1樓：北京索萊寶科技****
可以，但是最好使用醋酸銨，也可以不加，**效率可能會低一點，操作步驟：
方法一：
將憶確定的**產物溶液於加有300 µl te緩衝液的滅菌的1.5 ml eppendorf管中。
加入等體積酚-氯仿-異戊醇，搖晃均勻。
12000 rpm離心5 min。
小心將水相移到另一1.5 ml eppendorf管中，加入2.5~3倍體積（780 µl即可）預冷無水乙醇，以及10%水相體積的3 m naac（ph 5.2）。
置液氮3 min，取出後可置於－20℃放幾min。小心防止管子爆裂。
12000 rpm離心10 min。
迅速棄上清，一般在管底會有針尖大小的沉澱物，小心用無水乙醇清洗後置於恆溫器上乾燥（55℃）5~10 min至無乙醇氣味，再加入20 µl ddh2o溶解。
取20 µl電泳定量後－20℃儲存備用。
方法二：
先把乙醇-20度預冷，酶切完後加入2倍體積的無水乙醇，-20度放置10min以上，12000rpm離心10min，管底出現白色沉澱，倒掉上清，換用70%乙醇重複一次，再用水溶解白色沉澱既可，損失率蠻大，**率只有40%，或者更低。
2樓：雙子滴滴答答地
原理：限制性內切酶能特異地結合於一段被稱為限制性酶識別序列的dna序列之內或其附近的特異位點上,並切割雙鏈dna。 酶切可以是單酶切也可以是雙酶切。
單酶切操作比較簡單，但雙酶切如果兩種酶所用緩衝液成分不同（主要是鹽離子濃度不同）或反應。
請教酶切後，片段直接用無水乙醇沉澱的方法
3樓：匿名使用者
把酶切體系先加入等體積氯仿抽提，然版後離權心去掉氯仿，取水層，加入2倍體積的冷乙醇，混勻放入低溫冰箱進行醇沉。然後再離心吸掉乙醇晾乾，用純水溶解就行了
需要注意的就是醇沉之後的離心，因為連線體系一般都是很小的10ul左右，所以沉澱下來的dna是肉眼根本看不到的，所以可以在離心的時候記住ep管放的方向，那樣就能猜出沉澱在管的什麼位置.吸乙醇的時候要小心避開。
酶切後的dna可直接乙醇沉澱嗎
4樓：北京索萊寶科技****
可以，但是最
來好使用醋酸銨，自也可以不加，**效率可能會低一點，操作步驟：
方法一：
將憶確定的**產物溶液於加有300 µl te緩衝液的滅菌的1.5 ml eppendorf管中。
加入等體積酚-氯仿-異戊醇，搖晃均勻。
12000 rpm離心5 min。
小心將水相移到另一1.5 ml eppendorf管中，加入2.5~3倍體積（780 µl即可）預冷無水乙醇，以及10%水相體積的3 m naac（ph 5.2）。
置液氮3 min，取出後可置於－20℃放幾min。小心防止管子爆裂。
12000 rpm離心10 min。
迅速棄上清，一般在管底會有針尖大小的沉澱物，小心用無水乙醇清洗後置於恆溫器上乾燥（55℃）5~10 min至無乙醇氣味，再加入20 µl ddh2o溶解。
取20 µl電泳定量後－20℃儲存備用。
方法二：
先把乙醇-20度預冷，酶切完後加入2倍體積的無水乙醇，-20度放置10min以上，12000rpm離心10min，管底出現白色沉澱，倒掉上清，換用70%乙醇重複一次，再用水溶解白色沉澱既可，損失率蠻大，**率只有40%，或者更低。
在提取dna時，要用75%預冷乙醇進行dna沉澱,請問其機理是什麼？
5樓：
可我提取的時候好像是用95%的乙醇沉澱的，而後再用70%的乙醇洗滌。
1.為什麼用無水乙醇沉澱dna？
用無水乙醇沉澱dna，這是實驗中最常用的沉澱dna的方法。乙醇的優點是可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應，對dna很安全，因此是理想的沉澱劑。
dna溶液是dna以水合狀態穩定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去dna周圍的水分子，使dna失水而易於聚合。一般實驗中，是加2倍體積的無水乙醇與dna相混合，其乙醇的最終含量佔67％左右。因而也可改用95％乙醇來替代無水乙醇（因為無水乙醇的**遠遠比95％乙醇昂貴）。
但是加95％的乙醇使總體積增大，而dna在溶液中有一定程度的溶解，因而dna損失也增大，尤其用多次乙醇沉澱時，就會影響收得率。折中的做法是初次沉澱dna時可用95％乙醇代替無水乙酵，最後的沉澱步驟要使用無水乙醇。也可以用0.
6倍體積的異丙醇選擇性沉澱dna。一般在室溫下放置15－30分鐘即可。
2.在用乙醇沉澱dna時，為什麼一定要加naac或nacl至最終濃度達0.1～0.25mol/l？
在ph為8左右的溶液中，dna分子是帶負電荷的，加一定濃度的naac或nacl，使na+中和dna分子上的負電荷，減少dna分子之間的同性電荷相斥力，易於互相聚合而形成dna鈉鹽沉澱，當加入的鹽溶液濃度太低時，只有部分dna形成dna鈉鹽而聚合，這樣就造成dna沉澱不完全，當加入的鹽溶液濃度太高時，其效果也不好。在沉澱的dna中，由於過多的鹽雜質存在，影響dna的酶切等反應，必須要進行洗滌或重沉澱。
6樓：匿名使用者
實驗過程沉澱的效果最好.
就像用鎢做燈絲一樣,實驗的結果.
酶切後的質粒和基因組dna有何不同，為什麼
酶切的的水一定要用無核酸酶水嗎
7樓：
酶切後片段直接用無水乙醇沉澱的方法
把酶切體系先加入等體積氯仿抽提，然
版後離心去權掉氯仿，取水層，加入2倍體積的冷乙醇，混勻放入低溫冰箱進行醇沉。然後再離心吸掉乙醇晾乾，用純水溶解就行了
需要注意的就是醇沉之後的離心，因為連線體系一般都是很小的10ul左右，所以沉澱下來的dna是肉眼根本看不到的，所以可以在離心的時候記住ep管放的方向，那樣就能猜出沉澱在管的什麼位置.吸乙醇的時候要小心避開。
dna的純度會不會影響酶切產生的質量?為什麼
8樓：
dna的純
來度低，要看導致低的原因源是什麼
bai？
一般來說可能的原因包
du括zhi抽提時的乙醇或異丙醇殘留、dao蛋白殘留多、試劑中的雜質等。
一般來說會對後續的酶切有影響，尤其是乙醇殘留或存在酶抑制劑等。
你可以嘗試一下先酶切看看，如果發現對酶切確有影響。最簡單的方法就是使用液體**試劑盒對dna進行純化一下即可。
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