛋白的改變.
（4）應用面廣.某些蛋白在紙上電泳不易分離,如胎兒甲種球蛋白,溶菌酶,胰島素,組蛋白等用醋酸纖維薄膜電泳能較好地分離.
（5）醋酸纖維素薄膜電泳染色後,經冰乙酸,乙醇混合液或其它溶液浸泡後可製成透明的幹板,有利於掃描定量及長期儲存.
2、醋酸纖維素薄膜電泳與聚丙烯醯胺凝膠電泳相比,操作簡單,但分離效果不太好.如血清蛋白在醋酸纖維素薄膜電泳中,只能分離出5—6條區帶,而聚丙烯醯胺凝膠電泳可分離出數10條區帶.
[應用意義]
由於醋酸纖維素薄膜電泳操作簡單、快速、廉價.目前已廣泛用於檢測血漿蛋白、脂蛋白、糖蛋白、胎兒甲種球蛋白、體液、脊髓液、脫氫酶、多肽、核酸及其他生物大分子,為心血管疾病,肝硬化及某些癌症鑑別診斷提供了可靠的依據,因而成為醫學和臨床檢驗的常規技術.
[注意事項]
1、醋酸纖維素薄膜的預處理
市售醋酸纖維素薄膜均為幹膜片,薄膜的浸潤與選膜是電泳成敗的重要關鍵之一.將幹膜片漂浮於電極緩衝液表面,其目的是選擇膜片厚薄及均勻度,如漂浮15s—30s時,膜片吸水不均勻,則有白斑點或條紋,這提示膜片厚薄不勻,應捨去不用,以免造成電泳後區帶扭曲,界線不清,背景脫色困難,結果難以重複.由於醋酸纖維薄膜親水性比紙小,浸泡30min以上是保證膜片上有一定量的緩衝液,並使其恢復到原來多孔的網狀結構.
最好是讓漂浮於緩衝液的薄膜吸滿緩衝液後自然下沉,這樣可將膜片上聚集的小氣泡趕著走.點樣時,應將膜片表面多餘的緩衝液用濾紙吸去,以免緩衝液太多引起樣品擴散.但也不能吸得太乾,太乾則樣品不易進入薄膜的網孔內,而造成電泳起始點參差不齊,影響分離效果.
吸水量以不幹不溼為宜.為防止指紋感染,取膜時,應戴指套或用鑷子.
2、緩衝液的選擇
醋酸纖維素薄膜電泳常選用ph8.6巴比妥溶液,其濃度為0.05mol/l—0.
09mol/l.選擇何種濃度與樣品及薄膜的薄厚有關.選擇時,先初步定下某一濃度,如電泳槽兩極之間的膜長度為8 cm—10cm,則需電壓25v/cm膜長,電流強度為0.
4ma/cm—0.5ma/cm膜寬.當電泳達不到或超過這個值時,則應增加緩衝液濃度或進行稀釋.
緩衝液濃度過低,則區帶泳動速度快,並由於擴散變寬；緩衝液濃度過高,則區帶泳動速度慢,區帶分佈過於集中不易分辨.
3、加樣量
加樣品的多少與電泳條件、樣品的性質、染色方法與檢測手段靈敏度密切相關.作為一般原則,檢測方法越靈敏,加樣量則越少,對分離更有利.如加樣量過大,則電泳後區帶分離不清楚,甚至互相干擾,染色也較費時.
如電泳後用洗脫法定量時,每釐米加樣線上需加樣品0.1μl—0.5μl約相當於5μg—1000μg蛋白.
血清蛋白常規電泳分離時,每釐米加樣線加樣量不超過1μl,相當於60μg—80μg的蛋白質.但糖蛋白和脂蛋白電泳時,加樣量則應多些.對每種樣品加樣量均應先作預實驗加以選擇.
點樣好壞是獲得理想圖譜的重要環節之一,以印章法加樣時,動作應輕、穩,用力不能太重,以免將薄膜弄壞或印出凹陷而影響電泳區帶分離效果.
4、電量的選擇
電泳過程應選擇合適的電流強度,一般電流強度為0.4ma/cm—0.5ma/cm寬膜為宜.
