麥芽糖標準曲線的標定

時間 2021-08-30 10:31:52

1樓:匿名使用者

標準曲線的繪製:取7支25ml刻度試管編號,分別加入麥芽糖標準液(1mg/ml)0,0.2,0.

6,1.4,1.8,2.

0ml,然後用吸管向各管加蒸餾水,使溶液達2ml,再各加3,5-二硝基水楊酸試劑2ml置沸水浴準確煮沸5min,取出冷卻,用蒸餾水稀釋至25ml,再分光光度計再波長520nm進行比色,記錄吸光值,以吸光值為縱座標,麥芽糖含量為橫座標繪製標準曲線。

樣品測定:取以上各管中酶作用後溶液及對照管中的溶液各2ml,分別放入25ml具塞刻度試管中,再加入2ml3,5-二硝基水楊酸試劑,混勻,置沸水中準確煮沸5min,取出,冷卻。用蒸餾水稀釋至25ml混勻,用分光光度計在波長520nm處進行比色,記錄吸光值,從麥芽糖標準曲線中查出麥芽糖含量,然後進行結果計算

結果計算:α-澱粉酶活性[麥`mg/(鮮重mg·5min)]=(a-a`)×樣品稀釋總體積/樣品鮮重(g)×v

(α+β)-澱粉酶總活性[麥`mg/(鮮重mg·5min)]=(b-b`)×樣品稀釋總體積/樣品鮮重(g)×v

式中:a為α-澱粉酶水解澱粉生成的麥芽糖量(在標準曲線上查得mg),a`為α-澱粉酶的對照管中的麥芽糖量(mg),b為(α+β)-澱粉酶共同水解澱粉生成的麥芽糖量(mg),b`為(α+β)-澱粉酶的對照管中麥芽糖量(mg),v為比色時所用樣品液體積(ml)

2樓:匿名使用者

標準曲線的線性:根據實驗資料求得麥芽糖、異麥芽糖、麥芽三糖、潘糖、異麥芽三糖、麥芽四糖、異麥芽四糖、麥芽五糖的線性迴歸方程依次為:y = 0.

00000550 x + 0.09949685(r2=0.9912);y = 0.

00000769 x - 0.02658243(r2=0.9751);y = 0.

00000552 x + 0.00145331(r2=0.9877);y = 0.

00000643 x - 0.00042279(r2=0.9989);y = 0.

00001441 x - 0.00411445(r2=0.9998);y = 0.

00000630 x - 0.00224903(r2=0.9997);y = 0.

00001437 x - 0.00582476(r2=0.9996);y = 0.

00001451 x - 0.03036338(r2=0.9979)。

答案補充 有表

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