1樓：鮑希榮鞠嫣
擴增效率理論上不可能超過2。計算值超過2，可能是因為pcr效率不高或者不穩定，結果線性度差，導致某個區間的資料點計算出來的擴增效率反而大於2.這樣的標準曲線如果作圖的話，資料點都不在一條直線上。
一般都是試劑擴增效率有問題，離子濃度不對，或者酶比較劣質。也有可能是引物不好。可以先換一對已知有效的引物，比如常見的內參的已驗證引物，如果用同樣的試劑和體系能做出好的曲線，e接近2，那就是引物問題，如果這樣也做不出來，就換試劑。
僅供參考，我很少做外標曲線，只有偶爾更換試劑體系的時候會做個梯度，一般曲線不好的話，取的資料點不同，e值會忽高忽低。整個線就是歪的。基本上都是試劑有問題。
引物擴增片段不超過500bp應該不會影響擴增效率。你先把pcr產物電泳看看有沒有問題，條帶沒問題，基本上引物就問題不大。
2樓：蕭霞齊儀
abi的儀器是接近100%最好，羅氏的是接近2最好，這個要看具體的機型。但是數值的表示當時可能不一樣，但是換算之後肯定都是接近100%最好。也就是每一輪擴增迴圈後，產物的量加倍
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