電流強度高,尤其在溫度較高的環境中,可引起蛋白質變性或由於熱效應引起緩衝液中水分蒸發,使緩衝液濃度增加,造成膜片乾涸.電流過低,則樣品泳動速度慢且易擴散.
5、染色液的選擇
對醋酸纖維素薄膜電泳後染色應根據樣品的特點加以選擇.其原則是染料對被分離樣品有較強的著色力,背景易脫色；應儘量採用水溶性染料,不宜選擇醇溶性染料,以免引起醋酸纖維素膜溶解.
應控制染色時間.時間長,薄膜底色深不易脫去；時間短,著色淺不宜區分,或造成條帶染色不均,必要時可進行復染.
6、透明及儲存
透明液應臨用前配製,以免冰乙酸及乙醇揮發影響透明效果.這些試劑最好選用分析純.透明前,薄膜應完全乾燥.透明時間應掌握好,如在透明乙液中浸泡時間太長則薄膜溶解,太短則透明度不佳.
透明後的薄膜完全乾燥後才浸入石蠟中,使薄膜軟化.如有水,則液體石蠟不易浸入,薄膜不易平展.
醋酸纖維素薄膜電泳測定血清蛋白質有什麼臨床意義
3樓：可可粉醬
血清蛋白電泳是用電泳的方法，測定血清中各類蛋白佔總蛋白量的百分比。血清中的蛋白按照電泳時候的電泳速度不同，可以區分開來，分子量越小帶電荷越多、泳動速度就會越快。一般可以粗略的分為清蛋白，α1球蛋白，α2球蛋白，β球蛋白和γ球蛋白。
正常情況下白蛋白的數量是最多的，其次是γ球蛋白和β球蛋白。在骨髓瘤的使用者中γ球蛋白會明顯增多。腎病綜合徵的患者的白蛋白會降低，α2球蛋白增加。
有肝硬化的使用者γ球蛋白明顯增加。急性肝壞死的使用者白蛋白是明顯下降的。
4樓：匿名使用者
臨床上常用於分析血、尿等樣品中的蛋白質，供臨床上診斷肝腎等疾病
如急慢性腎炎、腎病綜合徵、腎功能衰竭時，清蛋白降低，α1、α2和β-球蛋白升高；慢性活動性肝炎、肝硬化時，清蛋白降低，β、γ-球蛋白升高；急性炎症時，α1、α2-球蛋白升高；慢性炎症時，清蛋白降低，α2、γ-球蛋白升高；紅斑狼瘡、類風溼關節炎時，清蛋白降低，γ-球蛋白顯著升高；多發性骨髓瘤時，清蛋白降低，γ-球蛋白升高，於β和γ-球蛋白區帶之間出現“m”帶。
5樓：匿名使用者
因為血清蛋白中的各種蛋白質在電泳時移動的速度不一樣，在電泳的過程中就會產生不同的區帶，根據區帶的情況就可以判斷一個人的健康狀況。
血清蛋白質醋酸纖維素薄膜電泳為什麼要點在毛面上
6樓：哲小痴囈
點在毛面更易使蛋白質混合樣本滲透在薄膜上，有利於電泳的順利進行
7樓：
血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳與濾紙相比較,有以下優點 。 （1）醋酸纖維素薄膜對蛋白質樣品吸附極少，無“拖尾”現象，染色後背景能完全脫色，各種蛋白質染色帶分離清晰，因而提高了測定的精確性。 （2）快速省時.
由於醋酸纖維素薄膜親水性較濾紙小
想請問一下在血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳的實驗得到的5區帶中，離點樣處近的蛋白質分子量是相對較大嗎？
8樓：***
離點樣處近的蛋白質是γ-球蛋白，這是一批混合物，分子量15-95萬。中間的a2球蛋白是30萬。所以沒法說哪個更大。
這個電泳與蛋白質的電荷、分子量和形狀都要關係，不像sds-page那樣完全按分子量排布。而且血清中蛋白質種類很多，粗略分成5批，每條帶都可能是多種蛋白的混合物。比如γ-球蛋白中包括igg、iga、igm、igd、ige五類，所以分子量範圍較寬。
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