1樓:崇光熙
流動相不過濾。
因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥,因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾,而常用的方法是濾過,可採用millipore濾膜(0.2μm或0.
45μm)等濾器。泵的入口都應連線砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。
使用後沒有及時清洗泵
流動相不應含有任何腐蝕性物質,含有緩衝液的流動相不應保留在泵內,尤其是在停泵過夜或更長時間的情況下。如果將含緩衝液的流動相留在泵內,由於蒸發或洩漏,甚至只是由於溶液的靜置,就可能析出鹽的微細晶體,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環和柱塞等。因此,必須泵入純水將泵充分清洗後,再換成適合於色譜柱儲存和有利於泵維護的溶劑(對於反相鍵合矽膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
流動相走空
泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完,否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環,最終產生漏液。
沒有流動相流出,又無壓力指示怎麼辦?
可能是泵內有大量氣體,這時可開啟洩壓閥,使泵在較大流量(如5ml/min)下運轉,將氣泡排盡,也可用一個50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個可能原因是密封環磨損,需更換。
壓力和流量不穩了?
原因可能是氣泡,需要排除;或者是單向閥內有異物,可卸下單向閥,浸入丙酮內超聲清洗。有時可能是砂濾棒內有氣泡,或被鹽的微細晶粒或滋生的微生物部分堵塞,這時,可卸下砂濾棒浸入流動相內超聲除氣泡,或將砂濾棒浸入稀酸(如4mol/l硝酸)內迅速除去微生物,或將鹽溶解,再立即清洗。
壓力為啥過高或過低?
可能是是管路被堵塞,需要清除和清洗。壓力降低的原因則可能是管路有洩漏。檢查堵塞或洩漏時應逐段進行。
在進行梯度洗脫時,由於多種溶劑混合,而且組成不斷變化,因此帶來一些特殊問題,必須充分重視:
ps:(在液相色譜中對組分複雜的樣品採用梯度洗脫的方法。在同一個分析週期中,按一定程式不斷改變流動相的濃度配比,稱為梯度洗脫。
從而可以使一個複雜樣品中的性質差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的。
梯度洗脫的優點:1.縮短分析週期;2.提高分離能力;3.峰型得到改善,很少拖尾;4.增加靈敏度。但有時引起基線漂移。)
2樓:花語傳情
由於氣泡的存在,會造成色譜圖上出現尖銳的噪聲峰,嚴重時會造成分析靈敏度下降。氣泡變大進入流路或色譜柱時會使流動相的流速變慢或不穩定,使基線起伏。
3樓:匿名使用者
會造成壓力的波動、峰形變差,嚴重時裝置會停止工作
4樓:匿名使用者
看這個氣泡走到**了。
如果是泵前,那麼擰開排氣閥,purge就可以了。
如果走到儀器管路里面,卸下色譜柱,用異丙醇低流速沖洗過夜。
如果走到柱子裡面比較麻煩,反相柱子走純甲醇,進口處放低,出口處抬高,讓氣泡出來,也是低流速過夜,出口最好別接檢測器,用一根peek管接到廢液瓶裡面就可以了。
如果液相色譜的流動相管路中有氣泡應該怎樣處理?
5樓:匿名使用者
可到「湖南創特」「南京科捷」公司**上看看,裡面資料比較齊全,看了下,有一些色譜譜圖,色譜分析的問題及解決方案,如果沒有你想要的,也可打**直接諮詢,態度還不錯,希望對你有所幫助!
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