1樓:匿名使用者
核酸提取和合成
總核糖核酸提取勻漿某某組織使用的提取方法(公司,卡爾斯魯厄,德國)。該組織被擠壓,使用douncehomogenizator(縫紉機,德國哥廷根,)1000毫升trizol試劑。勻漿分離水相和有機相的增加200毫升氯仿後離心15分鐘,在4℃12000g。
核糖核酸沉澱加入500毫升的異丙醇和離心12000g10分鐘在4℃。由此產生的核酸洗用70%乙醇溶解在二乙基焦碳–處理水。洗脫後,最後的核糖核酸濃度測定光度法。
互補基因合成核糖核酸(1–13毫升溶液的濃度,1毫克/毫升)的逆轉錄反應使用1毫摩爾/升寡核苷酸引物和200的反轉錄酶逆轉錄酶(試劑,曼海姆,德國)在42℃1小時。
實時聚合酶鏈反應
聚合酶鏈反應(聚合酶鏈反應)進行描述(24)採用實時(逆轉錄)聚合酶鏈反應迴圈(rotor-gene2000;科貝特研究,悉尼,澳大利亞)。簡單地說,每個樣本進行調查,160毫微克的基因模板,加入10毫升quantitectsybrgreen混合大師(試劑盒)和4毫升的正向和反向引物(短引物的濃度,0.6毫摩爾/升每;表1),總體積20毫升與rna的免費水。
反應的結果是用量化的標準曲線產生的外部標準模板。基因為外部標準產生的巢式rt - pcr(長引物;表1)從總得到刺激角質形成細胞培養和微生物毒素。擴增產物進行純化,採用聚合酶鏈反應(minelute試劑盒純化試劑盒),並拷貝/毫升按公式計算,分子/毫升=na[克/毫升]/[鹼基對dna-length_660]_6.
022_1023。拷貝數量從1102到11011__然後提交給rt - pcr(短引物;表1)生成標準曲線。3 -磷酸甘油醛脫氫酶(型)(看家基因)以及炎性細胞因子腫瘤壞死因子(tnf -α–)和白細胞(基因)是並行執行的所有實驗樣品。
迴圈條件95℃15分鐘(初始變性)其次是35週期的94℃15秒(變性),56℃30秒(退火),和72℃75秒(擴充套件)。份數推斷相應的標準曲線和相對的1毫克的核糖核酸引入反應和正常型。聚合酶鏈反應產物進行分離和分析,為微控制器控制的擴增產物和由此產生的產品大小的瓊脂糖凝膠電泳(2%)(25)。
特異性擴增反應進一步控制熔化曲線,沒有模板控制,並沒有實時控制。
2樓:
第一段是rna提取和反轉錄成cdna,就是用trizol裂解,然後加氯仿離心,然後取上清加異丙醇沉澱,然後用70%的酒精清洗,然後用反轉錄酶把提的rna反轉錄成cdna
第二段是real time pcr檢測,先說明了體系,做了標準曲線, 檢測tnf-a和il-1b的表達量,然後說了程式,做完rt pcr還跑膠看了看
大概就這麼個意思 **不懂再問吧 太長了懶得慢慢翻譯。。。
求韓語翻譯人名,韓語翻譯,關於人名的
yim da hea 林多慧 xim za mi 申子美 韓名還要看漢字是什麼才知道是什麼意思的 這個很難翻譯,中譯韓還好點,韓譯中很難,因為很多不同漢字的翻譯都是一個同樣的韓語字,比如 虎,浩 韓語名字裡常用字 都是一個字 所以光憑韓語字很難翻譯。任多慧 yim da hea 意思應該就是多智慧 ...
求翻譯,關於英語詞源的
cater v.from m.e.catour n.buyer of provisions c.1400 aphetic for anglo fr.achatour fr.acatour,achatour,13c.fr.acheteur from o.fr.achater to buy,origin...
求翻譯,關於壓力容器的
只說大意 edge通常簡寫為be,也就是管道坡口。這段話意思是 對碳鋼和低合金鋼的管子從坡口端向內塗層75mm長度 內外雙面塗層 2。焊機方式,熱處理工藝及壓力,溫度等技術都要符合國際通用標準及採購者的要求,同時熱彎和冷彎工藝要符合國標gb1501998的規定。3。對於焊接連線的管,在焊接前應由ow...